Przygotowanie granulatu Gushukang (GSK) do eksperymentów in vivo i in vitro

Yongjian Zhao; Qiang Wang; Shufen Liu; Yongjun Wang; Bing Shu; Dongfeng Zhao

doi:10.3791/59171

Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Przygotowanie granulatu Gushukang (GSK) do eksperymentów in vivo i in vitro

7.1K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/59171

⸱

9 maja 2019

Yongjian Zhao¹^,²^,³ , Qiang Wang¹^,²^,³ , Shufen Liu¹^,²^,³ , Yongjun Wang¹^,²^,³^,⁴ , Bing Shu¹^,²^,³ , Dongfeng Zhao¹^,²^,³

¹Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, ²Spine Institute, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, ³Key Laboratory of Theory and Therapy of Muscles and Bones, Ministry of Education, ⁴School of Rehabilitation Science, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine

W tym artykule

Podsumowanie

Ten artykuł zawiera szczegółowy protokół przygotowania roztworu roboczego granulatu Gushukang do badań na zwierzętach oraz granulatu GSK zawierającego surowicę do eksperymentów in vitro. Protokół ten może być stosowany do badań farmakologicznych leków ziołowych, a także do recept zarówno na eksperymenty in vivo, jak i in vitro.

Streszczenie

Tradycyjna chińska medycyna ziołowa odgrywa rolę alternatywnej metody leczenia wielu chorób, takich jak osteoporoza pomenopauzalna (POP). Granulat Gushukang (GSK), sprzedawany na receptę w Chinach, ma działanie ochronne na kości w leczeniu POP. Przed podaniem do organizmu zwykle wymagana jest jedna standardowa procedura przygotowawcza, która ma na celu promowanie uwalniania aktywnych składników z surowych ziół i wzmocnienie efektów farmakologicznych, a także wyników terapeutycznych. W niniejszym badaniu zaproponowano szczegółowy protokół stosowania granulatu GSK w testach eksperymentalnych in vivo i in vitro. Autorzy najpierw przedstawiają szczegółowy protokół do obliczania odpowiednich dla zwierząt dawek granulek do badań in vivo: ważenia, rozpuszczania, przechowywania i podawania. Po drugie, w artykule opisano protokoły skanowania mikro-tomografią komputerową i pomiarem parametrów kości. Oceniono przygotowanie próbki, protokoły działania mikrotomografii komputerowej oraz ilościowe określenie parametrów kości. Po trzecie, przygotowuje się granulki GSK zawierające surowicę, a surowicę zawierającą lek ekstrahuje się do osteoklastogenezy in vitro i osteoblastogenezy. Granulat GSK podawano dożołądkowo dwa razy dziennie szczurom przez trzy kolejne dni. Następnie pobrano krew, odwirowano, dezaktywowano i przefiltrowano. Na koniec surowicę rozcieńczono i wykorzystano do przeprowadzenia osteoklastogenezy i osteoblastogenezy. Opisany tutaj protokół można uznać za odniesienie do badań farmakologicznych ziołowych leków na receptę, takich jak granulki.

Wprowadzenie

Tradycyjna medycyna chińska (TCM) jest jednym z ważnych uzupełniających i alternatywnych podejść do leczenia osteoporozy¹^,². Odwar wodny jest podstawową i najczęściej używaną formą formuły³. Istnieją jednak również wady: zły gust, niedogodności podczas transportu, krótki okres trwałości i niespójne protokoły, ograniczające zarówno zastosowania, jak i efekty lecznicze. Aby uniknąć powyższych wad, a także uzyskać lepsze efekty, opracowano granulki, które są szeroko stosowane⁴. Chociaż w wielu badaniach analizowano mechanizmy farmakologiczne jednego lub więcej skute....