Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Zrewidowane podejście chirurgiczne indukujące hydrops endolymfatyczny u świnki morskiej

5.7K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/60597

⸱

4 czerwca 2020

 ,  ,  , 

W tym artykule

Podsumowanie

Artykuł ten demonstruje podejście zewnątrztwardówkowe polegające na zniszczeniu endolymfatycznego worka świnki morskiej i uszkodzeniu przewodu endolimfatycznego drobnym wykończkiem, aby wywołać eksperymentalne hydropsy endolimfatyczne.

Streszczenie

Endolymfatyczny hydrops to powiększenie scala media, najczęściej kojarzone z chorobą Meniere'a, choć mechanizmy patofizjologiczne pozostają niejasne. Aby odpowiednio zbadać cechy hydropsów endolimfatycznych, takich jak źródła utraty słuchu przy niskich częstotliwościach, potrzebny jest wiarygodny model. Świnka morska jest dobrym modelem, ponieważ słyszy w obszarach o niskiej częstotliwości, które rzekomo są dotknięte hydropsem endolimfatycznym. Wcześniejsze badania wykazały, że hydrops endolimfatyczny może być indukowany chirurgicznie za pomocą metod wewnątrzdrumpowych lub pozatwardówkowych, które polegają na wierceniu przewodu endolimfatycznego i worka orzeczkowego. Jednak nie wiadomo, czy możliwe jest stworzenie modelu hydropsu endolimfatycznego przy użyciu podejścia zewnątrzoponowego unikającego niebezpiecznego wiercenia w przewodzie endolimfatycznym i worku. Celem tego badania było zaprezentowanie zmodyfikowanego podejścia zewnątrzoponowego polegającego na wywołaniu eksperymentalnego hydropsu endolyfatycznego 30 dni po operacji poprzez zniszczenie pęcherza endolimfatycznego i uszkodzenie przewodu endolimfatycznego drobnym wyciskaniem. Próba składała się z siedmiu świnek morskich. Wykonano funkcjonalne pomiary słuchu, a następnie pobrano kości skroniowe do analizy histologicznej. Podejście to osiągnęło skuteczność na poziomie 86% w osiąganiu hydropsów endolimfatycznych. Ryzyko wycieku płynu mózgowo-rdzeniowego było minimalne. W próbce nie odnotowano zgonów okołooperacyjnych ani urazów tylnego kanału półkolistego. Przedstawiona metoda pokazuje bezpieczny i niezawodny sposób indukowania hydropsu endolimfatycznego w stosunkowo krótkim czasie, czyli 30 dni. Kliniczne implikacje są takie, że przedstawiona metoda stanowi wiarygodny model do dalszego badania źródeł utraty słuchu niskich częstotliwości, która może być związana z hydropsem endolimfatycznym.

Wprowadzenie

Hydrops endolimfatyczny to powiększenie scala media. Obecność hydropsu endolimfatycznego można zmierzyć za pomocą przekroju poprzecznego ośrodka scala. Uważa się, że kliniczne hydropsy endolimfatyczne mogą być powiązane z niskoczęstotliwościową utratą słuchu czuciowo-nerwową, taką jak w chorobie Meniere'a. Jednak źródło utraty słuchu pozostaje niejasne. Aby odpowiednio zbadać pochodzenie utraty słuchu niskiej częstotliwości związanej z hydropsem endolipidowym, potrzebny jest wiarygodny model.

W 1965 roku Kimura i Schuknecht opisali, jak indukować hydrops endolimfatyczny u świnki morskiej za pomocą podejścia wewnątrzdępowonowego

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie procedury wymienione bezpośrednio poniżej w sekcji Protokołu zostały przeprowadzone zgodnie z protokołami zatwierdzonymi przez Komitet ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt Instytucjonalnych Uniwersytetu Waszyngtońskiego w St. Louis.

1. Indukcja znieczulenia i monitorowanie parametrów życiowych

UWAGA: W badaniu wykorzystano świnki morskie z rodzaju NIH z pigmentem pochodzącymi z kolonii hodowlanej na miejscu.

  1. Używaj świnek morskich obu płci, ważących co najmniej 350 g.
  2. Umieść świnkę morską w neonatologicznej izolacie podgrzewającej i podaj mieszankę ketaminy i ksylaz....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Przedstawiona metoda wykorzystywała podejście zewnątrztwardówkowe do zniszczenia worka endolimfatycznego i uszkodzenia przewodu endolimfatycznego drobnym wyciskaniem u siedmiu świnek morskich, składających się z dwóch samców i pięciu samic. Średni czas trwania operacji wynosił 2 godziny od nacięcia do zamknięcia. Całkowity czas ćwiczeń wynosił od 5 do 10 minut. Potrzeba było do 4 godzin, by świnka morska całkowicie wybudziła się z narkozy. W próbce nie odnotowano zgonów wewnątrzoperacyjny.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Przedstawiona metoda zewnątrzoponowa wykazała skuteczność na poziomie 86% w uzyskaniu histologicznie potwierdzonego hydropsu endolimfatycznego oraz utraty słuchu w niskich częstotliwościach. Metoda ta niezawodnie uzyskała dowody histologiczne na hydrops endolifatyczny do 30. dnia po operacji, zgodnie z wcześniejszymi badaniami stosującymi podejście wewnątrztwardówkowe2. Znaczenie tej metody w porównaniu z istniejącymi metodami polega na tym, że nie jest wymagany wyciek płynu mózgowo-rdzeniowego, c.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Dziękujemy Shannon M. Lefler za pomoc przy liczbach i Tabeli Materiałów. Badania opisane w tej publikacji zostały wspierane przez National Institute of Deafness and Other Communication Disorders w ramach National Institutes of Health poprzez grant szkoleniowy "Development of Clinician/Researchers in Academic ENT", numer nagrody T32DC000022 (C.V.V.) oraz przez R01 DC014997 (J.T.L.). Treść jest wyłącznie odpowiedzialnością autorów i niekoniecznie odzwierciedla oficjalne poglądy Narodowych Instytutów Zdrowia.

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Strzykawka 12 mLWilk Henke-Sass5100-X00V0
1 mL i 3 mL strzykawkiBD Precision (zamówione z Fischer Sci)14-826-87 15859152
Wskazówka o przekroju motylkowym 27,5Terumo Surflo Skrzydłowy Zestaw Infuzji, Terumo Corporation, Japonia) (Zamówione od McKesson)448407
Szew 4-0McKesson1034507
Gąbki gazowe 4 x 4Książęcy (uporządkowany w formie McKesson)374454
Strzykawka 60 mLFisher Sci22-031-375
Wiertło anspach otologiczneAnspachSC2100
AtipamezolZoetis107204-6
Autoklaw.Fisher sci15-103-0508
Worki autoklawoweMcKesson524881
Separator bagnetówOlympusAL 130564
bupivicaineAuro Medics Pharma555150-169-10
przezroczysta sterylna zasłona3M1020
WatyFisherbrand (zamówione z Fisher Sci)22-456-885
Paciki watoweMcKesson508716
Diamentowe zadziarny #3, #2, #1 i #0,5 mmAnspachQD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD
Podpasaczka do pieluchMcKesson945330
jednorazowe ostrze 15Swann-Morton0305
enrofloxacynaHospira0409-4888-01
EpinefrynaMcKesson63739-0456
maść do oczuProdukty Dechra Vet17033-211-38
Wolniejsza windaGrace Medical215100FX
Żelowa pianaPfizer (Zamówione przez McKesson)82830
Podtrzymujące włosyOster Power Pro Cordless (zamówiony z Amazon)078400-020-000
peeling jodowyPurdue Pharma (zamówione od mcKesson)521243
Nożyczki do irysaOlympusCL-542114
ketaminaHenry Schein Zdrowie Zwierząt55853
Ringery mleczneB. Braun Medical (zamówione przez McKesson)186662
Lancetowy nóż firmy RosenGrace Medical151100FXw tekście określana jako curette
SmarMilex (zamówiony z Cooper Surgical)MX5030
Taśma maskująca3M (zamówione przez fisher sci19047259
Metalowy Basen ProstokątnyAmazonB07NQDBC6T
Uchwyt na igłyOlympusCR 213015-ENT
Drty: 27 gauge, 18 gaugeBD Precision (zamówione z Fischer Sci)14-826-48 14-826-5D
Neonatologiczny ogrzewający isolleteSystemy podtrzymywania życia w powietrzu731-1800
Mikroskop operacyjnyCarl ZeissOPMI pico
Butla z tlenemAirGasOX USP200
SaturacjaCapnoTrue (Zamówione z Medacx)M-3090112001
Sonda odbytu z kocem grzewczymAparat Harvardasonda: PY2 50-7217 Koc grzewczy: PY2 50-7214
Czerwony uchwyt na nadwozieLaboratorium LichtenhanaNie maProdukt wewnętrzny
Kąt prostyOlympusBV-230337
Rosen NeedleOlympusAM-130566spersonalizowany, to narzędzie, którego używam do rozdzierania worka
gumowe rurki do podawania O2Fisher Sci14-171-104
Folia sarnowaFisher SciNC9617977
Stereotaktyczny uchwyt głowicyWarsztat Maszyn WUSTLNie maProdukt wewnętrzny
Sterylne zasłonyKardynał Zdrowia7553
rurka ssąca przez BaronaGrace Medical034903FX 034905FX#3 i #5 Ssanie
Kleszcze tkankowe Adson BrownGrace Medical325112FX
Retraktor WeitlanderaOlympus Grace MedicalBL200011 100313FX
ksylazynaAkorn59399-110-20

Bibliografia

  1. Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac. Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).
  2. Salt, A. N., DeMott, J.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Model świnki morskiejpodejście zewnątrzoponoweobliteracja worka endolimfatycznegouszkodzenie przewodu endolimfatycznegoanaliza histologicznapomiar utraty słuchuwyciek płynu mózgowo-rdzeniowegotylny kanał półkolistyposzerzenie scala media