Artykuł ten demonstruje podejście zewnątrztwardówkowe polegające na zniszczeniu endolymfatycznego worka świnki morskiej i uszkodzeniu przewodu endolimfatycznego drobnym wykończkiem, aby wywołać eksperymentalne hydropsy endolimfatyczne.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Artykuł ten demonstruje podejście zewnątrztwardówkowe polegające na zniszczeniu endolymfatycznego worka świnki morskiej i uszkodzeniu przewodu endolimfatycznego drobnym wykończkiem, aby wywołać eksperymentalne hydropsy endolimfatyczne.
Endolymfatyczny hydrops to powiększenie scala media, najczęściej kojarzone z chorobą Meniere'a, choć mechanizmy patofizjologiczne pozostają niejasne. Aby odpowiednio zbadać cechy hydropsów endolimfatycznych, takich jak źródła utraty słuchu przy niskich częstotliwościach, potrzebny jest wiarygodny model. Świnka morska jest dobrym modelem, ponieważ słyszy w obszarach o niskiej częstotliwości, które rzekomo są dotknięte hydropsem endolimfatycznym. Wcześniejsze badania wykazały, że hydrops endolimfatyczny może być indukowany chirurgicznie za pomocą metod wewnątrzdrumpowych lub pozatwardówkowych, które polegają na wierceniu przewodu endolimfatycznego i worka orzeczkowego. Jednak nie wiadomo, czy możliwe jest stworzenie modelu hydropsu endolimfatycznego przy użyciu podejścia zewnątrzoponowego unikającego niebezpiecznego wiercenia w przewodzie endolimfatycznym i worku. Celem tego badania było zaprezentowanie zmodyfikowanego podejścia zewnątrzoponowego polegającego na wywołaniu eksperymentalnego hydropsu endolyfatycznego 30 dni po operacji poprzez zniszczenie pęcherza endolimfatycznego i uszkodzenie przewodu endolimfatycznego drobnym wyciskaniem. Próba składała się z siedmiu świnek morskich. Wykonano funkcjonalne pomiary słuchu, a następnie pobrano kości skroniowe do analizy histologicznej. Podejście to osiągnęło skuteczność na poziomie 86% w osiąganiu hydropsów endolimfatycznych. Ryzyko wycieku płynu mózgowo-rdzeniowego było minimalne. W próbce nie odnotowano zgonów okołooperacyjnych ani urazów tylnego kanału półkolistego. Przedstawiona metoda pokazuje bezpieczny i niezawodny sposób indukowania hydropsu endolimfatycznego w stosunkowo krótkim czasie, czyli 30 dni. Kliniczne implikacje są takie, że przedstawiona metoda stanowi wiarygodny model do dalszego badania źródeł utraty słuchu niskich częstotliwości, która może być związana z hydropsem endolimfatycznym.
Hydrops endolimfatyczny to powiększenie scala media. Obecność hydropsu endolimfatycznego można zmierzyć za pomocą przekroju poprzecznego ośrodka scala. Uważa się, że kliniczne hydropsy endolimfatyczne mogą być powiązane z niskoczęstotliwościową utratą słuchu czuciowo-nerwową, taką jak w chorobie Meniere'a. Jednak źródło utraty słuchu pozostaje niejasne. Aby odpowiednio zbadać pochodzenie utraty słuchu niskiej częstotliwości związanej z hydropsem endolipidowym, potrzebny jest wiarygodny model.
W 1965 roku Kimura i Schuknecht opisali, jak indukować hydrops endolimfatyczny u świnki morskiej za pomocą podejścia wewnątrzdępowonowego1. Ich technika polegała na użyciu tylnej jamy czaszkowej do dostępu do dołu operkulum i dołu podłukowego. Etapy obejmowały nacięcie opony twardej, cofnięcie móżdżku za pomocą waty nasączonej roztworem Ringera oraz wiercenie przez przewód endolyfatyczny i pośrednią część worka endolimfatycznego. Następnie do operkulum umieszczano wosk kostny, aby oddzielić przewód endolymfatyczny od dalszego worka endolimfatycznego. Defekt kraniotomii został zamknięty przez nałożenie wchłanialnego proszku żelatynowego (np. pianki żelowej) i przybliżenie mięśni leżących nad nimi. Dowody histologiczne na hydrops endolimfatyczny były konsekwentnie znajdowane w dniach 1, 3, 7, 14, 21 i 30 po operacji, co wykazało, że podejście wewnątrztwardówkowe jest niezawodną metodą indukowania histologicznie potwierdzonego hydropsu endonymfatycznego. Stosując to samo podejście wewnątrztwardówkowe co Kimura i Schuknecht, ale z różnymi punktami czasowymi, Salt i DeMott potwierdzili, że scala media w drugim obrócie ślimaka jest znacząco powiększone w dniu 4 i później po2. Chociaż rzeczywista zachorowalność wywołania wycieku płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF) przy użyciu podejścia śródtwardówkowego Kimury i Schuknechta nie została odnotowana w oryginalnym badaniu, obecność wycieku płynu mózgowo-rdzeniowego może zwiększać ryzyko zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych. Sugerowano, że utrata płynu mózgowo-rdzeniowego może prowadzić do wypływu perylimfy, skutkując jednoczesnym tymczasowym rozszerzeniem objętości endolimfatycznej u świnkimorskiej. Podejście zewnątrzoponowkowe do wywołania hydropsu endolifatycznego byłoby bezpieczniejszą opcją.
W 1989 roku Andrews i Bohmer opisali dwa podejścia chirurgiczne pozaoponowowe, które pozwalają dotrzeć do worka i przewodu endolimfatycznego, za pomocą podejścia środkowej lub tylnej części czaszki, aby wyeliminować worek endolimfatyczny4. Opisali usunięcie operkulum wiertłem diamentowym, a następnie albo wywiercenie pośredniej części worka endolimfatycznego, albo użycie drobnego kilofa do rozbicia worka i przewodu endolimfatycznego. W 1993 roku Lee, Wright i Meyerhoff opisali podobne podejście, które obejmowało wiercenie przez worek endolimfatyczny i kanał, ale różniło się tym, że jednocześnie blokowały także akweduktślimakowy nr 5. Wykazano obecność hydropsu endolimfatycznego, ocenianego za pomocą histologii, cztery tygodnie po zniszczeniu worka endolimfatycznego i zablokowaniu akweduktu ślimakowego. Megerian i in. jako pierwsi opublikowali artykuł wideo demonstrujący pozatwardówkowe zatarcie pęcherza i przewodu endofalowego, które polegało na wierceniu bezpośrednio w przyśrodkowej części operkulum, aby wejść do worka endolimfatycznego i przewodu6. Wykazano histologiczne dowody na hydrops endolimfatyczny u świnki morskiej poświęconej 28 tygodni po operacji, a także utratę słuchu w obszarze 16 kHz6. Czy możliwe było wywołanie histologicznie potwierdzonego hydropsu endolymfatycznego i utraty słuchu niskiej częstotliwości we wczesnym momencie przy użyciu metod pozatwardówkowych, nie było znane.
Głównym celem tego raportu jest wykazanie podejścia zewnątrzoponowego polegającego na wywołaniu eksperymentalnego hydropsu endolimfatycznego 30 dni po operacji poprzez zniszczenie worka endolimfatycznego i uszkodzenie przewodu endolimfatycznego drobnym wycinakiem. Uzasadnieniem stosowania tej techniki jest zaleta polegająca na uniknięciu konieczności wiercenia w kości skroniowej o przepalonym rdzeniu, co eliminuje ryzyko przypadkowego uszkodzenia opony twardej i wycieku płynu mózgowo-rdzeniowego, zmniejsza ryzyko uszkodzenia tylnego kanału półkolistego oraz zmniejsza ryzyko uszkodzenia zatoki egicznej.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wszystkie procedury wymienione bezpośrednio poniżej w sekcji Protokołu zostały przeprowadzone zgodnie z protokołami zatwierdzonymi przez Komitet ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt Instytucjonalnych Uniwersytetu Waszyngtońskiego w St. Louis.
1. Indukcja znieczulenia i monitorowanie parametrów życiowych
UWAGA: W badaniu wykorzystano świnki morskie z rodzaju NIH z pigmentem pochodzącymi z kolonii hodowlanej na miejscu.
2. Przygotowanie do operacji
3. Zabieg chirurgiczny
4. Opieka po zabiegu
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedstawiona metoda wykorzystywała podejście zewnątrztwardówkowe do zniszczenia worka endolimfatycznego i uszkodzenia przewodu endolimfatycznego drobnym wyciskaniem u siedmiu świnek morskich, składających się z dwóch samców i pięciu samic. Średni czas trwania operacji wynosił 2 godziny od nacięcia do zamknięcia. Całkowity czas ćwiczeń wynosił od 5 do 10 minut. Potrzeba było do 4 godzin, by świnka morska całkowicie wybudziła się z narkozy. W próbce nie odnotowano zgonów wewnątrzoperacyjny...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedstawiona metoda zewnątrzoponowa wykazała skuteczność na poziomie 86% w uzyskaniu histologicznie potwierdzonego hydropsu endolimfatycznego oraz utraty słuchu w niskich częstotliwościach. Metoda ta niezawodnie uzyskała dowody histologiczne na hydrops endolifatyczny do 30. dnia po operacji, zgodnie z wcześniejszymi badaniami stosującymi podejście wewnątrztwardówkowe2. Znaczenie tej metody w porównaniu z istniejącymi metodami polega na tym, że nie jest wymagany wyciek płynu mózgowo-rdzeniowego, c...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Dziękujemy Shannon M. Lefler za pomoc przy liczbach i Tabeli Materiałów. Badania opisane w tej publikacji zostały wspierane przez National Institute of Deafness and Other Communication Disorders w ramach National Institutes of Health poprzez grant szkoleniowy "Development of Clinician/Researchers in Academic ENT", numer nagrody T32DC000022 (C.V.V.) oraz przez R01 DC014997 (J.T.L.). Treść jest wyłącznie odpowiedzialnością autorów i niekoniecznie odzwierciedla oficjalne poglądy Narodowych Instytutów Zdrowia.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Strzykawka 12 mL | Wilk Henke-Sass | 5100-X00V0 | |
| 1 mL i 3 mL strzykawki | BD Precision (zamówione z Fischer Sci) | 14-826-87 15859152 | |
| Wskazówka o przekroju motylkowym 27,5 | Terumo Surflo Skrzydłowy Zestaw Infuzji, Terumo Corporation, Japonia) (Zamówione od McKesson) | 448407 | |
| Szew 4-0 | McKesson | 1034507 | |
| Gąbki gazowe 4 x 4 | Książęcy (uporządkowany w formie McKesson) | 374454 | |
| Strzykawka 60 mL | Fisher Sci | 22-031-375 | |
| Wiertło anspach otologiczne | Anspach | SC2100 | |
| Atipamezol | Zoetis | 107204-6 | |
| Autoklaw. | Fisher sci | 15-103-0508 | |
| Worki autoklawowe | McKesson | 524881 | |
| Separator bagnetów | Olympus | AL 130564 | |
| bupivicaine | Auro Medics Pharma | 555150-169-10 | |
| przezroczysta sterylna zasłona | 3M | 1020 | |
| Waty | Fisherbrand (zamówione z Fisher Sci) | 22-456-885 | |
| Paciki watowe | McKesson | 508716 | |
| Diamentowe zadziarny #3, #2, #1 i #0,5 mm | Anspach | QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD | |
| Podpasaczka do pieluch | McKesson | 945330 | |
| jednorazowe ostrze 15 | Swann-Morton | 0305 | |
| enrofloxacyna | Hospira | 0409-4888-01 | |
| Epinefryna | McKesson | 63739-0456 | |
| maść do oczu | Produkty Dechra Vet | 17033-211-38 | |
| Wolniejsza winda | Grace Medical | 215100FX | |
| Żelowa piana | Pfizer (Zamówione przez McKesson) | 82830 | |
| Podtrzymujące włosy | Oster Power Pro Cordless (zamówiony z Amazon) | 078400-020-000 | |
| peeling jodowy | Purdue Pharma (zamówione od mcKesson) | 521243 | |
| Nożyczki do irysa | Olympus | CL-542114 | |
| ketamina | Henry Schein Zdrowie Zwierząt | 55853 | |
| Ringery mleczne | B. Braun Medical (zamówione przez McKesson) | 186662 | |
| Lancetowy nóż firmy Rosen | Grace Medical | 151100FX | w tekście określana jako curette |
| Smar | Milex (zamówiony z Cooper Surgical) | MX5030 | |
| Taśma maskująca | 3M (zamówione przez fisher sci | 19047259 | |
| Metalowy Basen Prostokątny | Amazon | B07NQDBC6T | |
| Uchwyt na igły | Olympus | CR 213015-ENT | |
| Drty: 27 gauge, 18 gauge | BD Precision (zamówione z Fischer Sci) | 14-826-48 14-826-5D | |
| Neonatologiczny ogrzewający isollete | Systemy podtrzymywania życia w powietrzu | 731-1800 | |
| Mikroskop operacyjny | Carl Zeiss | OPMI pico | |
| Butla z tlenem | AirGas | OX USP200 | |
| Saturacja | CapnoTrue (Zamówione z Medacx) | M-3090112001 | |
| Sonda odbytu z kocem grzewczym | Aparat Harvarda | sonda: PY2 50-7217 Koc grzewczy: PY2 50-7214 | |
| Czerwony uchwyt na nadwozie | Laboratorium Lichtenhana | Nie ma | Produkt wewnętrzny |
| Kąt prosty | Olympus | BV-230337 | |
| Rosen Needle | Olympus | AM-130566 | spersonalizowany, to narzędzie, którego używam do rozdzierania worka |
| gumowe rurki do podawania O2 | Fisher Sci | 14-171-104 | |
| Folia sarnowa | Fisher Sci | NC9617977 | |
| Stereotaktyczny uchwyt głowicy | Warsztat Maszyn WUSTL | Nie ma | Produkt wewnętrzny |
| Sterylne zasłony | Kardynał Zdrowia | 7553 | |
| rurka ssąca przez Barona | Grace Medical | 034903FX 034905FX | #3 i #5 Ssanie |
| Kleszcze tkankowe Adson Brown | Grace Medical | 325112FX | |
| Retraktor Weitlandera | Olympus Grace Medical | BL200011 100313FX | |
| ksylazyna | Akorn | 59399-110-20 |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.