Przeszczep wysp trzustkowych pokrytych tłuszczem z wykorzystaniem białej tkanki tłuszczowej najądrza

Podsumowanie

Ta metoda przeszczepiania wysp trzustkowych pokrytych tłuszczem jest odpowiednia do wykrywania wszczepionych wysp trzustkowych w jamie wewnątrzotrzewnowej. Co ważne, nie wymaga stosowania środków wiążących biologicznie ani szycia.

Streszczenie

Przeszczep wysp trzustkowych to komórkowa terapia zastępcza w przypadku ciężkiej cukrzycy. Jama dootrzewnowa jest zazwyczaj miejscem przeszczepu tej procedury. Jednak dootrzewnowe przeszczepienie wysp trzustkowych ma pewne ograniczenia, w tym słabą skuteczność przeszczepu, trudną zdolność wykrywania przeszczepu i brak możliwości graftektomii do analizy po przeszczepie. W tym artykule "przeszczep wysp trzustkowych pokrytych tłuszczem", metoda dootrzewnowego przeszczepu wysp trzustkowych, która wykorzystuje białą tkankę tłuszczową najądrza, jest stosowana do oceny efektów terapeutycznych bioinżynieryjnych wysp trzustkowych. Prostota metody polega na wysiewaniu wysepek na białą tkankę tłuszczową najądrza i wykorzystaniu tej tkanki do pokrycia wysepek. Chociaż metodę tę można sklasyfikować jako technikę przeszczepu wysp dootrzewnowych, ma ona wspólne cechy z przeszczepem wysp w obrębie tkanki tłuszczowej. Metoda przeszczepu wysp trzustkowych pokrytych tłuszczem wykazuje jednak silniejsze efekty terapeutyczne niż przeszczepianie wysp trzustkowych w tkance tłuszczowej, w tym poprawę poziomu glukozy i insuliny we krwi oraz możliwość usunięcia przeszczepu. Zalecamy przyjęcie tej metody do oceny mechanizmów wszczepiania się wysp trzustkowych do białej tkanki tłuszczowej oraz efektów terapeutycznych bioinżynieryjnych wysp trzustkowych.

Wprowadzenie

Przeszczep wysp trzustkowych jest komórkową terapią zastępczą dla pacjentów z ciężką cukrzycą. Ostatnie doniesienia wykazały, że wskaźniki niezależności insulinowej po trzech latach od przeszczepu poprawiają się do 44%¹ i że około 80% biorców, którzy otrzymują łącznie ponad 600 000 ekwiwalentów wysp trzustkowych, osiąga niezależność insulinową². Co więcej, w najnowszym raporcie Collaborative Islet Transplant Registry ujawniono, że poziom glukozy we krwi na czczo utrzymywał się na poziomie 60-140 mg/dl przez okres 5 lat u ponad 70% pacjentów, którzy przeszli sam przeszczep wysp trzustkowych. Badanie wykazało również, że o....

Protokół

Poniższa procedura jest wykonywana w trzech krokach. Pierwszy etap obejmuje indukcję cukrzycy u myszy biorców i izolację wysp trzustkowych dawcy. Drugi krok polega na przygotowaniu wysp trzustkowych przed przeszczepem. W trzecim etapie wykonuje się przeszczepienie wysp trzustkowych na tkankę tłuszczową najądrza i pokrycie wysp trzustkowych za pomocą tkanki tłuszczowej. Następnie oceniono efekty terapeutyczne. Postępowanie z myszami i procedury eksperymentalne przeprowadzone w tym badaniu są zgodne z "Zasadami opieki nad zwierzętami laboratoryjnymi" (Przewodnik dotyczący opieki i wykorzystania zwierząt laboratoryjnych, publikacja National Institutes of Health wydanie 8....

Wyniki

Aby porównać skuteczność przeszczepu wysepek pokrytych tłuszczem z przeszczepem wysepek do jamy otrzewnowej, taką samą liczbę wysepek wszczepiono na otrzewną w lewym obszarze parakolicznym u kontrolnych zwierząt biorców z cukrzycą. Zaobserwowano, że poziomy glukozy we krwi myszy po przeszczepie wysepek pokrytych tłuszczem stopniowo i istotnie spadały w porównaniu z myszami po przeszczepie wysepek do jamy otrzewnowej (p = 0,0023; Rysunek 3A). Miesiąc po transplantacji, poziom glukozy we krwi .......

Dyskusja

Metoda przeszczepu wysp trzustkowych pokrytych tłuszczem obejmuje techniki z dwóch różnych technik przeszczepu: przeszczep wysp dootrzewnowych i przeszczep wysp trzustkowych w tkance tłuszczowej. Ponieważ błona powierzchniowa białej tkanki tłuszczowej najądrza jest uważana za białą tkankę tłuszczową, która jest pokryta otrzewną i która jest przyczepiona do najądrza, metodę przeszczepu wysp trzustkowych pokrytych tłuszczem można anatomicznie sklasyfikować jako rodzaj przeszczepu wysp dootrzewnowych. Technika, za pomocą kt.......

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
4-0 Nylon	Alfresa	ER2004NA45-KF2	Zamykanie brzucha
Alexa 488-sprzężony osł anty-świnka	morska Jackson Immunoresearch	706-546-148	Przeciwciało drugorzędowe dla przeciwciała insulinowego
Alexa 647-sprzężony osioł anty-królik	Jackson Immunoresearch	711-606-152	Przeciwciało drugorzędowe dla przeciwciała czynnika von Willebranda
DMEM, niski poziom glukozy, pirogronian	ThermoFisher Scientific	11885084	Hodowla wysepek, przesadzanie wysepek
Eosin	Fujifilm Wako Chemicals	051-06515	Używanie do barwienia tkanek przez eozynę
Eppendorf Probówki Safe-Lock, 1,5 mL	Eppendorf	30120086	Zbieranie wysepek
Stożkowe probówki wirówkowe Falcon 15 ml	Corning	352095	Wysepki zbierające
Falcon 40 & m Sitko do komórek	Falcon	352340	Służy do oddzielania wysp trzustkowych od innych tkanek trzustki
Stożkowe probówki wirówkowe Falcon 50 ml	Corning	352070	Odrzucanie nadmiernej pożywki/buforu
Antyinsulina świnki morskiej	Agilent Technologies Japan, Ltd. (Dako)	IR002	Pierwszorzędowe przeciwciało dla mysiej insuliny
Hematoxylin	Muto Pure Chemicals Co., Ltd.	30002	Służy do barwienia tkanek roztworem izodyny hematoksyliny
10%	Shionogi & Co., Ltd.	nr numer katalogowy	Używanie do dezynfekcji
Isoflurane	Fujifilm Wako Chemicals	095-06573	Używanie do znieczulenia
Labcon 1000 µ L ZapSilk Końcówki do pipet o niskiej retencji	Labcon	1177-965-008	Służy do oddzielania wysp trzustkowych od innych tkanek trzustki
Labcon 200 µ L ZapSilk Końcówki do pipet o niskiej retencji	Labcon	1179-965-008	Służy do wysiewania wysepek na białej tkance tłuszczowej najądrza
Mintsensor	Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd.,	8AEB02E	Służy do monitorowania poziomu glukozy we krwi
Pipetteman P-1000	Gilson	F123602	Służy do oddzielania wysp trzustkowych od innej tkanki trzustki
Pipetman P-200	Gilson	F123601	Służy do wysiewu wysepek na najądrza białą tkankę tłuszczową
Królik anty-vWF	Abcam	ab6994	Pierwszorzędowe przeciwciało dla mysiego czynnika von Willebranda