To badanie szczegółowo opisało niezawodny i opłacalny protokół zbierania i wykrywania mikroplastiku podczas codziennego użytkowania produktów z tworzyw sztucznych.
Method Article
To badanie szczegółowo opisało niezawodny i opłacalny protokół zbierania i wykrywania mikroplastiku podczas codziennego użytkowania produktów z tworzyw sztucznych.
Mikroplastik (MPs) staje się globalnym problemem ze względu na potencjalne zagrożenie dla zdrowia ludzkiego. Studia przypadków produktów z tworzyw sztucznych (tj. plastikowych kubków i czajników jednorazowego użytku) wskazują, że uwalnianie MP podczas codziennego użytkowania może być bardzo wysokie. Precyzyjne określenie poziomu uwalniania MP jest kluczowym krokiem w celu zidentyfikowania i ilościowego określenia źródła narażenia oraz oceny/kontroli odpowiedniego ryzyka wynikającego z tego narażenia. Chociaż protokoły pomiaru poziomów MP w wodach morskich lub słodkich zostały dobrze opracowane, warunki doświadczane przez produkty z tworzyw sztucznych w gospodarstwach domowych mogą się znacznie różnić. Wiele produktów z tworzyw sztucznych jest narażonych na częste działanie wysokich temperatur (do 100 °C) i jest schładzanych z powrotem do temperatury pokojowej podczas codziennego użytkowania. W związku z tym kluczowe znaczenie ma opracowanie protokołu pobierania próbek, który naśladuje rzeczywisty scenariusz codziennego stosowania dla każdego konkretnego produktu. Badanie to skupiło się na szeroko stosowanych butelkach do karmienia niemowląt na bazie polipropylenu w celu opracowania opłacalnego protokołu badań uwalniania MP wielu produktów z tworzyw sztucznych. Opracowany w ten sposób protokół umożliwia: 1) zapobieganie potencjalnemu zanieczyszczeniu podczas pobierania próbek i wykrywania; 2) realistyczna realizacja scenariuszy codziennego użytku i dokładne zbieranie MP uwalnianych z butelek do karmienia niemowląt w oparciu o wytyczne WHO; oraz 3) opłacalne oznaczanie chemiczne i fizyczne mapowanie topografii MP uwalnianych z butelek do karmienia niemowląt. Na podstawie tego protokołu procent odzysku przy użyciu standardowego polistyrenu MP (średnica 2 μm) wynosił 92,4-101,2%, podczas gdy wykryty rozmiar wynosił około 102,2% zaprojektowanego rozmiaru. Szczegółowo opisany tutaj protokół zapewnia niezawodną i opłacalną metodę przygotowania i wykrywania próbek MP, która może przynieść znaczne korzyści w przyszłych badaniach nad uwalnianiem MP z produktów z tworzyw sztucznych.
Większość rodzajów tworzyw sztucznych nie ulega biodegradacji, ale może się rozpaść na małe kawałki w wyniku procesów chemicznych i fizycznych, takich jak utlenianie i tarcie mechaniczne1,2. Kawałki plastiku mniejsze niż 5 mm są klasyfikowane jako mikroplastiki (MP). Posłowie są wszechobecni i można ich znaleźć niemal w każdym zakątku świata. Stały się one globalnym problemem ze względu na potencjalne zagrożenie dla ludzi i dzikiej przyrody3,4. Do tej pory znaczne nagromadzenie MP stwierdzono u ryb, ptaków, owadów5,6, a także u ssaków (myszy, w jelitach, nerkach i wątrobie7,8). Badania wykazały, że narażenie i akumulacja MP może uszkodzić metabolizm lipidów u myszy7,8. Ocena ryzyka skoncentrowana na rybach wykazała, że submikronowe MP mogą przenikać przez barierę krew-mózg i powodować uszkodzenia mózgu9. Należy zauważyć, że do chwili obecnej wszystkie wyniki dotyczące ryzyka MP uzyskano z badań na zwierzętach, podczas gdy konkretne ryzyko dla zdrowia ludzi jest nadal nieznane.
W ciągu ostatnich 2 lat, obawy o zagrożenie dla ludzkiego zdrowia ze strony MP znacznie wzrosły wraz z potwierdzeniem poziomów narażenia ludzi na MP. Nagromadzenie MP stwierdzono w ludzkim okrężnicy10, łożysku kobiet w ciąży11 i dorosłym stolcu12. Precyzyjne określenie poziomów uwalniania MP ma kluczowe znaczenie dla identyfikacji źródeł narażenia, oceny ryzyka dla zdrowia i oceny skuteczności wszelkich potencjalnych środków kontroli. W ciągu ostatnich kilku lat niektóre studia przypadków wykazały, że tworzywa sztuczne codziennego użytku (np. plastikowy czajnik13 i jednorazowe kubki14) mogą uwalniać bardzo duże ilości MP. Na przykład jednorazowe kubki papierowe (z wnętrzem laminowanym foliami polietylenowo-PE lub kopolimerowymi) uwalniały około 250 mikronów MP i 102 miliony submikronowych cząstek do każdego mililitra cieczy po wystawieniu na działanie gorącej wody o temperaturze 85-90 °C14. Badanie pojemników na żywność z polipropylenu (PP) wykazało, że podczas jednorazowego użycia z pojemnika uwalnia się do 7,6 mg cząstek plastiku15. Jeszcze wyższe poziomy odnotowano w torebkach herbaty wykonanych z politereftalanu etylenu (PET) i nylonu, które uwolniły około 11,6 miliarda MP i 3,1 miliarda nano-size MP do jednej filiżanki (10 ml) napoju16. Biorąc pod uwagę, że te produkty z tworzyw sztucznych codziennego użytku są przeznaczone do przygotowywania żywności i napojów, prawdopodobne jest uwolnienie dużych ilości MP, a ich spożycie stanowi potencjalne zagrożenie dla zdrowia ludzkiego.
Badania nad uwalnianiem MP z domowych produktów plastikowych (np. plastikowego czajnika13 i jednorazowych kubków14) są na wczesnym etapie, ale oczekuje się, że ten temat będzie cieszył się coraz większym zainteresowaniem ze strony badaczy i ogółu społeczeństwa. Metody wymagane w tych badaniach znacznie różnią się od tych stosowanych w badaniach morskich lub słodkowodnych w temperaturze pokojowej, gdzie istnieją już dobrze ugruntowane protokoły17. Z kolei badania dotyczące codziennego użytkowania produktów z tworzyw sztucznych stosowanych w gospodarstwach domowych obejmują znacznie wyższą temperaturę (do 100 °C), a w wielu przypadkach wielokrotne cykle powrotu do temperatury pokojowej. Wcześniejsze badania wykazały, że tworzywa sztuczne mające kontakt z gorącą wodą mogą uwalniać miliony MPs16,18. Ponadto codzienne użytkowanie produktów z tworzyw sztucznych może z czasem zmienić właściwości samego tworzywa sztucznego. Dlatego tak ważne jest opracowanie protokołu pobierania próbek, który dokładnie naśladuje najczęstsze scenariusze codziennego użytkowania. Kolejnym poważnym wyzwaniem jest wykrywanie mikrocząstek. Wcześniejsze badania wykazały, że uwalnianie MP z produktów z tworzyw sztucznych jest mniejsze niż 20 μm16,19,20. Wykrywanie tego typu MP wymaga zastosowania gładkich filtrów membranowych o małej wielkości porów. Ponadto konieczne jest odróżnienie MP od ewentualnych zanieczyszczeń wychwyconych przez filtr. Spektroskopia Ramana o wysokiej czułości jest używana do analizy składu chemicznego, co ma tę zaletę, że pozwala uniknąć konieczności stosowania lasera o dużej mocy, o którym wiadomo, że łatwo niszczy małe cząstki20. W związku z tym protokół musi łączyć procedury postępowania wolne od zanieczyszczeń z zastosowaniem optymalnych filtrów membranowych oraz metodą charakteryzacji, która umożliwia szybką i dokładną identyfikację MP.
Opisywane tutaj badanie skupiało się na butelce do karmienia niemowląt (BFB) na bazie PP, jednym z najczęściej używanych produktów z tworzyw sztucznych w codziennym życiu. Stwierdzono, że duża liczba MP jest uwalniana z plastikowego BFB podczas przygotowywania formuły18. W celu dalszych badań nad uwalnianiem MP z codziennych tworzyw sztucznych, szczegółowo opisano metodę przygotowania i wykrywania próbek BFB. Podczas przygotowywania próbki starannie przestrzegano standardowego procesu przygotowania formuły (czyszczenie, sterylizacja i mieszanie) zalecanego przez WHO21. Projektując protokoły zgodnie z wytycznymi WHO, upewniliśmy się, że komunikat MP z BFB naśladował proces przygotowania mleka modyfikowanego dla niemowląt stosowany przez rodziców. Proces filtrowania został zaprojektowany tak, aby dokładnie zbierać MP uwolnione z BFB. Na potrzeby identyfikacji chemicznej MP zoptymalizowano warunki pracy spektroskopii Ramanowskiej w celu uzyskania czystych i łatwych do zidentyfikowania widm MP, przy jednoczesnym uniknięciu możliwości spalenia cząstek docelowych. Na koniec opracowano optymalną procedurę testową i przyłożoną siłę, aby umożliwić dokładne trójwymiarowe mapowanie topografii MP przy użyciu mikroskopii sił atomowych (AFM). Opisany tutaj protokół (Rysunek 1) zapewnia niezawodną i opłacalną metodę przygotowania i wykrywania próbek MP, która może przynieść znaczne korzyści przyszłym badaniom produktów z tworzyw sztucznych.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
1. Przygotowanie gorącej wody
2. Uwalnianie MP podczas przygotowywania formuły
UWAGA: Uważnie przestrzegając standardowego procesu przygotowania formuły (czyszczenie, sterylizacja i mieszanie) zalecanego przez WHO21, MP uwolnione z BFB podczas przygotowywania formuły są naśladowane w następujących 3 krokach.
3. Przygotowanie próbki do identyfikacji MP i kwantyfikacji
4. Przygotowanie próbki do charakterystyki topografii AFM
5. Identyfikacja i kwantyfikacja MP za pomocą spektroskopii Ramana
6. Charakterystyka topograficzna MP za pomocą AFM
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Aby potwierdzić ten protokół, próbka wody została przygotowana przez dodanie standardowych kulek z mikroplastiku polistyrenowego (o średnicy 2,0 ± 0,1 μm) do wody DI. Dodana ilość MP odpowiadała 4 500 000 cząstek/l, co jest zbliżone do poziomu uwalniania MP z BFB. Zgodnie z sekcjami protokołu 2-3, MP zostały pomyślnie zebrane (Rysunek 4A), a wskaźnik odzysku wyniósł 92,4-101,2%. Ten wskaźnik odzysku jest porównywalny z poprzednim badaniem na MPS23. Za pomocą ImageJ wykryta śred...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Chociaż badania MP w wodach morskich i słodkich były szeroko komentowane, a odpowiedni protokół standardowy został opracowany17, badanie produktów z tworzyw sztucznych codziennego użytku jest ważnym, rozwijającym się obszarem badawczym. Różne warunki środowiskowe, w jakich występują produkty z tworzyw sztucznych do użytku domowego, oznaczają, że aby uzyskać wiarygodne wyniki, potrzebna jest dodatkowa ostrożność i wysiłki. Protokół badania musi być spójny z rzeczywistymi scenariuszami codziennego u...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Autorzy nie mają nic do ujawnienia. Prezentacja materiału w tej publikacji nie oznacza wyrażenia przez Trinity College Dublin jakiejkolwiek opinii na temat konkretnych firm lub produktów niektórych producentów i nie oznacza, że są one popierane, polecane, krytykowane lub w inny sposób popierane przez Trinity College Dublin w stosunku do innych o podobnym charakterze. Z wyjątkiem błędów i pominięć. Podjęto wszelkie uzasadnione środki ostrożności w celu zweryfikowania informacji zawartych w niniejszej publikacji. Opublikowane materiały są jednak rozpowszechniane bez jakichkolwiek gwarancji, wyraźnych lub dorozumianych. Odpowiedzialność za interpretację i wykorzystanie materiału spoczywa na czytelniku. W żadnym wypadku Trinity College Dublin nie ponosi odpowiedzialności za szkody wynikające z jego użytkowania.
Autorzy dziękują Enterprise Ireland (numer grantu CF20180870) oraz Science Foundation Ireland (granty o numerach: 20/FIP/PL/8733, 12/RC/2278_P2 i 16/IA/4462) za wsparcie finansowe. Dziękujemy również za wsparcie finansowe ze strony Stypendium Szkoły Inżynierii w Trinity College w Dublinie oraz Chińskiej Rady Stypendialnej (201506210089 i 201608300005). Ponadto doceniamy profesjonalną pomoc ze strony prof. Sarah Mc Cormack oraz zespołów techników (David A. McAulay, Mary O'Shea, Patrick L.K. Veale, Robert Fitzpatrick i Mark Gilligan itp.) z Trinity Civil, Structural and Environmental Department i Centrum Badawczego AMBER.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| Wspornik AFM | NANOSENSORY | PPP-NCSTAuD-10 | Aby uzyskać trójwymiarową topografię PP MPs |
| Mikroskop sił atomowych | Nova | NT-MDT | Aby uzyskać trójwymiarową topografię PP MPS |
| Detergent | Fairy Original | 1015054 | Do czyszczenia fabrycznie nowego produktu |
| Filtr membranowy z poliwęglanu powlekany złotem-PC-0,8 um | APC, Niemcy | 0.8um25mmZłoto | Aby zebrać mikroplastik w wodzie i skorzystać z testu Ramana |
| Oprogramowanie Gwyddion Gwyddion2.54 | Aby określić topografię MP | ||
| Oprogramowanie ImageJ | Amerykańskie Narodowe Instytuty Zdrowia | Nie, bezpłatne do użytku | Aby określić rozmiar MP |
| Kuchenka mikrofalowa | De'longhi, Włochy | 815/1195 | Przygotowanie gorącej wody |
| Mikroskop optyczny, x100 | Mitutoyo, Japonia | 46-147 | Aby znaleźć i obserwować małe MPP |
| Spektroskopia Ramana | Konfokalny system Ramanowski | Renishaw | Aby checmically określić PP-MPS |
| Trzęsące się łóżko-SSL2 | Stuart, Wielka Brytania | 51900-64 | Aby naśladować proces mieszania podczas przygotowywania próbki |
| Standardowe kulki z mikroplastiku polistyrenowego | Polysciences, Europa | 64050-15 | Aby zweryfikować solidność aktualny protokół |
| Pipeta Tansfer ze szklaną końcówką | Makro, Marka | 26200 | Do przenoszenia próbki wody do szklanego filtra |
| Myjka ultradźwiękowa | Witeg, Niemcy | DH. WUC. D06H | Do czyszczenia szkła |
| Pompa próżniowa | ILMVAC GmbH | 105697 | Do filtrowania próbki wody |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission