Obecny protokół opisuje urazowe uszkodzenia nerwów obwodowych (TPNI), w tym precyzyjnie skalibrowane zmiażdżenia, ściśle wyrównane i niewyrównane rany szarpane, a także przeszczepione i nieprzeszczepione szczeliny nerwu kulszowego u myszy. Specjalnie zaprojektowane czujniki są opracowywane do pomiaru urazów nerwów, indukowanych za pomocą powszechnie dostępnych narzędzi, aby zapewnić powtarzalne wyniki po TPNI.
Artykuł metodologiczny
Urazowe uszkodzenie nerwów obwodowych u myszy
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Urazowe uszkodzenie nerwów obwodowych (TPNI) jest częstą przyczyną zachorowalności po urazach ortopedycznych. Powtarzalne i precyzyjne metody uszkadzania nerwów i odnerwiania mięśni od dawna są celem badań nad układem mięśniowo-szkieletowym. Wiele urazowo uszkodzonych kończyn ma uraz nerwu, który określa długoterminowy wynik pacjenta. W ciągu kilku lat opracowano precyzyjne metody wytwarzania mikrochirurgicznych uszkodzeń nerwów, w tym zgnieceń, skaleczeń i przeszczepów szczelin nerwowych, co pozwala na powtarzalną ocenę wyników. Co więcej, tworzone są nowsze metody kalibrowanych urazów zmiażdżeń, które oferują klinicznie istotne korelacje z wynikami stosowanymi do oceny pacjentów. Zasady minimalnej manipulacji w celu zapewnienia niskiej zmienności uszkodzenia nerwów pozwalają na dodanie do tych modeli jeszcze większej liczby powiązanych uszkodzeń tkanek. Obejmuje to bezpośrednie zmiażdżenie mięśni i inne elementy urazu kończyny. Wreszcie, ocena atrofii i precyzyjna analiza wyników behawioralnych sprawiają, że metody te są kompletnym pakietem do badania urazów mięśniowo-szkieletowych, który realistycznie obejmuje wszystkie elementy urazowego uszkodzenia kończyn u człowieka.
Wprowadzenie
Urazowe uszkodzenie nerwów obwodowych (TPNI) jest częstą przyczyną zachorowalności po urazach ortopedycznych1,2,3. Rocznie około 3% pacjentów po urazach doznaje urazów nerwowych1,4, przy częstości występowania 3 50 000 przypadków5, co skutkuje 50 000 napraw chirurgicznych6. TPNI występują w szerokim zakresie nasilenia, a powrót do zdrowia zależy bezpośrednio od rodzaju i ciężkości tych urazów7,8,
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Projekt eksperymentalny i protokoły dla zwierząt zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt (IACUC) w Penn State University College of Medicine. Do badań wykorzystano dorosłe samce myszy C57BL/6J, w wieku 10 tygodni, o masie ciała 20-25 g. Zwierzęta były trzymane w obiekcie dla zwierząt w sterylnych warunkach zarządzania zwierzętami i zostały zaaklimatyzowane co najmniej 5 dni przed przeprowadzeniem badań.
1. Przygotowanie zwierząt
- Zwierzęta należy dokładnie znieczulić za pomocą koktajlu ketaminy (100 mg/kg) i ksylazyny (10 mg/kg) poprzez wstrzyknięcie dootrzewn....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Wykonany na zamówienie cyfrowy czujnik ciśnienia (Rysunek 1D) działa poprzez wykrywanie zmiany rezystancji FSR po przyłożeniu siły. To urządzenie wykrywa i rejestruje najmniejsze wielkości przyłożonego do niego ciśnienia z czasem reakcji <5 μs, częstotliwością próbkowania 20 Hz i zakresem ciśnienia 2,5-25 lbs31. Różnice w ciśnieniu indukowanym przez kleszcze (Rysunek 1C) indukowane przez kleszcze (Rysunek 1A,B), które .......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Historia badań TPNI rozciąga się na kilkadziesiąt lat11,12. Wczesne eksperymenty z psami i większymi gatunkami ustaliły znaczenie modeli zwierzęcych w badaniu wyników TPNI 36,37,38. Z biegiem czasu modele te przeniosły się na mniejsze gryzonie, a ich ustalone i powszechnie stosowane zwalidowane wyniki mierzą 39,40,41.<.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Podziękowania
Ta praca była wspierana przez granty z NIH (K08 AR060164-01A) i DOD (W81XWH-16-1-0725; W81XWH-19-1-0773) oprócz wsparcia instytucjonalnego ze strony Pennsylvania State University College of Medicine, Hershey, PA 17033, USA.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Preparat alkoholowy | COVIDIEN | 5110 | |
| Buprenorphine | ZooPharm | BSRLAB0.5-211706 | |
| C57BL/6J | Jackson Laboratories, Bar Harbor | N/A | |
| Aplikatory z bawełnianą końcówką | Puritan | 25-8062WC | |
| Nożyczki preparacyjne | ASSI | ASSI. | |
| Klej fibrynowy-TISSEEL | Rezystor wrażliwy na siłę Baxter | 1501263 | |
| FSR) | Nie dotyczy | Kleszcze FlexiForce A301 | |
| FST-Dumont | 5SF Inox, 11252-00 | ||
| GraphPad Prism | GraphPad Software Inc. | Wersja 8.4.3. | |
| Homeotermiczna poduszka grzewcza | Kent Scientific | RJ1675 | |
| Ketamina/Ketaved | VEDCO | VED1220 | |
| Kleszcze mikrochirurgiczne | Instrumenty Miltex Premium | BL1901 | |
| Maść z lubrykantem okulistycznym | Akorn Animal Health | NDC 59399-162-35 | |
| Szalka Petriego | VWR | 25384-092 | |
| Sól fizjologiczna buforowana fosforanami | Gibco | 14190-144 | |
| Powidon jod | Solimo | L0017765SA | |
| Precyzyjny czujnik nacisku | zacisku Wykonane na zamówienie | Nożyczki N/A | |
| Miltex Premium | 21-536 | ||
| Stereoskopowy mikroskop lornetkowy z zoomem | Świat Instrumenty precyzyjne | Model PZMIII | |
| Sterylne rękawiczki | Cardinal Health | 9L19E511 | |
| Zszywki chirurgiczne | 3M-Precise | DS-25 | |
| Taśma chirurgiczna | 3M-Microphore | 1530-0 | |
| Szwy | Ethicon | BV130-5 | |
| Strzykawka | BD | 309597 | |
| Philips Electronics | MG3750 | ||
| Ksylazyna/Anazed | Akorn Zdrowie zwierząt, Inc. |
Bibliografia
- Robinson, L. R. Traumatic injury to peripheral nerves. Muscle & Nerve. 23 (6), 863-873 (2000).
- Campbell, W. W. Evaluation and management of peripheral nerve injury. Clinical Neurophysiology. Official Journal of the Internation....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE
Poproś o pozwolenie