Niniejszym przedstawiamy protokół skupiający się na kontroli jakości podwiązania lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej poprzez techniczną modyfikację tradycyjnej procedury u szczurów w badaniach nad ostrym niedokrwieniem mięśnia sercowego i reperfuzją.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Podwiązanie lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej do badań nad niedokrwieniem i reperfuzją: ulepszenie modelu poprzez modyfikacje techniczne i kontrolę jakości
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Choroba niedokrwienna serca jest główną przyczyną zgonów na całym świecie. Całkowite zatrzymanie przepływu krwi w tętnicach wieńcowych powoduje zawał mięśnia sercowego z uniesieniem odcinka ST (STEMI), powodując wstrząs kardiogenny i śmiertelną arytmię, które wiążą się z wysoką śmiertelnością. Pierwotna interwencja wieńcowa (PCI) w celu reanalizy tętnicy wieńcowej znacznie poprawia wyniki STEMI, ale postępy poczynione w zakresie skrócenia czasu od drzwi do balonu nie zmniejszyły śmiertelności wewnątrzszpitalnej, co sugeruje, że potrzebne są dodatkowe strategie terapeutyczne. Podwiązanie lewej przedniej zstępującej tętnicy wieńcowej (LAD) u szczurów jest modelem zwierzęcym do badań nad ostrym IR mięśnia sercowego, który jest porównywalny ze scenariuszem klinicznym, w którym w przypadku STEMI stosuje się szybką rekanalizację naczyń wieńcowych przez PCI; jednak STEMI wywołany PCI jest technicznie trudną i skomplikowaną operacją związaną z wysoką śmiertelnością i dużą zmiennością wielkości zawału. Zidentyfikowaliśmy idealną pozycję do podwiązania LAD, stworzyliśmy gadżet do kontrolowania pętli werbla i wsparliśmy zmodyfikowany manewr chirurgiczny, zmniejszając w ten sposób uszkodzenia tkanek, aby ustalić wiarygodny i powtarzalny protokół badań nad ostrym niedokrwieniem i reperfuzją mięśnia sercowego (IR) dla szczurów. Jest to operacja niezapewniająca przeżycia. Proponujemy również metodę walidacji jakości wyników badań, która jest krytycznym krokiem dla określenia dokładności kolejnych analiz biochemicznych.
Wprowadzenie
Choroba niedokrwienna serca jest główną przyczyną zgonów na całym świecie1,2. Oprócz kontroli modyfikowalnych czynników ryzyka w celu zapobiegania rozwojowi choroby niedokrwiennej serca, strategie terapeutyczne są niezbędne w przypadku ostrego zespołu wieńcowego3,4. Stwierdzono, że wstrząs kardiogenny i śmiertelna arytmia w ostrym zawale mięśnia sercowego z uniesieniem odcinka ST (STEMI) zwiększają prawdopodobieństwo śmiertelności wewnątrzszpitalnej5,6,7,....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały przeprowadzone zgodnie z Przewodnikiem po opiece i użytkowaniu zwierząt laboratoryjnych, opublikowanym przez amerykańskie Narodowe Instytuty Zdrowia (publikacja NIH nr 85-23, poprawiona w 1996 roku). Protokół badania został zatwierdzony i zgodny z wytycznymi Instytucjonalnego Komitetu ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt na Katolickim Uniwersytecie Fu-Jen.
1. Przygotowanie przed zabiegiem
- Przygotowanie mokrych wacików z soli fizjologicznej
- Załóż maskę chirurgiczną i rękawiczki.
- Ściśnij niewielką porcję sterylnej bawełny i zwiń ją, aby uformować ....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Po zakończeniu niedokrwienia i reperfuzji mięśnia sercowego należy ocenić jakość podwiązania LAD przed przeprowadzeniem dalszych analiz biochemicznych lub molekularnych.
Stopień niedrożności LAD po podwiązaniu ustalono poprzez wstrzyknięcie 1 mL 2% barwnika Evans Blue za pomocą centralnego cewnika żylnego. Następnie mięsień sercowy z zachowaną perfuzją wieńcową został zabarwiony na niebiesko w odróżnieniu od obszaru nieperfundowanego, który pozostał czerwony (Ryc. 1A
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Proponowany protokół ma kilka charakterystycznych cech, takich jak identyfikacja dokładnej pozycji do podwiązania LAD, stworzenie gadżetu do kontrolowania pętli werbla w pojedynczym szwie oraz wspieranie zmodyfikowanego manewru chirurgicznego w celu zmniejszenia uszkodzenia tkanki, umożliwiając w ten sposób naukowcom dokładną, bezpieczną i konsekwentną ligację LAD, a także natychmiastową kontrolę stanu pętli werbla w celu przeprowadzenia badań nad ostrym IR mięśnia sercowego.
Lokalizacja podwi.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy oświadczają, że nie zachodzi konflikt interesów w związku z publikacją niniejszego artykułu.
Podziękowania
Ten model został opracowany dzięki wsparciu finansowemu Ministerstwa Nauki i Technologii Tajwanu (MOST 109-2320-B-030-006-MY3).
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Evan' s niebieski | Sigma Aldrich | E2129 | |
| Kleszcze | Shinva | ||
| Pentobarbital | Sigma Aldrich | 1507002 | |
| Ostrza skalpela | Shinva | s2646 | |
| Uchwyty do skalpela | Shinva | ||
| Jedwabne szwy | SharpointTM | DC-2150N | |
| Igła chirurgiczna | AnchorTM | ||
| Roztwór chlorku trifenylotetrazolu (TTC) | Solarbio | T8170-1 | |
| Wentylator | Harvard Gryzoń |
Bibliografia
- Khan, M. A., et al. Global epidemiology of ischemic heart disease: Results from the global burden of disease study. Cureus. 12 (7), 9349(2020).
- Nowbar, A. N., Gitto, M., Howard, J. P., Francis, D. P., Al-Lamee, R. Mortality from ischemic heart....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
