Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Źródło i droga zanieczyszczenia alkaloidami pirolizydyny w próbkach herbaty

2.6K wyświetleń

DOI:

10.3791/64375

28 września 2022

W tym artykule

Podsumowanie

Obecny protokół opisuje zanieczyszczenie alkaloidów pirolizydynowych (PA) w próbkach herbaty pochodzących z chwastów wytwarzających PA w ogrodach herbacianych.

Streszczenie

W próbkach herbaty znajdują się toksyczne alkaloidy pirolizydynowe (PA), które stanowią zagrożenie dla zdrowia ludzkiego. Jednak źródło i droga zanieczyszczenia PA w próbkach herbaty pozostały niejasne. W niniejszej pracy opracowano metodę adsorbacyjną w połączeniu z UPLC-MS/MS w celu oznaczenia 15 PA w glebie ryzosferycznej chwastów Ageratum conyzoides L., A. conyzoides, świeżych liściach herbaty i suszonych próbkach herbaty. Średnie odzyski wahały się od 78%-111%, ze względnymi odchyleniami standardowymi 0,33%-14,8%. Piętnaście par ryzosferycznych próbek gleby A. conyzoides i A. conyzoides oraz 60 świeżych próbek liści herbaty pobrano z ogrodu herbacianego Jinzhai w prowincji Anhui w Chinach i przeanalizowano je pod kątem 15 PA. Nie wszystkie 15 PA wykryto w świeżych liściach herbaty, z wyjątkiem N-tlenku intermediny (ImNO) i senecjoniny (Sn). Zawartość ImNO (34,7 μg/kg) była większa niż Sn (9,69 μg/kg). Ponadto zarówno ImNO, jak i Sn były skoncentrowane w młodych liściach krzewu herbacianego, podczas gdy ich zawartość była niższa w starych liściach. Wyniki wskazują, że PA w herbacie były przenoszone drogą chwastów wytwarzających PA - gleby - świeżych liści herbaty w ogrodach herbacianych.

Wprowadzenie

Jako metabolity wtórne, alkaloidy pirolizydynowe (PA) chronią rośliny przed roślinożercami, owadami i patogenami1,2. Do tej pory na całym świecie znaleziono ponad 660 PA i PA-N-tlenków (PANO) o różnej strukturze3,4. Rośliny wytwarzające PA występują głównie w rodzinach Asteraceae, Boraginaceae, Fabaceae i Apocynaceae5,6. PA łatwo utleniają się do niestabilnych alkaloidów dehydropirolizydynowych, które mają silną elektrofilowość i mogą atakować nukleofile, takie jak DNA i białka, powodując martwicę komórek wątroby, niedrożność żył, marskość wątroby, wodobrzusze i inne objawy7,8. Głównym narządem docelowym toksyczności PA jest wątroba. PA mogą również powodować toksyczne działanie na płuca, nerki i inne narządy oraz toksyczność mutagenną, rakotwórczą i rozwojową9,10.

W wielu krajach odnotowano przypadki zatrucia ludzi i zwierząt spowodowane spożyciem tradycyjnych ziół, suplementów lub herbat zawierających PA lub pośrednim zanieczyszczeniem żywności, takiej jak mleko, miód lub mięso (toksyczne po spożyciu pastwisk zawierających PA)11,12,13. Ustalenia Europejskiego Urzędu ds. Bezpieczeństwa Żywności (EFSA) wskazują, że substancje takie jak herbata (ziołowa) są ważnym źródłem narażenia ludzi na PAs/PANOs14. Próbki herbaty nie wytwarzają PA, podczas gdy rośliny wytwarzające PA są powszechnie spotykane w ogrodach herbacianych (np. Emilia sonchifolia, Senecio angulatus i Ageratum conyzoides)15. Wcześniej podejrzewano, że herbata może być zanieczyszczona PA z zakładów produkujących herbatę podczas zbioru i przetwarzania. Jednak PA wykryto również w niektórych ręcznie zbieranych liściach herbaty (tj. bez roślin wytwarzających PA), co sugeruje, że muszą istnieć inne drogi lub źródła zanieczyszczenia16. Przeprowadzono eksperyment z jednoczesną uprawą roślin szmacianki (Senecio jacobaea) z melisą (Melissa officinalis), miętą pieprzową (Mentha piperita), pietruszką (Petroselinum crispum), rumiankiem (Matricaria recutita) i nasturcją (Tropaeolum majus), a wyniki wykazały, że PA wykryto we wszystkich tych roślinach17. Sprawdzono, że PA są rzeczywiście przenoszone i wymieniane między żywymi roślinami za pośrednictwem soil18,19. Van Wyk et al.20 stwierdzili, że herbata rooibos (Aspalathus linearis) była poważnie zanieczyszczona w miejscach bogatych w chwasty i zawierała PA tego samego typu i proporcji. Jednak w herbacie rooibos w miejscach wolnych od chwastów nie wykryto żadnych PA.

Obecnie, ultra-wysokowydajna tandemowa chromatografia cieczowa (UPLC-MS/MS) o wysokiej selektywności i czułości jest szeroko stosowana w jakościowej i ilościowej analizie PA w produktach rolnych i żywności21,22. Metoda obróbki próbki zwykle składa się z ekstrakcji do fazy stałej (SPE) lub oczyszczania złożonych ekstraktów matryc spożywczych za pomocą QuEChERS (Quick Easy Cheap Effective Rugged Safe), które mogą uzyskać najwyższą możliwą czułość12,19. Jednak nadal brakuje solidnych metod analitycznych pozwalających na wykrywanie i kwantyfikację PA w złożonych matrycach, takich jak gleba, chwasty i świeże liście herbaty.

To badanie przeanalizowało 15 PA w próbkach suszonej herbaty, świeżych liściach herbaty, chwastach i próbkach gleby ryzosferycznej chwastów za pomocą UPLC-MS/MS w połączeniu z metodą oczyszczania adsorbentu. Ponadto pobrano 15 sparowanych próbek gleby ryzosferycznej chwastów i chwastów oraz 60 świeżych próbek liści herbaty z pięciu miejsc pobierania próbek w ogrodzie herbacianym Jinzhai w prowincji Anhui w Chinach i przeanalizowano je pod kątem 15 PA. Wyniki te mogą dostarczyć metody badania i pewnych informacji na temat źródła i drogi PA (zanieczyszczenia) w próbkach herbaty, aby zapewnić jakość i bezpieczeństwo herbaty.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Na potrzeby niniejszego badania zebrano następujące gatunki chwastów: Ludwigia prostrata Roxb., Murdannia triquetra (Wall. ex C. B. Clarke) Bruckn., Ageratum conyzoides L., Chenopodium ambrosioides, Trachelospermum jasminoide (L.) Lem., Ageratum conyzoides L., Emilia sonchifolia (L.) DC, Ageratum conyzoides L. i Crassocephalum crepidioides (Benth.) S. Moore'a. Świeże liście herbaty zostały wybrane z różnych drzew herbacianych Longjing 43#, a próbki suszonej herbaty były dostępną na rynku herbatą przetworzoną zgodnie z procesem produkcji zielonej herbaty (patrz Tabela materiałów).

1. Pobieranie próbek

  1. Zbierz 40 prawdziwych próbek.
    1. Zbierz losowo 10 chwastów, 10 gleb i 10 świeżych liści herbaty z wielu ogrodów herbacianych.
      UWAGA: Na potrzeby niniejszego badania pobrano próbki gleby z głębokości 20 cm w ilości próbki 200 g.
    2. Losowo zbierz 10 suszonych produktów herbacianych (250 g) z supermarketu.
  2. Zbierz próbki chwastów, gleby i świeżych liści herbaty, aby zbadać źródło zanieczyszczenia PA w herbacie.
    1. Ustaw pięć punktów pobierania próbek w tym samym ogrodzie herbacianym, z trzema powtórzeniami w każdym punkcie.
    2. Zbieraj próbki chwastów Ageratum conyzoides L. o najwyższej zawartości PA powszechnie występującej w ogrodach herbacianych.
      UWAGA: Ilość próbki w niniejszym badaniu wynosiła 250 g.
    3. Zbierz próbki gleby.
      UWAGA: Próbki gleby stanowiły glebę ryzosferyczną A. conyzoides na głębokości 20 cm i ilości próbki 200 g.
    4. Zbierz świeże liście herbaty z różnych części krzewów herbacianych, w tym jednego pąka z dwoma liśćmi, jednego pąka z trzema liśćmi, jednego pąka z czterema liśćmi i dojrzałych liści.
      UWAGA: Ilość próbki wynosiła 250 g.

2. Przykładowe traktowanie

  1. Próbki należy poddać wstępnej obróbce, wykonując poniższe czynności.
    1. Zmielić wysuszone próbki herbaty i gleby za pomocą młynka, sproszkowane próbki przepuścić przez sito o oczkach 200 i przechowywać w temperaturze -20 °C.
      UWAGA: Suszona herbata była dostępnym na rynku produktem herbacianym (patrz Tabela materiałów), więc była bezpośrednio rozdrabniana i przesiewana do przechowywania. Próbki gleby (200 g) umieszczono w przewiewnym miejscu w ciemności do wyschnięcia na powietrzu przez około tydzień.
    2. Homogenizować chwasty i świeże liście herbaty za pomocą homogenizatora i przechowywać je w temperaturze -20 °C.
  2. Wykonaj próbną obróbkę suszonych produktów herbacianych, świeżych liści herbaty i chwastów.
    1. Zważyć 1,00 g każdej próbki (suszone produkty herbaciane, świeże liście herbaty i chwasty) i umieścić ją w probówkach wirówkowych o pojemności 50 ml.
    2. Dodać 10 ml roztworu kwasu siarkowego o stężeniu 0,1 mol/l i wirować przez 2 minuty w celu ekstrakcji do fazy stałej (przy użyciu wkładu SPE, patrz tabela materiałów) i 1 minutę w celu oczyszczenia adsorbentu. Przeprowadzić ekstrakcję ultradźwiękową23 przez 15 minut, a następnie odwirować przez 10 minut z prędkością 9 390 x g w temperaturze pokojowej.
      UWAGA: Moc oscylatora ultradźwiękowego wynosiła 290 W, częstotliwość oscylacji wynosiła 35 kHz, a temperatura była ustawiona na 30 °C.
    3. Przenieść supernatant do probówki wirówkowej o pojemności 50 ml z zakraplaczem z plastikową końcówką.
    4. Wykonaj powyższe kroki, aby powtórzyć ekstrakcję raz. Połączyć oba supernatanty.
      1. Aktywować wkłady SPE za pomocą 5 ml metanolu i 5 ml wody dejonizowanej. Dodać 10 ml supernatantu do wstępnie aktywowanego wkładu i przeprowadzić czyszczenie próbki.
      2. Po tym, jak poziom roztworu próbki osiągnie górną warstwę wkładów, wymyj anality 5 ml 1% roztworu kwasu mrówkowego, a następnie 5 ml metanolu. Wyrzucić eluat.
      3. Eluować za pomocą 5 ml metanolu (zawierającego 0,5% wody amoniakalnej), przefiltrować eluat przez filtr membranowy 0,22 μm i przeanalizować za pomocą UPLC-MS/MS (patrz tabela materiałów).
    5. Przeprowadzić oczyszczanie próbki za pomocą adsorbentów.
      1. Pobrać 2 ml supernatantu (krok 2.2.4) do probówki wirówkowej o pojemności 10 ml wypełnionej adsorbentami GCB:PSA:C18 (10 mg:20 mg:15 mg, patrz tabela materiałów), wirować przez 1 minutę i wirować przy 9,390 x g przez 8 minut w temperaturze pokojowej.
      2. Przepuścić 1 ml supernatantu przez filtr membranowy 0,22 μm przed analizą za pomocą UPLC-MS/MS.
  3. Przeprowadzić obróbkę próbek gleby.
    1. Zważyć próbkę gleby o masie 1,00 g. Umieść go w probówce wirówkowej o pojemności 50 ml i dodaj 0,1 ml roztworu cytrynianu trisodowego o stężeniu 0,1 mol/l (patrz tabela materiałów), aby dostosować wartość pH gleby do 6,0.
    2. Odstawić na 2 minuty, a następnie dodać 10 ml roztworu metanolu kwasu siarkowego o stężeniu 0,1 mol/l, wirować przez 2 minuty i wstrząsać przez 30 minut, a następnie przeprowadzić ekstrakcję ultradźwiękową przez 30 minut.
    3. Odwirować przy 9,390 x g przez 10 minut i przenieść supernatant do probówki wirówkowej o pojemności 50 ml z zakraplaczem z plastikową końcówką.
    4. Postępuj zgodnie z powyższymi krokami, aby powtórzyć ekstrakcję i dwukrotnie połączyć supernatant.
      UWAGA: Metoda oczyszczania była taka sama jak w kroku 2.2.5.1 i kroku 2.2.5.2.

3. Analiza instrumentalna

  1. Wykryj 15 PA w próbkach suszonej herbaty, świeżych liściach herbaty, chwastach i glebie (próbki z kroku 2) za pomocą dostępnego na rynku systemu UPLC-MS/MS (2,1 mm x 100 mm, 1,8 μm) (patrz tabela materiałów).
  2. Ustawić temperaturę kolumny na 40 °C, natężenie przepływu na 0,250 ml/min, a objętość wtrysku na 3 μl.
  3. Ustaw fazę ruchomą A: metanol (zawierający 0,1% kwasu mrówkowego + 1 mmol/l mrówczanu amonu) i fazę ruchomą B: woda (zawierająca 0,1% kwasu mrówkowego + 1 mmol/l mrówczanu amonu).
  4. Ustaw procedurę elucji gradientowej: 10% A od 0,0 min do 0,25 min, 10%-30% A od 0,25 min do 6,0 min, 30%-40% A od 6,0 min do 9,0 min, 40%-98% A od 9,0 min do 9,01 min, która była utrzymywana przez 1,9 min i 98%-100% A od 11,0 min do 11,1 min, która była utrzymywana przez 2,9 min.
  5. Ustaw parametry spektrometru masowego: tryb jonizacji, źródło jonów dodatnich w elektrorozpylaniu (ESI+); ciśnienie rozpylacza, 7,0 bar; napięcie kapilarne, 4,0 kV; przepływ wsteczny w otworze stożkowym, 150 l/h; przepływ rozpuszczalnika, 800 l/h; temperatura rozpuszczalnika, 400 °C; przepływ gazu uderzeniowego, 0,25 mL/min.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Opracowano zoptymalizowaną metodę oczyszczania adsorpcyjnego i analizy 15 PA w próbkach suszonej herbaty, świeżych liści herbaty, chwastów oraz glebie, a następnie porównano ją z powszechnie stosowaną metodą oczyszczania z wykorzystaniem wkładów SPE. Wyniki wykazały, że odzyski 15 PA w próbkach suszonej herbaty, chwastów i świeżych liści herbaty przy użyciu wkładów SPE wyniosły 72%-120%, natomiast przy zastosowaniu oczyszczania adsorpcyjnego wyniosły one 78%-98% (Rysunek 1). Odzyski 15 PA w ...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Niniejsza praca miała na celu opracowanie skutecznej, czułej metody badania dróg i źródeł zanieczyszczeń PA w próbkach herbaty, a także rozmieszczenia PA w różnych częściach roślin herbacianych. Jednak w tym badaniu tylko 15 PA udało się rozdzielić na kolumnie chromatograficznej, co jest bardzo małą liczbą w porównaniu z dużą liczbą alkaloidów w gatunkach roślin 3,4. Było to związane nie tylko z właściwościami pakowania samej kolumny, ale także ze złożoną matrycą...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Przyrodniczą Chin (32102244), Narodowy Projekt Oceny Jakości i Bezpieczeństwa Produktów Rolnych (GJFP2021001), Naturalną Fundację Naukową Prowincji Anhui (19252002) oraz USDA (HAW05020H).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Acetonitryl (99,9%)Tedia Company,Inc.21115197Nr CAS: 75-05-8
Amoniak (25% -28%)Wuxi Zhanwang Chemical Reagent Co., Ltd.181210Nr CAS: 1336-21-6
Mrówczan amonu (97,0%)Anpel Laboratory Technoiogies (szanghaj)G0860050Nr CAS: 540-69-2
Węgiel-GCBCNWB7760030120-400 MESH, 10g. w pudełku 
Wirówka Z 36 HKHERMLEZ36HK30000  obr./min (min:10 obr./min), Wymiary (szer. x wys. x gł.):  71,5 cm&razy; 42 cm i razy; 51 cm
Dostępny w handlu produkt herbacianyLvming, Qingshan, Luyuchun, Changling, Huixing, Wuyunjian, HeshengchunHerbata sypanaZielona herbata
N-tlenek Europine (EuNO) (98,0%)BioCrick323256Nr CAS: 65582-53-8
Europine (UE) (98,0%)BioCrick98222Nr CAS: 570-19-4
Mrówczan (98,0%)AladynE2022005Nr CAS: 64-18-6
HC-C18CNWD211006040-63 μ m, 100 g w opakowaniu
Heliotryna (He) (98,0%)BioCrick906426Nr CAS: 303-33-3
N-tlenek heliotryny (HeNO) (98,0%)BioCrick22581Nr CAS: 6209-65-0
Wirówka szybkoobrotowa TG16-WS203158000 Maks.: 16000 obr/min, 330 &; 390 &; 300 mm (L & razy; W i czasy; H), Pojemność: 6 i razy; 50 ml
kolumna HSS T3Wody186004976ACQUITY UPLC HSS T3 (2,1 i razy; 100 mm 1,8 μ m)
Intermedine (Im) (98,0%)BioCrick114843Nr CAS:10285-06-0
Pośredni N-tlenek (ImNO) (98,0%)BioCrick340066Nr CAS:95462-14-9
Jakobinka (Jb) (98,0%)BioCrick132282048Nr CAS:6870-67-3
N-tlenek jakobinów (JbNO) (98,0%)ChemFacesCFN00461Nr CAS: 38710-25-7
Alkohol metylowy (99,9%)Firma Tedia, Inc.21115100Nr CAS: 67-56-1
PSAAgelaP19-0083340-60 μ m, 60 & Aring; 100 g w opakowaniu
Retrorsine (Re) (98,0%)BioCrick5281743Nr CAS:480-54-6
N-tlenek retrorsyny (ReNO) (98,0%)BioCrick5281734Nr CAS:15503-86-3
Senecionina (Sc) (98,0%)BioCrick5280906Nr CAS:130-01-8
N-tlenek senecjoniny (ScNO) (98,0%)BioCrick5380876Nr CAS:13268-67-2
Seneciphylline N-tlenek (SpNO) (98,0%)BioCrick6442619Nr CAS:38710-26-8
Seneciphylline (Sp) (98,0%)BioCrick5281750Nr CAS:480-81-9
Senkirkine (Sk) (98,0%)BioCrick5281752Nr CAS:2318-18-5
SPE PCXAgilent Technologies12108206Kation w trybie mieszanym, 6 ml
kwasu siarkowego (97%)Wuxi Zhanwang Chemical Reagent Co., Ltd. 1003019Nr CAS: 7664-93-9
Cytrynian trisodowySinpharm Chemical Reagent Co., Ltd.20121009Nr CAS: 6132-04-3
Myjka ultradźwiękowaSupmileKQ-600BRozmiar szczeliny wewnętrznej: 500 & razy; 300 & razy; 150 mm; Pojemność: 22,5 l
UPLC-xevoTQMSWatersZPLYY-003Potrójny czterostopniowy prętowy analizator masy, Waters Alliance 2695/Waters ACQUITY UPLC System fazy ciekłej
Oscylator termostatu kąpieli wodnejInstrument GuoyuSHY-2AHSCzasy oscylacji:  60-300 razy / min, Stały zakres temperatur: temperatura pokojowa do 100 & stopni; Z

Bibliografia

  1. Schramm, S., Kohler, N., Rozhon, W. Pyrrolizidine alkaloids: Biosynthesis, biological activities and occurrence in crop plants. Molecules. 24 (3), 498(2019).
  2. EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain (CONTAM). Scientific opinion on pyrrolizidine alkaloids in food and feed. EFSA Journal. 9 (11), 134(2011).
  3. Ma, C., et al. Determination and regulation of hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids in food: A critical review of recent research. Food and Chemical Toxicology. 119, 50-60 (2018).
  4. Keuth, O., Humpf, H. U., Fürst, P. Pyrrolizidine Alkaloids: Analytical Challenges. Encyclopedia of Food Chemistry. Melton, L., Shahidi, F., Varelis, P. 1, Elsevier. 348-355 (2019).
  5. Huang, D. Y., et al. Pyrrolizidine alkaloids and its source analysis in tea. Journal of Food Safety & Quality. 9 (2), 229-236 (2018).
  6. Liang, A. H., Ye, Z. G. General situation of the toxicity researches on Senecio. China Journal of Chinese Materia Medica. 31 (2), 93-97 (2006).
  7. Li, Y. H., et al. Proteomic study of pyrrolizidine alkaloid-induced hepatic sinusoidal obstruction syndrome in rats. Chemical Research in Toxicology. 28 (9), 1715-1727 (2015).
  8. Jia, Z. J., et al. Catalytic enantioselective synthesis of a pyrrolizidine-alkaloid-inspired compound collection with antiplasmodial activity. The Journal of Organic Chemistry. 83, 7033-7041 (2018).
  9. Yang, M., et al. First evidence of pyrrolizidine alkaloid N-oxide-induced hepatic sinusoidal obstruction syndrome in humans. Archives of Toxicology. 91 (12), 3913-3925 (2017).
  10. Chen, Z., Huo, J. R. Hepatic veno-occlusive disease associated with toxicity of pyrrolizidine alkaloids in herbal preparations. Netherlands Journal of Medicine. 68 (6), 252-260 (2010).
  11. Mattocks, A. R. Chemistry and Toxicology of Pyrrolizidine Alkaloid. , Academic Press. London, UK. (1986).
  12. Picron, J. F., Herman, M., Van Hoeck, E., Goscinny, S. Analytical strategies for the determination of pyrrolizidine alkaloids in plant based food and examination of the transfer rate during the infusion process. Food Chemistry. 266, 514-523 (2018).
  13. Kowalczyk, E., Kwiatek, K. Application of the sum parameter method for the determination of pyrrolizidine alkaloids in teas. Food Additives & Contaminants: Part A. 37 (4), 622-633 (2020).
  14. EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain (CONTAM). Risks for human health related to the presence of pyrrolizidine alkaloids in honey, tea, herbal infusions and food supplements. EFSA Journal. 15 (7), 04908(2017).
  15. Han, H., et al. Pyrrolizidine alkaloids in tea: A review of analytical methods, contamination levels and health risk. Food Science. 42 (17), 255-266 (2021).
  16. Nowak, M., et al. Interspecific transfer of pyrrolizidine alkaloids: An unconsidered source of contaminations of phytopharmaceuticals and plant derived commodities. Food Chemistry. 213, 163-168 (2016).
  17. Selmar, D., et al. Transfer of pyrrolizidine alkaloids between living plants: A disregarded source of contaminations. Environmental Pollution. 248, 456-461 (2019).
  18. Izcara, S., et al. Miniaturized and modified QuEChERS method with mesostructured silica as clean-up sorbent for pyrrolizidine alkaloids determination in aromatic herbs. Food Chemistry. 380, 132189(2022).
  19. Izcara, S., Casado, N., Morante-Zarcero, S., Sierra, I. A miniaturized QuEChERS method combined with ultrahigh liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry for the analysis of pyrrolizidine alkaloids in oregano samples. Foods. 9 (9), 1319(2020).
  20. Van Wyk, B. E., Stander, M. A., Long, H. S. Senecio angustifolius as the major source of pyrrolizidine alkaloid contamination of rooibos tea (Aspalathus linearis). South African Journal of Botany. 110, 124-131 (2017).
  21. Johnson, A. E., Molyneux, R. J., Merrill, G. B. Chemistry of toxic range plants. Variation in pyrrolizidine alkaloid content of Senecio, Amsinckia, and Crotalaria species. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 33 (1), 50-55 (1985).
  22. Vrieling, K., de Vos, H., van Wijk, C. A. M. Genetic analysis of the concentrations of pyrrolizidine alkaloids in Senecio jacobaea. Phytochemistry. 32 (5), 1141-1144 (1993).
  23. Han, H. L., et al. Development, optimization, validation and application of ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry for the analysis of pyrrolizidine alkaloids and pyrrolizidine alkaloid N-oxides in teas and weeds. Food control. 132, 108518(2022).
  24. Bodi, D., et al. Determination of pyrrolizidine alkaloids in tea, herbal drugs and honey. Food Additives & Contaminants: Part A. 31 (11), 1886-1895 (2014).
  25. European Union Commission. Commission Regulation (EU) 2020/2040 of 11 December 2020 amending Regulation (EC) No 1881/2006 as regards maximum levels of pyrrolizidine alkaloids in certain foodstuffs. Official Journal of the European Union. 14 (12), 1-4 (2020).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

alkaloidy pirolizydynowekontaminacja herbatyUPLC-MS/MSoczyszczanie adsorbentemekstrakcja do fazy stałejanaliza próbek glebyN-tlenek intermedynywykrywanie senecyninyanaliza liści herbatyścieżka przenoszenia alkaloidów