Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Zastosowanie inteligentnego, wysokowydajnego systemu badania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe/przesiewowego fagów oraz wskaźnika Lar oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe

2.3K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/64785

⸱

21 lipca 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Shandong Key Laboratory of Animal Disease Control and Breeding, Institute of Animal Science and Veterinary Medicine, Shandong Academy of Agricultural Sciences, P.R. China, Key Laboratory of Livestock and Poultry Multi-omics of MARA, 2Department of Genetic and Genomes Biology, University of Leicester, 3College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University

W tym artykule

Podsumowanie

Tutaj przedstawiamy zasadę, strukturę i instrukcję inteligentnego, wysokoprzepustowego systemu testowania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe/przesiewowego fagów. Jego zastosowanie ilustruje przykład Salmonelli wyizolowanej z drobiu w Shandong w Chinach. Obliczany jest indeks Lar, a jego znaczenie w ocenie oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe jest szczegółowo omawiane.

Streszczenie

Aby poprawić skuteczność testów wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe (AST) i wysokoprzepustowych badań przesiewowych fagów dla opornych bakterii oraz zmniejszyć koszty wykrywania, opracowano inteligentny, wysokoprzepustowy system przesiewowy AST/, w tym 96-punktowy inokulator matrycowy, konwerter akwizycji obrazu i odpowiednie oprogramowanie, zgodnie z kryteriami AST i punktami granicznymi oporności (R) sformułowanymi przez Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI). AspAT i statystyki rozkładu minimalnego stężenia hamującego (MIC) (od R/8 do 8R) 1500 szczepów Salmonelli wyizolowanych od drobiu w Shandong w Chinach w stosunku do 10 środków przeciwdrobnoustrojowych przeprowadzono za pomocą inteligentnego, wysokowydajnego systemu badań przesiewowych AST/fagów. Wskaźnik Lar, oznaczający "mniej antybiozy, mniejsza oporność i resztkowość aż do małej antybiozy", uzyskano poprzez obliczenie średniej ważonej każdego MIC i podzielenie przez R. Podejście to zwiększa dokładność w porównaniu z wykorzystaniem rozpowszechnienia oporności do scharakteryzowania stopnia oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe (AMR) wysoce opornych szczepów. W przypadku szczepów Salmonelli z wysokim opornością na środki przeciwdrobnoustrojowe fagi lityczne zostały skutecznie przesiane z biblioteki fagów przez ten system, a następnie obliczono i przeanalizowano widmo lizy. Wyniki pokazały, że inteligentny, wysokowydajny system badań przesiewowych AST/fagów jest sprawny, dokładny, wysoce wydajny, niedrogi i łatwy w utrzymaniu. W połączeniu z weterynaryjnym systemem monitorowania oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe firmy Shandong system ten nadawał się do badań naukowych i klinicznego wykrywania oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe.

Wprowadzenie

W związku z szerokim stosowaniem środków przeciwdrobnoustrojowych w zapobieganiu bakteryjnym chorobom zakaźnym, oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe (AMR) stała się globalnym problemem zdrowia publicznego1. Walka z AMR polega obecnie głównie na monitorowaniu AMR patogenów epidemiologicznych oraz na zastosowaniu terapii synergistycznej z wykorzystaniem wrażliwych środków przeciwdrobnoustrojowych i bakteriofagów litycznych2.

In vitro testy wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe (AST) stanowią podstawę monitorowania terapii oraz wykrywania poziomu AMR. Są one istotnym elementem farmakologii środków przeciwdrobnoustrojowych i krytyczną podstawą do stosowania leków w praktyce klinicznej. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) ze Stanów Zjednoczonych oraz Europejski Komitet ds. Testów Wrażliwości na Środki Przeciwdrobnoustrojowe (EUCAST) opracowały i zrewidowały międzynarodowe kryteria AST, a także stale modyfikują i uzupełniają metody AST oraz punkty odcięcia, aby określić MIC dla konkretnej kombinacji „drobnoustrój-środek przeciwdrobnoustrojowy” jako wrażliwą (S), oporną (R) lub pośrednią (I)3,4.

W latach 80. i 90. XX wieku szybko rozwijano i wdrażano do praktyki klinicznej automatyczne urządzenia do mikrorozcieńczeń w pożywce płynnej, takie jak Alfred 60AST, system VITEK, PHOENIXTM oraz Cobasbact5,6,7. Instrumenty te były jednak kosztowne, wymagały drogich materiałów eksploatacyjnych, a ich zakresy detekcji były zaprojektowane pod kątem leczenia pacjentów klinicznych5,6,7. Z tych powodów nie nadają się one do weterynaryjnych badań klinicznych oraz wykrywania dużych ilości szczepów o wysokiej oporności. W niniejszym badaniu opracowano inteligentny, wysokoprzepustowy system do AST/przesiewu fagów, składający się z inokulatora matrycowego 96-punktowego (Rycina 1), przetwornika akwizycji obrazu (Rycina 2) oraz odpowiedniego oprogramowania8, aby przeprowadzić AST dla partii szczepów bakterii przeciwko wielu środkom przeciwdrobnoustrojowym jednocześnie za pomocą metody rozcieńczeń w agarze. Ponadto system ten wykorzystano do wykrywania i analizy wzorców lizy fagów przeciwko bakteriom opornym na środki przeciwdrobnoustrojowe9, co pozwoliło na efektywny wybór fagów litycznych z biblioteki fagowej. Stwierdzono, że system ten jest wydajny, przystępny cenowo i łatwy w obsłudze.

Schemat aparatury laboratoryjnej do nakładania żelu elektroforetycznego z końcówkami pipet i systemem wyrównawczym.
Rysunek 1: Schemat strukturalny inokulatora z macierzą 96 punktów. 1: Płyta z pinami do inokulacji; 2: Ruchomy nośnik; 3: Blok z materiałem szczepionkowym; 4: Inkubowana płyta; 5: Podstawa; 6: Uchwyt roboczy; 7: Pin ograniczający. Proszę kliknąć tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.

Schemat ustawienia spektroskopowego: analiza optyczna, separacja DNA, pomiar fluorescencji, sprzęt laboratoryjny.
Rysunek 2: Schemat strukturalny przetwornika akwizycji obrazu. 1: Obudowa; 2: Ekran wyświetlacza; 3: Pomieszczenie do akwizycji obrazu; 4: Podstawa płyty detekcyjnej; 5: Wejście i wyjście z magazynu płyty detekcyjnej; 6: Płyta sterująca; 7: Urządzenie do konwersji akwizycji obrazu; 8: Źródło światła; 9: Skaner obrazu. Proszę kliknąć tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Szczepy Salmonella wykorzystane w niniejszym badaniu pobrano od drobiu w prowincji Shandong w Chinach, po uzyskaniu zgody Komitetu ds. Biobezpieczeństwa Instytutu Nauk o Zwierzętach i Medycyny Weterynaryjnej Akademii Nauk Rolniczych Shandong w Chinach.

1. Zastosowanie inteligentnego systemu wysokoprzepustowego AST8

  1. Przygotowanie inokulum
    1. Inkubować organizm kontrolny jakości Escherichia coli oraz 93 Sallmonella szczepy do testów wrażliwości na antybiotyki (AST) na płytkach z agarem Müllera-Hintona (MHA) przez 16–18 h w temperaturze 37 °C3.
    2. Przygotować inokulum każdego szczepu tak, aby odpowiadało wzorcowi mętności 0,5 wg skali McFarlanda, zgodnie z metodą określoną w standardzie CLSI.3następnie rozcieńczyć 10-krotnie.
    3. Miejsce 200 µL sterylnej soli fizjologicznej do poziomej 1Proszę podać tekst źródłowy do tłumaczenia. dołek (A1) płytki 96-dołkowej jako kontrolę negatywną, dwie zawiesiny organizmu kontroli jakości do poziomego 2nd oraz 3B&R dołki (A2 i A3) odpowiednio jako kontrolę dodatnią oraz kontrolę jakości. Dodać 200 µL rozcieńczonych zawiesin inokulum każdego badanego szczepu do odpowiednich 93 studzienek w 96-dołkowym bloku siewnym.
  2. Przygotowanie szalki z agarem przeciwdrobnoustrojowym
    1. Ustaw zakresy stężeń różnych testowanych środków przeciwbakteryjnych zgodnie z zakresem obliczeń indeksu Lar (od 0,125R do 8R). Stężenia obejmują zakres kontroli jakości lub od 0,0625R (zależnie od tego, która wartość jest niższa) do 8R.
      UWAGA: Jeśli indeks Lar nie zostanie obliczony, zakres stężeń antybiotyku można dobrać zgodnie z potrzebami badania AST.
    2. Przeprowadź schemat rozcieńczeń dwukrotnych w skali log2 dla roztworu antybiotyku, zaczynając od odpowiedniego stężenia roztworu zapasowego, zgodnie z metodą rozcieńczeń w agarze określoną w standardzie CLSI.3.
    3. Sterylizować szklane butelki o pojemności 50 ml zawierające 18 ml podłoża agar Mueller-Hinton. Dodać 2 ml odpowiednich rozcieńczeń roztworu przeciwdrobniczego do 18 ml stopionego podłoża schłodzonego do 45-50 °Cwymieszać dokładnie i przelać do płytek w komorze z laminarnym przepływem powietrza.
    4. Pozostaw agar do stężenia w temperaturze pokojowej (RT), pozostaw szczelinę pod pokrywką inkubowanych płytek i osusz powierzchnię agaru strumieniem powietrza przed inokulacją.
    5. Nanieś etykiety z typami środków przeciwdrobnoustrojowych i ich stężeniami na rewers inkubowanych płytek. Ułóż kilka inkubowanych płytek dla każdego środka przeciwdrobnoustrojowego w stosie, zachowując kolejność rozcieńczeń dwukrotnych (log2).
    6. Przygotuj dwie szalki z agarem bez dodatku leku, które posłużą jako kontrole dla każdego środka przeciwdrobnoustrojowego.
  3. Etapy szczepienia z użyciem inokulatora matrycowego do 96 punktów
    1. Zamocuj wysterylizowaną w autoklawie płytkę z pinami do inokulacji w uchwycie inokulatora matrycowego 96-punktowego w komorze z laminarnym przepływem powietrza.
    2. Umieść przygotowany blok nasienny z badanymi szczepami oraz płytkę z agarem po inkubacji na ruchomym nośniku, zachowując ten sam kąt ustawienia dla obu płytek.
    3. Przesuń wózek transportowy tak, aby blok z nasionami znajdował się bezpośrednio pod płytką z pinami do inokulacji.
    4. Naciśnij uchwyt obsługi, opuść płytkę z pinami do inokulacji i skieruj 96 pinów do inokulum w 96 studzienkach bloku zasiewowego.
    5. Powoli zwolnij uchwyt operacyjny, a następnie pozwól, aby płyta z pinami do inokulacji powróciła do pozycji wyjściowej pod wpływem działania sprężyny.
    6. Naciśnij uchwyt roboczy 2–3 razy, aby dokładnie wymieszać każdy inokulum, a następnie zanurz go. Przesuń płytkę nośną tak, aby inkubowana płytka znajdowała się bezpośrednio pod płytką z pinami do inokulacji.
    7. Naciśnij uchwyt sterujący, przesuń płytkę z pinami do inokulacji w dół i odczekaj 1–2 s, aby piny do inokulacji w pełni zetknęły się z powierzchnią inkubowanej płytki.
    8. Zwolnij uchwyt roboczy. Tym kończy się jedna inokulacja. Wstaw kolejną inkubowaną płytkę i kontynuuj cykl, aż do przetworzenia całej grupy płytek z agarem przeciwdrobnoustrojowym.
    9. Wymień kolejną płytkę z pinami do inokulacji oraz blok zasiewowy, a następnie zaszczep kolejną grupę badanych szczepów. Powtarzaj cykl aż do zakończenia wszystkich inokulacji.
      UWAGA: Najpierw zaszczep kontrolną płytkę z agarem (bez środka przeciwdrobnoustrojowego), następnie kolejne płytki zgodnie z rosnącym stężeniem leku, a na samym końcu drugą kontrolną płytkę z agarem, aby wykluczyć kontaminację lub przeniesienie środka przeciwdrobnoustrojowego. Objętość inokulatu zależy od objętości naturalnego naniesienia przez każdy pin, która wynosi około 2 µL.
  4. Inkubacja płytek z agarem przeciwdrobnoustrojowym
    1. Inkubować zaszczepione płytki z agarem przeciwdrobnoustrojowym w temperaturze pokojowej aż do momentu wchłonięcia wilgoci z plam szczepionki przez agar.
    2. Odwróć płytki i inkubuj je przez 16–20 h w temperaturze 37 °C dla testowanych szczepów, aby zapewnić tworzenie kolonii przez bakterie nie zahamowane.
  5. Akwizycja obrazów i statystyka danych
    1. Kliknij dwukrotnie w system akwizycji obrazów AST z macierzą 96 punktów aby otworzyć program.
    2. Kliknij w Informacje o teście na pasku zadań. Kliknij Nowe aby utworzyć nowe zadanie testowe i wypełnić informacje zgodnie z podpowiedziami, w tym kod, nazwę, źródło, bakterie, liczbę szczepów, antybiotyki oraz gradient.
    3. Kliknij w Zbieranie danych > Fotografia > Test element w celu wybrania nowo utworzonego zadania. Kliknij w Antybiotyki należy wybrać nazwę antybiotyku i kliknąć w Gradient aby dobrać początkowe stężenie tego antybiotyku.
    4. Kliknij w Połącz do podłączenia do konwertera akwizycji obrazu.
    5. Umieść odpowiednie inkubowane płytki na podstawie płytki detekcyjnej, kierując brakujący narożnik w prawy przedni róg w celu właściwej orientacji, a następnie wsuń je do przetwornika obrazu.
    6. Kliknij w Kolekcja w celu uzyskania obrazów. Gradient antybiotyku zostanie automatycznie przełączony na kolejny poziom. Należy kolejno umieszczać następne płytki i klikać w dalszym ciągu w Kolekcja do momentu zebrania szalek z tym antybiotykiem.
    7. Kliknij Antybiotykioraz wybierz kolejny zestaw inkubowanych płytek. Kliknij w Gradient aby wybrać gradient początkowy i przejść do kolejnej rundy akwizycji obrazów.
    8. Po zakończeniu wszystkich pobrań kliknij PrześlijProgram automatycznie rozpozna liczbę białych pikseli w każdym punkcie inokulacji na obrazach, określi, czy doszło do utworzenia kolonii, a następnie przeliczy obrazy na wartości MIC.
    9. Kliknij w Zapytanie aby uzyskać wszystkie wyniki MIC szczepów w odniesieniu do testowanych antybiotyków.
      UWAGA: Inteligentny system AST o wysokiej przepustowości nadaje się do oznaczania MIC dla dużych partii szczepów bakteryjnych. Proces badawczy, obejmujący przygotowanie, inokulację, inkubację oraz odczyt wyników, trwa 3 dni. Rodzaje antybiotyków oraz zakresy wykrywania MIC mogą być dobierane zgodnie z aktualnymi potrzebami, a główne materiały eksploatacyjne mogą być wykorzystywane wielokrotnie.
  6. Obliczanie indeksu Lar
    1. Dokładnie wyznacz indeks Lar, korzystając ze wzoru: Równania równowagi statycznej, Σ MCi/R, Σ 2ifi, wzór matematyczny w dynamice fizycznej.gdzie:
      MIC (minimalna stężenie hamujące wzrost)iminimalne stężenie hamujące.
      Zakres rozkładów MIC od MIC-3 do MIC3 oznacza dwukrotne rozcieńczenia seryjne skupione wokół R: 0,125R, 0,25R, 0,5R, R, 2R, 4R i 8R.
      symbol równania MICi nad R, wzór matematyczny, obliczanie równowagi statycznej, zastosowanie edukacyjne. jest 2ia zakres i wynosi od -3 do 3.
      Rpunkty graniczne oporności bakterii na środki przeciwdrobnoustrojowe zestandaryzowane przez CLSI.
      frozkład częstości MIC.
      UWAGA: Ogólny wskaźnik Lar jest średnią arytmetyczną wszystkich wskaźników Lar. Po obliczeniu wskaźnika Lar należy zaokrąglić wartość końcową do dwóch cyfr znaczących po przecinku.

2. Inteligentny system wysokoprzepustowego przesiewania fagów9

  1. Przygotowanie bloku nasion fagów oraz dwuwarstwowych płytek inkubacyjnych zawierających bakterie.
    1. Do namnażania różnych fagów należy zastosować metodę agarową dwuwarstwową10 lub metodę hodowli w cieczy11. Rozcieńczyć do odpowiedniego stężenia równoległego z mianem 1 x 104-5 pfu/mL i dodać 200 µL inokulum fagowego do 96-dołkowego bloku nasion.
    2. Przygotować dwuwarstwowe płytki z bakteriami do badania (10 mL dolnej pożywki agarowej [agar 12 g/L] oraz 6 mL górnej pożywki półpłynnej [6 g/L] z dodatkiem 100 µL bakterii [0,5 McFarland]).
    3. Przygotować dwuwarstwową płytkę inkubacyjną dla każdego badanego szczepu. Pozostawić szczelinę pod pokrywką dwuwarstwowej płytki i osuszyć powierzchnię agaru za pomocą nadmuchu w komorze bezpieczeństwa biologicznego.
  2. Test przesiewowy
    1. Umieścić przygotowany blok nasion fagów oraz płytkę dwuwarstwową na ruchomym nośniku 96-punktowego inokulatora matrycowego i przenieść wszystkie inokula fagowe na powierzchnię półagaru. Powtarzać cykle do czasu przebadania wszystkich szczepów.
    2. Pozostawić zaszczepione płytki dwuwarstwowe w RT do czasu całkowitego wchłonięcia wilgoci z plamek inokulum przez półagar.
    3. Odwrócić płytki i inkubować w warunkach odpowiednich dla badanych szczepów przez 4-6 h, aby zapewnić powstanie wyraźnych plamek litycznych.
  3. Analiza danych
    1. Pozyskać i zapisać obraz wyniku eksperymentalnego z każdej płytki dwuwarstwowej za pomocą konwertera akwizycji obrazu (kroki 1.5.4-1.5.6).
    2. Zarejestrować w arkuszu kalkulacyjnym liczbę i morfologię różnych kształtów plamek na podstawie uzyskanych obrazów oraz obliczyć odpowiednie proporcje różnych rodzajów fagów.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Zgodnie z protokołem inteligentnego systemu AST o wysokiej przepustowości, jego zastosowanie zilustrowano na przykładzie szczepów Salmonella pochodzących od drobiu w prowincji Shandong w Chinach.

Wzrost Salmonella szczepy na szalkach z agarem z ampicyliną (R dla 32 µg/mL) w stężeniach od 2 do 256 µg/mL wyznaczona przez konwerter akwizycji obrazu została przedstawiona w Rysunek 3Pozioma 1Proszę podać tekst źródłowy do przetłumaczenia. s...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Metoda rozcieńczania agaru jest dobrze ugruntowana i szeroko stosowana. Zasada działania wysokoprzepustowego systemu AST była zgodna z metodą rozcieńczania agaru. Jednym z kluczowych etapów w ramach protokołu był dokładny, wysokowydajny transfer 96 inokulantów za jednym razem, który wykonywano wiele razy z rzędu. Aby wykonać ten krytyczny krok, piny 96-punktowego inokulatora matrycowego były jednolite i bardzo gładkie. Naturalnym osadzaniem się każdej szpilki była objętość około 2 μl, która agregowała się w małe kropelki...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Yuqing Liu i in. złożyli chińskie patenty na 96-punktowy inokulator matrycowy i konwerter akwizycji obrazu oraz ich zastosowania (numer patentu ZL 201610942866.3 i numer patentu ZL 201910968255.X).

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez Narodowy Kluczowy Projekt Badawczo-Rozwojowy (2019YFA0904003); Nowoczesny system rolno-przemysłowy w prowincji Shandong (SDAIT-011-09); Projekt Optymalizacji Platformy Współpracy Międzynarodowej (CXGC2023G15); Główne zadania innowacyjne w dziedzinie nauk rolniczych i technologii innowacyjnego projektu Akademii Nauk Rolniczych w Shandong, Chiny (CXGC2023G03).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
96 dobrze  płytka hodowlanaPekin lanjieke Technology Co., Ltd11510
96-punktowy system akwizycji obrazu AST z matrycąNauk o Zwierzętach i Medycynie Weterynaryjnej, Akademia Nauk Rolniczych w ShandongAutorskie oprogramowanie Prawa autorskie
96-punktowy inokulator matrycowy Instytut Nauk o Zwierzętach i Medycyny Weterynaryjnej, Shandong Academy of Agricultural SciencesN/AOpatentowany produkt
AgarQingdao hi tech Park Przemysłowy Haibo Biotechnology Co., LtdHB8274-1
Amikacin Shanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdA857053
AmoksycylinaShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdA822839
AmpicillinShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdA830931
Waga analitycznaSartoriusBSA224S
Automatyczne oprogramowanie obliczeniowe dla indeksu Lar oporności na środki przeciwdrobnoustrojoweInstytut Nauk o Zwierzętach i Medycyny Weterynaryjnej, Akademia Nauk Rolniczych w ShandongAutorskie prawa autorskie
Bakterie Salmonella strainsInstytut Nauk o Zwierzętach i Medycynie Weterynaryjnej, Shandong Academy of Agricultural SciencesN/APochodzenie zwierzęce
Oporność na bakterie System zarządzania certyfikacją indeksu Lar V1.0Instytut Nauk o Zwierzętach i Medycyny Weterynaryjnej, Akademia Nauk Rolniczych w ShandongAutorskie prawa autorskie
CeftiofurShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdC873619
CiprofloxacinShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdC824343
Kwas klawulanowyShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdC824181
Czysty stół roboczySprzęt do oczyszczania Suzhou Co., LtdSW-CJ-2D Siarczan
kolistynyShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdC805491
Płytka hodowlanaInstytut Nauk o Zwierzętach i Medycyny Weterynaryjnej, Akademia Nauk Rolniczych w ShandongNie dotyczyOpatentowany produkt
DoksycyklinaShanghai McLean Biochemical Technology Co., Ltd
EnrofloksacynaShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdE809130
Filtr 0,22 i mu; mMilliporeSLGP033RB
FlorfenicolShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdF809685
GentamycynaShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdG810322
Szklana butelka 50 mlXuzhou Qianxing Glass Technology Co., LtdQX-7
detekcji rezystancji o wysokiej przepustowości V1.0Instytut Nauk o Zwierzętach i Medycyny Weterynaryjnej, Akademia Nauk Rolniczych w ShandongAutorskie prawa autorskie
Konwerter akwizycji obrazuInstytut Nauk o Zwierzętach i Medycyny Weterynaryjnej, Shandong Academy of Agricultural SciencesNie dotyczyOpatentowany produkt
MeropenemShanghai McLean Biochemical Technology Co., LtdM861173
AgarMueller-HintonQingdao hi tech Park przemysłowy Haibo Biotechnology Co., LtdHB6232
szalka Petriego 60 mm x 15 mmQingdao Jindian sprzęt biochemiczny Co., Ltd16021-1
szalka Petriego 90 mm x 15 mmQingdao Jindian biochemical equipment Co., Ltd16001-1
Salmonella fagiInstytut Nauk o Zwierzętach i Medycynie Weterynaryjnej, Akademia Nauk Rolniczych w ShandongNie dotyczy
inkubatora wytrząsarkiShanghai Minquan Instrument Co., LtdMQD-S2R
TurbidymetrShanghai XingBai Biotechnology Co., LtdF-TC2015
biblioteczny Varms V1.0Instytut Nauk o Zwierzętach i Medycynie Weterynaryjnej, Akademia Nauk Rolniczych w ShandongPrawa
Pionowa para wysokociśnieniowa sterylizatorSzanghaj Fabryka instrumentów medycznych Shen'anLDZX-75L
System zarządzania testami odporności na patogenyweterynaryjne Instytut Nauk o Zwierzętach i Medycynie Weterynaryjnej, Akademia Nauk Rolniczych w ShandongAutorskie prawa autorskie
Platforma monitorowania chmur odporności weterynaryjnej i kontroli fagów V1.0Instytut Nauk o Zwierzętach i Medycyny Weterynaryjnej, Akademia Nauk Rolniczych w ShandongAutorskie prawa autorskie
Instytut do oprogramowaniado oprogramowaniaD832390 System do oprogramowania System autorskie do oprogramowania do oprogramowania do oprogramowania

Bibliografia

  1. Ramanan, L., et al. Antimicrobial resistance-the need for global solutions. The Lancet Infectious Diseases. 13 (12), 1057-1098 (2013).
  2. Xiaonan, Z., Qing, Z., Thomas, S. P., Yuqing, L., Martha, R. J. C. inPhocus: Perspectives of the application of bacteriophages in poultry and aquaculture industries based on Varms in China. PHAGE: Therapy, Applications, and Research. 2 (2), 69-74 (2021).
  3. CLSI. Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests. CLSI document M100. , M100 32nd edition, Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne, PA . (2022).
  4. Yuqing, L., et al. Antimicrobial Sensitivity Testing Standard of EUCAST. , China Standards Press, Beijing. (2017).
  5. Barnini, S., et al. A new rapid method for direct antimicrobial susceptibility testing of bacteria from positive blood cultures. BMC Microbiology. 16 (1), 185-192 (2016).
  6. Höring, S., Massarani, A. S., Löffler, B., Rödel, J. Rapid antimicrobial susceptibility testing in blood culture diagnostics performed by direct inoculation using the VITEK®-2 and BD PhoenixTM platforms. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. 38 (3), 471-478 (2019).
  7. Dupuis, G. Evaluation of the Cobasbact automated antimicrobial susceptibility testing system. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. 4 (2), 119-122 (1985).
  8. A system of bacterial antimicrobial resistance detection and its operation method. China Patent. , ZL 201610942866.3 (2019).
  9. A high throughput test plate for screening bacteriophage of zoonotic pathogens and its application. China Patent. , ZL 201910968255.X (2022).
  10. Adams, M. H. Bacteriophages. , Interscience Publishers, New York. (1959).
  11. Nair, A., Ghugare, G. S., Khairnar, K. An appraisal of bacteriophage isolation techniques from environment. Microbial Ecology. 83 (3), 519-535 (2022).
  12. Shandong veterinary antibiotic resistance system. , http://www.varms.cn (2023).
  13. Ming, H., et al. Comparison of the results of 96-dot agar dilution method and broth microdilution method. Chinese Journal of Antibiotics. 43 (6), 729-733 (2018).
  14. Laxminarayan, R., Klugman, K. P. Communicating trends in resistance using a drug resistance index. BMJ Open. 1 (2), e000135(2011).
  15. Chen, Y., et al. Assessing antibiotic therapy effectiveness against the major bacterial pathogens in a hospital using an integrated index. Future Microbiology. 12, 853-866 (2017).
  16. Ciccolini, M., Spoorenberg, V., Geerlings, S. E., Prins, J. M., Grundmann, H. Using an index-based approach to assess the population-level appropriateness of empirical antibiotic therapy. Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 70 (1), 286-293 (2015).
  17. Yanbo, L., et al. Preliminary application of inoculation system for high-throughput drug susceptibility test. China Poultry. 42 (6), 52-57 (2020).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

System wysokoprzepustowyminimalne stężenie hamująceszczepy Salmonellamatryca 96 punktówakwizycja obrazuagar dwuwarstwowy
Zastosowanie inteligentnego, wysokowydajnego systemu badania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe/przesiewowego fagów oraz wskaźnika Lar oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.