Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Opracowanie modelu myszy z przetoką ustno-nosową

2.3K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/65578

⸱

8 września 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

W tym artykule

Podsumowanie

Ten artykuł przedstawia krok po kroku procedurę tworzenia modelu myszy z przetoką ustno-nosową. Przetoka ustno-nosowa została utworzona przez zastosowanie podgrzanej kauteryzacji okulistycznej w celu uszkodzenia środkowej części podniebienia twardego, co spowodowało powstanie otworu między jamą ustną a nosową.

Streszczenie

To badanie przedstawia metodę wykorzystującą podgrzewaną kauteryzację okulistyczną do opracowania realnego modelu do badania przetok ustnych. Myszy C57BL/6 wykorzystano do ustalenia modelu przetoki ustnej nosowej (ONF). Aby stworzyć ONF, myszy zostały znieczulone, unieruchomione, a ich twarde podniebienia zostały odsłonięte. Podczas zabiegu chirurgicznego za pomocą kauteryzacji okulistycznej wywołano uszkodzenie błony śluzowej o wymiarach 2,0 x 1,5 mm pełnej grubości w linii środkowej podniebienia twardego. Kluczowe było kontrolowanie wielkości ONF i minimalizowanie krwawienia, aby zapewnić sukces eksperymentu. Weryfikacja skuteczności modelu ONF została przeprowadzona w 7. dobie po operacji, obejmując zarówno ocenę anatomiczną, jak i funkcjonalną. Obecność przegrody nosowej w obrębie jamy ustnej oraz odpływ sterylnej wody z nozdrzy po wstrzyknięciu do jamy ustnej potwierdziły pomyślne ustalenie modelu ONF. Model wykazał praktyczną i udaną przetokę ustno-nosową, charakteryzującą się niską śmiertelnością, znacznymi zmianami masy ciała i minimalną zmiennością wielkości ONF. Przyszłe badania mogą rozważyć przyjęcie tej metodologii w celu wyjaśnienia mechanizmów gojenia się ran podniebienia i zbadania nowych metod leczenia przetok ustno-nosowych.

Wprowadzenie

Przetoka ustna (ONF), nieprawidłowy otwór między jamą ustną a nosową, klinicznie objawia się jako defekt w obszarze strukturalnym od wyrostka zębodołowego do języczka, który często występuje jako powikłanie po naprawie rozszczepu podniebienia1. Pacjenci z ONF doświadczają refluksu pokarmowego, zaburzeń artykulacji i upośledzenia funkcji gardła, co znacząco wpływa na jakość ich życia2,3,4. Częstość pooperacyjnych ONF waha się od 2,4% do 55% ze względu na takie czynniki, jak szerokość rozszczepu, typ Veau i metoda chirurgiczna5

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie procedury na zwierzętach w tym badaniu zostały sprawdzone i zatwierdzone przez Komitet Etyczny Zachodniochińskiej Szkoły Stomatologii, Uniwersytetu Syczuańskiego. Do niniejszego badania wykorzystano dorosłe myszy C57BL/6 (samice).

1. Przygotowanie chirurgiczne

  1. Zbierz niezbędne narzędzia chirurgiczne do zabiegu: kiełkownik, kauteryzację okulistyczną, nożyczki mikrochirurgiczne, pęsety mikrochirurgiczne, strzykawki i igły (26 g x 0,63 cala) (Rysunek 1A,B) (patrz tabela materiałów).
    UWAGA: Przed zabiegiem chirurgicznym należy autokla....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

W celu oceny wykonalności i stabilności tej metody eksperymentalnej, tę samą procedurę przeprowadzono na dziesięciu myszach, a następnie dokonano obserwacji dotyczących śmiertelności, zmian w wielkości rany, masy ciała oraz analizy histologicznej. Myszy uśmiercono w 7. dniu.

Procedura ta charakteryzowała się niskim wskaźnikiem śmiertelności. Kluczowymi instrumentami wykorzystanymi w tym eksperymencie były kauteryzator okulistyczny oraz germinator, przedstawione na Ryc. 1A<.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Naukowcy badali różne materiały, leki i nowatorskie techniki leczenia ONF 10,11,12,13,14,15,16,17. Wraz z postępem w procedurach chirurgicznych zmniejszyła się częstość występowania i nawroty ONF. Jednak ze względu na unikalną charakterystykę choroby, liczb.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez Program Badawczo-Rozwojowy, Zachodniochiński Szpital Stomatologii, Uniwersytet Sichuan (RD-02-202107), Program Wsparcia Nauki i Technologii Prowincji Sichuan (2022NSFSC0743) oraz grant Sichuan Postdoctoral Science Foundation (TB2022005) dla H. Huanga.

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
mikroskopiielektronowej kiełków 66118-20Sprzęt do ogrzewania i dezynfekcji
Rękawice lateksoweAllmedlub podobne
ŚwiatłaOlympusA1813
MeloxicamMedChemExpressHY-B0261zgniecione; 5 mg/kg
Narzędzia mikrochirurgiczne (nożyczki i pęseta)Jiangsu Tonghui Medical Devices Co.M-Y-0087Instrument chirurgiczny
Okulistyczne kauteryzacjeSuqian Wenchong Medical Equipment Co.1.00234E + 13Instrument chirurgiczny
Sterylna bawełna,Yancheng Begu Technology Co.lub podobne
Sterylna folia metalowaBiosharplub podobne
Sterylne arkusze3MXH003801129lub podobne
Serwety chirurgiczneYancheng Begu Technology Co.lub podobne
strzykawkiYancheng Begu Technology Co.S-015301lub podobny
TaśmaBkmamlablub podobne
urządzenie do utrzymywania temperaturyAparatura Harvarda LE-13-2104
Zoletil50Virbac80 mg/kg
Nauka o

Bibliografia

  1. Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679(2019).
  2. Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Uraz podniebienia twardegokauteryzacja okulistycznagojenie rany podniebieniauszkodzenie błony śluzowejmyszy C57BL/6analiza histologicznaodpowiedź zapalnatechnika chirurgiczna