$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury przeprowadzone na szczurach w tym badaniu były zgodne z Krajowym Standardem Opieki nad Zwierzętami Laboratoryjnymi i Wytycznymi Oceny Etyki (2018) oficjalnie przyjętymi przez Chińską Republikę Ludową oraz Przewodnikiem dla Opieki i Użytkowania Zwierząt Laboratoryjnych od National Academies Press15. Protokół ten składa się z trzech głównych kroków. Po pierwsze, kurtki dla szczurów są szyte i dopasowane w oparciu o indywidualne kształty ciała szczurów o różnej wadze. Następnie manipulacja akupunkturą jest przeprowadzana zgodnie ze standardowymi procedurami. Wreszcie, szczury są zawieszone w kurtkach, podczas gdy igły pozostają na miejscu, aby dostosować się do potrzeby jednoczesnych interwencji wśród szczurów w tej samej grupie.
1. Przygotowanie do nakłuwania
- Produkcja kurtki na szczura
- Zważ szczury i zmierz ich kształt ciała przed zrobieniem ich kurtek. Aby sprawdzić przydatność tego protokołu dla szczurów o różnej wadze, wybierz szczury o wadze 220 g, 300 g, 400 g i 520 g do niezależnych pomiarów ich wymiarów ciała, obejmujących pomiary od a do f, jak pokazano w Rysunek 2.
UWAGA: Korelacja między proporcjami ciała szczurów a odpowiadającymi im rozmiarami kurtek jest również przedstawiona w Rysunek 2. Istotne parametry długości ciała dla szczurów o różnej masie ciała są zapisane w tabeli 1.
- Wytnij prostokątny kawałek grubego, ciemnego materiału, aby zrobić kurtkę szczura. Użyj tkaniny o szerokości po rozłożeniu równej obwodowi mierzonemu wokół najgrubszej części brzucha szczura. Długość tkaniny jest równa odległości od czubka nosa szczura do podstawy jego ogona (patrz Rysunek 2).
- Złóż tkaninę na pół i odetnij lewy górny róg pod kątem około 45°-65°, aby utworzyć prawy trapez (patrz Rysunek 3A).
- Zszyj ciasno dwie strony po lewej stronie bawełnianą nicią. Zapoznaj się z Rysunek 1B i Rysunek 3B, aby uzyskać wskazówki.
- Wytnij dwa małe otwory, po jednym z każdej strony tkaniny, przez które przechodzą górne i dolne kończyny szczura (patrz Rysunek 3C). Odległość między dwiema górnymi kończynami określa odstępy między górnymi otworami kurtki szczura. Odległość między dwiema dolnymi kończynami określa odstępy między dolnymi otworami kurtki szczura.
- Użyj podłużnej odległości między pachą szczura a przednią częścią kości biodrowej, aby służyć jako odstęp między górnymi i dolnymi otworami kurtki dla szczurów. Użyj obwodu stawu barkowego, aby określić obwód górnego otworu w kurtce szczura. Użyj obwodu stawu biodrowego jako obwodu dolnego otworu w kurtce szczura.
- Obok każdego otworu zszyj długi pasek z tkaniny, który można skrzyżować i ciasno owinąć wokół ciała od otwierającego końca kurtki, aby przymocować szczura.
- Metoda noszenia kurtki szczura
- Załóż rękawiczki przed przystąpieniem do ubierania szczura w kurtkę. Zacznij od przytrzymania środkowej i tylnej części kurtki szczura jedną ręką na stole. Drugą ręką przytrzymaj ogon szczura z klatki do karmienia i delikatnie umieść go w kurtce.
- Gdy szczur porusza się do przodu, jego głowa dotrze do nakrycia głowy kurtki. W tym momencie obiema rękami ostrożnie wyciągnij lewą i prawą górną kończynę z otworów w kurtce.
- Weź linę do wiązania z otwieranego końca kurtki, skrzyżuj ją od lewej do prawej i owiń ją bezpiecznie wokół tułowia szczura. Zawiąż go mocno po przeciwnej stronie tułowia, aby zapewnić prawidłowe zamocowanie. Po unieruchomieniu kończyn górnych szczura powtórz tę samą procedurę, aby naprawić jego kończyny dolne.
- Podejmij środki ostrożności, aby uniknąć ugryzienia lub zadrapania pazurami szczura podczas wyciągania kończyn z otworów kurtki. Upewnij się, że napięcie liny jest odpowiednio wyregulowane, tj. nie za ciasne, aby spowodować miejscowe niedokrwienie kończyn i niedotlenienie u szczurów, i nie za luźne, umożliwiając szczurowi łatwą ucieczkę (patrz Wideo 1).
- Stojak mocujący i żelazne haki w kształcie litery S
- Stojak mocujący składa się z dwóch ciężkich żelaznych tac (24 cm długości, 12 cm szerokości i 2 cm wysokości) oraz żelaznej kolumny (60 cm długości), która jest mocno przyspawana do każdej tacy. Zamocuj solidny żelazny kij (145 cm długości) na tej samej wysokości na dwóch żelaznych kolumnach za pomocą konstrukcji połączenia śrubowego, którą można regulować i utrzymywać na stałej wysokości (patrz Rysunek 4A).
- Do połączenia szczura noszącego kurtkę z żelaznym kijem użyj haczyków w kształcie litery S (o średnicy 11 cm). Owiń jeden koniec haczyka wokół paska kurtki, podczas gdy drugi koniec jest zawieszony na żelaznym kiju. Użyj dwóch haczyków w kształcie litery S, aby przymocować szczura do kija. Proszę zapoznać się z Rysunek 1D i Rysunek 4B, aby zapoznać się z ogólną strukturą.

Rysunek 2: Odpowiedni diagram kształtu ciała szczura i dopasowanego rozmiaru kurtki szczura. Na schemacie parametr a reprezentuje odległość poprzeczną z tyłu stawu między kończynami górnymi a tułowiem szczura. Wartość ta jest wykorzystywana jako pomiar odstępu między otworami penetrującymi kończyny górne kurtki szczura. Podobnie parametr b reprezentuje poprzeczną odległość na grzbiecie, w której obustronne kończyny dolne szczura łączą się z tułowiem. Pomiar ten określa rozstaw otworów penetrujących kończyny dolne kurtki szczura. Parametr c oznacza obwód najgrubszej części brzucha szczura, który można wykorzystać jako pomiar szerokości tkaniny kurtki szczura. Parametr d reprezentuje odległość od pachy szczura do przedniej części jego kości biodrowej, określając odległość podłużną między górnymi i dolnymi otworami kurtki. Parametr e odpowiada odległości podłużnej od czubka nosa szczura do podstawy ogona, służąc jako pomiar długości tkaniny kurtki szczura. Parametr f oznacza obwód artykulacji łączącej kończynę górną z tułowiem szczura, służący jako obwód otworu, przez który przechodzą kończyny górne. Parametr g reprezentuje obwód stawu łączącego kończyny dolne z tułowiem szczura, określając obwód otworu, przez który przechodzą kończyny dolne. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
szt.
szt.
pkt.
szt.
pkt.
szt.
TGL
pkt.
| Masa ciała (g) | Parametry kształtu ciała (cm) |
| ZA | b | c | d | e | Z | g |
| 220 | 6,0 | 7,0 | 15,0 | 8,0 | 19,0 | 5.0 | 7,0 |
| 300 | 7,0 | 7,5 | 17,0 | Wersja 10.0 | 21,0 | 6,0 | 8,0 |
| 400 | 8,0 | 8,5 | 19,0 | Pytanie 11,5 | 23,0 | 6,5 | 9,0 |
| 520 | 8,0 | Wersja 10.0 | 20,0 | Rozdział 12,5 | 26,0 | 7,0 | Pytanie 9,5 |
Tabela 1. Wyniki pomiarów parametrów budowy ciała szczurów o różnej masie ciała.

Rysunek 3: Diagram przedstawiający wygląd fizyczny i użytkowanie kurtki szczura. (A) Widok z zewnątrz kurtki szczura. Kształt kurtki szczura przypomina trapez prostokątny, z oddzielnymi otworami po lewej i prawej stronie, przez które przechodzą górne i dolne kończyny szczura. (B) Rozłożony widok zewnętrzny kurtki szczura. Zapięcie nakrycia głowy tworzy półzamkniętą jamę, która służy jako kluczowy element zachęcający szczury do wejścia. (C) Widok z boku na szczura ubranego w kurtkę. Gdy kończyny szczura przejdą przez otwory w ubraniu, paski krzyżują się na brzusznej powierzchni tułowia i bezpiecznie zapinają z tyłu z odpowiednim napięciem. Gwarantuje to, że szczur jest stosunkowo unieruchomiony. (D) Widok z brzucha szczura ubranego w kurtkę szczura. Brzuszna powierzchnia kurtki odsłania skórę brzucha szczura, umożliwiając wygodny dostęp do akupunktury w punktach brzusznych. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Wideo 1: Zakładanie kurtki szczura. Ten film pokazuje typowy proces ubierania szczura w kurtkę. Kliknij tutaj, aby pobrać ten film.

Rysunek 4: Diagram przedstawiający wygląd fizyczny i zastosowanie podwyższonego stojaka mocującego. (A) Podwyższony stojak mocujący. Regał ten składa się głównie z dwóch pionowych żelaznych kolumn (o długości 60 cm) przyspawanych do każdej tacy, wraz z długim poziomym żelaznym drążkiem (o długości 145 cm) umieszczonym równolegle do ziemi. służą do mocowania ramienia poziomego na tej samej wysokości co kolumny pionowe. (B) Zawieszenie szczura na stojaku mocującym. Szczury noszące kurtki dla szczurów są bezpiecznie przymocowane do stojaka mocującego za pomocą dwóch haczyków w kształcie litery S na szczura. (C) Jednoczesne leczenie elektroakupunkturą u wielu szczurów. Aby zapobiec potencjalnym zakłóceniom wynikającym z ruchu ogona, konieczne było zachowanie odpowiednich odstępów między szczurami, odpowiadających długości ogona szczura. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
2. Zabieg elektroakupunktury
- Rutynowe przygotowanie
- Umieść stojak mocujący na poziomym blacie lub ziemi.
- Przed zabiegiem igłowania usuń sierść wokół punktów akupunkturowych za pomocą golarki elektrycznej, aby zapewnić całkowite odsłonięcie. Gdy punkt akupunkturowy do nakłucia znajduje się na brzuchu szczura, takiego jak Guanyuan (CV4, około 25 mm poniżej pępka), odpowiednio skróć szerokość ubrania dla szczurów, aby odsłonić punkty akupunkturowe brzucha.
- Zlokalizuj punkt akupunkturowy w szczelinie na linii środkowej brzucha, która nie jest zakryta kurtką szczura (patrz Rysunek 3D), a następnie wstrzyknij igłę.
- Gdy punkty akupunkturowe, które mają zostać nakłute, znajdują się na głowie szczura, takie jak Baihui (GV20, znajduje się w środku kości ciemieniowej), wykonaj małe nacięcie w odpowiednim miejscu na głowie, aby całkowicie odsłonić skórę wokół GV20 (patrz Rysunek 1C).
- Podczas akupunktury akupunkturowej na kończynach szczurów, takich jak Neiguan (PC6, po wewnętrznej stronie kończyny przedniej, między szwami promieniowymi i łokciowymi w odległości około 3 mm od stawu nadgarstkowego) w kończynie górnej lub Zusanli (ST36, po tylno-bocznej stronie stawu kolanowego, około 2 mm poniżej głowy kości strzałkowej) w kończynie dolnej, Ze względu na oczywistą ekspozycję punktów akupunkturowych, jedną ręką należy pomóc w unieruchomieniu kończyny, podczas gdy druga może bezpośrednio wykonać operację akupunktury.
- Gdy punkt akupunkturowy znajduje się na grzbiecie lub talii szczura, takiego jak Shenshu (BL23, poniżej 2. kręgów lędźwiowych, 6 mm od linii środkowej grzbietu), wytnij otwór o szerokości około 2 cm w środku kurtki szczura, aby w pełni odsłonić skórę odpowiedniego miejsca (patrz Rysunek 1C).
- Ubierz szczura w kurtkę. Po zdezynfekowaniu miejscowej skóry punktów akupunkturowych wacikami nasączonymi alkoholem należy przystąpić do zabiegu akupunktury.
- Technika igłowania: Dokładnie zlokalizuj punkt akupunkturowy. Włóż sterylną jednorazową igłę do akupunktury (0,16 mm x 7 mm) do akupunktury szczura na odpowiedniej głębokości.
- Operacja elektroakupunktury
- Owiń drut elektrody wokół poziomego pręta żelaznego. Ten krok zmniejsza ryzyko wypadnięcia igły z powodu siły grawitacji działającej na klips do elektroakupunktury. Następnie przymocuj koniec drutu elektrody do uchwytu igły.
- Włącz zasilanie i wybierz odpowiednie parametry częstotliwości, prądu i czasu. W tym eksperymencie parametry ustawiono na 2 Hz, 1 mA i 15 min. Po dostosowaniu parametrów rozpocznij proces leczenia elektroakupunkturą (patrz Wideo 2 i Wideo 3).
- Jednoczesna elektroakupunktura u szczurów: Podczas leczenia zawieś szczury w tej samej grupie razem na żelaznym patyku za pomocą haczyków w kształcie litery S i pozwól im jednocześnie przejść interwencję w zakresie elektroakupunktury.
- UWAGA: Żelazny kij powinien być nie tylko wytrzymały, ale także wystarczająco długi, aby jednocześnie leczyć grupę szczurów. W tym eksperymencie, przy zapewnieniu odpowiednich odstępów i braku zakłóceń między szczurami, 3-4 szczury mogą być leczone jednocześnie (patrz Rysunek 4C).
- Obserwacja reakcji szczurów podczas leczenia elektroakupunkturą: Ocenić przydatność tej metody utrwalania do elektroakupunktury u szczurów w oparciu o następujące czynniki, takie jak liczba personelu wymaganego do wykonania operacji, czas potrzebny do unieruchomienia szczura, reakcja szczurów podczas leczenia elektroakupunkturą, liczba igieł upuszczonych podczas zabiegu, oraz wszelkie przypadkowe zgony, które mogą wystąpić podczas operacji.
- Usuwanie igieł
- Po upływie ustawionego czasu aparat do elektroakupunktury wyłączy się automatycznie. Usuń mały klips, który jest podłączony do uchwytu igły i ostrożnie wyjmij igłę do akupunktury spod skóry szczura, kończąc w ten sposób proces leczenia elektroakupunkturą.
- Poluzuj paski, podnieś osłonę głowy kurtki szczura i umieść szczura nad klatką. Szczur będzie wtedy mógł swobodnie uwolnić się z kurtki i samodzielnie wejść do klatki (patrz wideo 4).
Wideo 2. Igłowanie punktów akupunkturowych w odcinku lędźwiowym. Ten film pokazuje kompleksową i spójną procedurę obejmującą ubieranie szczura w kurtkę, wprowadzanie igieł do akupunktury w punktach akupunkturowych w talii, a następnie podłączenie aparatu do elektroakupunktury. Kliknij tutaj, aby pobrać ten film.
Wideo 3. Igłowanie akupunktów w jamie brzusznej i kończynie dolnej. Ten film pokazuje kompleksową i spójną procedurę obejmującą ubieranie szczura w kurtkę, wprowadzanie igieł do akupunktury w punkty akupunkturowe znajdujące się w jamie brzusznej i kończynie dolnej, a następnie podłączenie aparatu do elektroakupunktury. Kliknij tutaj, aby pobrać ten film.
Wideo 4. Zdejmowanie kurtki szczura. Ten film pokazuje zwyczajową praktykę zdejmowania kurtki ze szczura. Kliknij tutaj, aby pobrać ten film.