Protokół opisuje metodę interwencji Tuina w króliczym modelu choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
* These authors contributed equally
Protokół opisuje metodę interwencji Tuina w króliczym modelu choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego.
Choroba zwyrodnieniowa stawu kolanowego (KOA) charakteryzuje się głównie zmianami zwyrodnieniowymi w chrząstce stawu kolanowego i otaczających tkankach miękkich. Skuteczność leku Tuina w leczeniu KOA została potwierdzona, ale należy zbadać mechanizm leżący u jego podstaw. Badanie to ma na celu ustanowienie naukowo wykonalnego modelu królika KOA leczonego Tuiną, aby ujawnić mechanizmy leżące u podstaw tego zjawiska. W tym celu 18, 6-miesięcznych samców królików nowozelandzkich normalnej klasy zostało losowo podzielonych na grupy pozorowane, modelowe i Tuina, po 6 królików w każdej grupie. Model KOA powstał poprzez wstrzyknięcie 4% roztworu papainy do jamy stawu kolanowego. Grupie Tuina podawano lek Tuina w połączeniu z metodą korekcji rotacji stawu kolanowego przez 4 tygodnie. Tylko standardowe chwytanie i fiksacja były wykonywane w grupach pozorowanych i modelowych. Pod koniec 1-tygodniowej interwencji zaobserwowano zakres ruchomości stawu kolanowego (ROM) i wykonano barwienie chrząstki hematoksyliną-eozyną (HE). Badanie pokazuje, że Tuina może hamować apoptozę chondrocytów, naprawiać tkankę chrzęstną i przywracać ROM stawu kolanowego. Podsumowując, badanie to pokazuje naukową wykonalność leczenia Tuina u królików modelowych KOA, podkreślając jego potencjalne zastosowanie w badaniach nad KOA i podobnymi schorzeniami związanymi ze stawem kolanowym.
Choroba zwyrodnieniowa stawu kolanowego (KOA) jest chorobą zwyrodnieniową stawu kolanowego, objawiającą się głównie bólem kolana, obrzękiem, deformacją i ograniczonym ruchem, z wysokim wskaźnikiem niepełnosprawności i częstszym występowaniem u kobiet, z 527,81 milionami pacjentów z chorobą zwyrodnieniową stawów na całym świecie w 2019 roku, a jej globalne rozpowszechnienie stanowi 60,6% całkowitego globalnego rozpowszechnienia OA1. Klinicznie leczenie KOA jest zwykle podzielone na terapie niechirurgiczne i chirurgiczne. Terapie niechirurgiczne obejmują fizjoterapię, farmakoterapię i terapię iniekcjami osocza bogatopłytkowego2,3. Tuina jest powszechną, bezpieczną, niezawodną i skuteczną metodą leczenia w medycynie chińskiej. W tym badaniu wykorzystano Tuina w połączeniu z metodą korekcji rotacji stawu kolanowego w leczeniu KOA. Techniki Tuina, takie jak metoda rotacyjnego ugniatania i prasowania, mogą zrównoważyć tkankę mięśniową, zmniejszyć ból, dostosować poziom czynników zapalnych, poprawić metabolizm tkanek i zahamować zwyrodnienie chrząstki stawowej4,5. Metoda korekcji obrotowej stawu kolanowego może dostosować wyrównanie kości i stawów kończyn dolnych, poprawić odstęp między stawami kolanowymi, przywrócić normalną linię siły i zrównoważyć biomechanikę kończyny dolnej6,7,8,9. Ćwiczenia oporowe mogą zwiększyć masę mięśniową i siłę oraz wspomagać odnowę tkanki chrzęstnej10,11. Wstępne badanie wykazało, że ten protokół Tuina jest znacznie bardziej skuteczny niż doustne kapsułki siarczanu glukozaminy w leczeniu KOA, z szybszym początkiem działania i znacznym zahamowaniem degeneracji chondrocytów i naprawy uszkodzonej tkanki chrzęstnej12. W leczeniu KOA, w porównaniu z terapią Tuina, niesteroidowe leki przeciwzapalne mają działania niepożądane i niezadowalającą długoterminową skuteczność, stosunkowo wysokie ryzyko i koszty chirurgiczne oraz wymagają pewnych wskazań do leczenia chirurgicznego, z problemami pooperacyjnymi i powikłaniami okołoprotetycznymi13,14,15. W porównaniu z terapią lekową i chirurgią, leczenie KOA metodą Tuina oferuje kilka zalet, w tym zmniejszenie skutków ubocznych, mniejsze ryzyko, zwiększone bezpieczeństwo, opłacalność i długotrwałą skuteczność. Dodatkowo może skutecznie łagodzić bóle stawów kolanowych, obrzęki, trzaski i ograniczenia ruchów6,13,16,17.
Jednakże, mechanizm leczenia KOA przez Tuinę wymaga wyjaśnienia, co ogranicza poprawę i doskonałość protokołu leczenia KOA. Dlatego badanie mechanizmu interwencji Tuina w KOA poprzez eksperymenty na zwierzętach jest skuteczną metodą. Króliki, w porównaniu ze szczurami, mają łagodny temperament i większe stawy kolanowe. Struktura anatomiczna i indeksy biochemiczne chrząstki są podobne do ludzkich, więc jest to odpowiedni temat do badania mechanizmu choroby stawu kolanowego przez Tuina18. Model KOA stworzony przez wstrzyknięcie papainy do jamy stawu kolanowego królików ma zalety krótkiego czasu modelowania, zmniejszonego urazu, wysokiego wskaźnika sukcesu, wysokiego wskaźnika przeżycia i podobnego patologicznego mechanizmu do KOA19. Badanie to ma na celu ustanowienie naukowo wykonalnego protokołu eksperymentalnego na zwierzętach dla interwencji Tuina w KOA i zbadanie mechanizmu Tuina.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Badanie zostało zatwierdzone przez komisję etyczną Szpitala Stowarzyszonego Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Shandong (numer zatwierdzenia: 2020-29).
1. Zwierzęta doświadczalne
2. Metoda grupowania
3. Ustanowienie modelu KOA
4. Manipulacja Tuina
5. Pomiar ROM stawu kolanowego
UWAGA: Przed pomiarem uspokój królika. Statystyk pomiarowy i operator różnią się od siebie.
6. Barwienie hematoksyliną-eozyną (HE)
7. Analiza danych
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Stopień ograniczenia ruchomości kolana oraz uszkodzenia tkanki chrzęstnej odzwierciedlają stopień zaawansowania KOA. Zakres ruchu (ROM) stawu kolanowego obrazuje stopień ograniczenia jego ruchomości. Im mniejszy ROM stawu kolanowego, tym poważniejsze jest ograniczenie ruchu w stawie. I odwrotnie, im większy ROM stawu kolanowego, tym bardziej prawidłowy jest zakres ruchu w kolanie. Barwienie HE w celu obserwacji morfologii i struktury tkanki chrzęstnej odzwierciedla stopień uszkodzenia tej tkanki. Im bardziej nieregularna...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Projekt protokołu eksperymentalnego jest szczególnie ważny dla zbadania mechanizmu działania leku Tuina w leczeniu KOA. Modelowanie KOA przeprowadzono na królikach poprzez wstrzyknięcie papainy w Waixiyan. Waixiyan znajduje się w bocznej krypcie więzadła rzepki, które jest łatwe do zlokalizowania, a przestrzeń stawowa między kością udową a piszczelową jest tutaj duża podczas zgięcia kolana, co ułatwia wstrzyknięcie do jamy stawu kolanowego i zapobiega uszkodzeniom otaczających tkanek, dzięki czemu łatwo jest ustalić mode...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy deklarują brak potencjalnych konfliktów interesów.
Ta praca była wspierana przez Projekt Nauki i Technologii Tradycyjnej Medycyny Chińskiej Prowincji Shandong (2021Q080) oraz Projekt Dziedziczenia Akademickiej Szkoły Tradycyjnej Medycyny Chińskiej Qilu [Lu-Wei-Letter (2022) 93].
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 0,9 % chlorek sodu do wstrzykiwań | Sichuan Keren Pharmaceutical Co. | Z22121903-20 | |
| ° C lodówka | Haier | BD-328WL | |
| 4 % roztwór utrwalający | Solarbio | P1110 | |
| 4° C lodówka | Haier | SC-315DS | |
| Bezwodny etanol | Sinopharm | ||
| Automatyczna maszyna do odwadniania tkanek | Dakowei (Shenzhen) Medical Equipment Co. | HP30 | |
| Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co. | DHG-9070A Szkiełko | ||
| nakrywkowe | Biyuntian | FCGF50 | |
| Termostat elektryczny łaźnia wodna | Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co. | HWS-26 | |
| Stół do zamrażania | Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. | BM450 | |
| Maszyna do zatapiania | Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. | BM450A | |
| Roztwór odwapniający kwas etylenodiaminotetraoctowy | Servicebio | G1105-500ML | |
| Fluorescencyjny mikroskop odwrócony | Leica | Leica DM IL LED | |
| Zestaw do barwienia hematoksyliny-eozyny | Cisco Jet | EE0012 | |
| Kwas solny | Laiyang Strefa Rozwoju Gospodarczego i Technologicznego Zakład | ||
| Goniometr medyczny | stawów KOSLO | ||
| Neutralna guma | Cisco Jet | EE0013 | |
| Normalnej jakości samiec królika nowozelandzkiego | Jinan Xilingjiao Centrum Hodowli i Hodowli | SCXK (Lu) 2020 0004 | |
| Papaina (3000 U / mg) | Bioss | D10366 | |
| Patologiczny instrument do wybielania i suszenia tkanek | Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. | PH60 | |
| Elektryczne maszynki do strzyżenia zwierząt | Codos | CP-3180 | |
| Skrzynka mocująca królika | dowolnej marki | ||
| Krajalnica obrotowa | Leica | 531CM-Y43 | |
| Przyrząd do określania parametrów techniki Tuina | Shanghai DuKang Instrument Equipment Co., Ltd. | ZTC-![]() | |
| Wentylator | TALY ELECTRIC | C32 | |
| Ksylen | Fuyu Odczynnik |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.