Wykrywanie w czasie rzeczywistym dynamicznego powinowactwa między biomolekułami przy użyciu technologii powierzchniowego rezonansu plazmonowego (SPR)

Wenqiao An; Zhihao Sun; Pengmei Guo; Xiaobo Wang; Sanyin Zhang

doi:10.3791/65946

Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Wykrywanie w czasie rzeczywistym dynamicznego powinowactwa między biomolekułami przy użyciu technologii powierzchniowego rezonansu plazmonowego (SPR)

1.5K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/65946

⸱

29 września 2023

Wenqiao An^*¹ , Zhihao Sun^*¹ , Pengmei Guo² , Xiaobo Wang²^,³ , Sanyin Zhang²^,³

¹School of Basic Medical Sciences, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ²Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ³Research Institute of Integrated Traditional Chinese Medicine and Western Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

^* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Niniejsze badanie ma na celu wyjaśnienie zasady i metodologii technologii powierzchniowego rezonansu plazmonowego (SPR), która znajduje wszechstronne zastosowanie w wielu dziedzinach. Niniejszy artykuł opisuje technologię SPR, jej prostotę obsługi i niezwykłą skuteczność, mając na celu promowanie szerszej świadomości i przyjęcia tej technologii wśród czytelników.

Streszczenie

Technologia powierzchniowego rezonansu plazmonowego (SPR) to czuła, precyzyjna metoda wykrywania wirusów, patogennych białek molekularnych i receptorów, określania grup krwi i wykrywania zafałszowań żywności, wśród innych detekcji biomolekularnych. Technologia ta pozwala na szybką identyfikację potencjalnych wiązań między biomolekułami, ułatwiając szybkie i przyjazne dla użytkownika, nieinwazyjne badania przesiewowe różnych wskaźników bez konieczności znakowania. Ponadto technologia SPR ułatwia wykrywanie w czasie rzeczywistym w celu przeprowadzenia wysokoprzepustowych badań przesiewowych leków. W tym programie pokrótce przedstawiono obszar zastosowań i podstawowe zasady technologii SPR. Proces operacyjny jest szczegółowo opisany, począwszy od kalibracji przyrządu i podstawowej obsługi systemu, a następnie wychwytywania ligandów i wielocyklowej analizy analitu. Opracowano krzywą w czasie rzeczywistym i eksperymentalne wyniki wiązania kwercetyny i kalikozyny z białkiem KCNJ2. Ogólnie rzecz biorąc, technologia SPR zapewnia wysoce specyficzną, prostą, czułą i szybką metodę badań przesiewowych leków, wykrywania w czasie rzeczywistym powiązanej farmakokinetyki, wykrywania wirusów oraz identyfikacji środowiska i bezpieczeństwa żywności.

Wprowadzenie

Technologia powierzchniowego rezonansu plazmonowego (SPR) to technika optycznego wykrywania, która eliminuje potrzebę znakowania analitu. Umożliwia dynamiczne monitorowanie w czasie rzeczywistym ilościowego powinowactwa wiązań, kinetyki i termodynamiki. Ta wysoka przepustowość jest bardzo czuła i powtarzalna, co pozwala na pomiar różnych współczynników otwarć, współczynników wyłączenia i powinowactwa. Dodatkowo, wymagana niewielka ilość próbki dodatkowo zwiększa użyteczność tej metody¹^,². Metoda wykrywania biomolekularnego o szybkiej reakcji³, która monitoruje powi....