Ciągłe wprowadzanie kwasu oleinowego do tętnicy płucnej znieczulonej dorosłej świni wywołuje ostrą niewydolność oddechową, umożliwiając kontrolowane eksperymenty podczas ostrej dekompensacji oddechowej.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Ciągłe wprowadzanie kwasu oleinowego do tętnicy płucnej znieczulonej dorosłej świni wywołuje ostrą niewydolność oddechową, umożliwiając kontrolowane eksperymenty podczas ostrej dekompensacji oddechowej.
Ten protokół przedstawia model ostrej niewydolności oddechowej wykorzystujący centralnie podawany napar kwasu oleinowego u świń rasy Yorkshire. Przed eksperymentami każda świnia została poddana znieczuleniu ogólnemu, intubacji dotchawiczej i wentylacji mechanicznej oraz została wyposażona w obustronne cewniki dostępu do żyły szyjnej w centralnym dostępie naczyniowym. Kwas oleinowy podawano przez dedykowany cewnik do tętnicy płucnej w ilości 0,2 ml/kg/h. Napar trwał 60-120 minut, wywołując niewydolność oddechową. W trakcie eksperymentu monitorowano różne parametry, w tym częstość akcji serca, częstość oddechów, ciśnienie tętnicze krwi, ciśnienie w żyłach centralnych, ciśnienie w tętnicy płucnej, ciśnienie klina w kapilarnach płucnych, dwutlenek węgla w końcówce pływowej, szczytowe ciśnienie w drogach oddechowych i ciśnienie plateau. Około 60 minut zaobserwowano spadek częściowego ciśnienia tętniczego tlenu (PaO2) i frakcji hemoglobiny nasyconej tlenem (SpO2). Podczas infuzji występowała okresowa niestabilność hemodynamiczna, której towarzyszył ostry wzrost ciśnienia w tętnicy płucnej. Poinfuzyjna analiza histologiczna miąższu płuc ujawniła zmiany wskazujące na uszkodzenie miąższu i ostre procesy chorobowe, potwierdzając skuteczność modelu w symulacji ostrej dekompensacji oddechowej.
Wykorzystanie modeli świńskich w badaniach translacyjnych ma ogromne znaczenie dla naszego zrozumienia medycyny ludzkiej1. Modele świń, ze względu na ich fizjologiczne i anatomiczne podobieństwa do ludzi, stanowią cenną platformę do badania złożonych chorób i interwencji terapeutycznych1. W kontekście ostrej niewydolności oddechowej modele świń oferują wyjątkową okazję do zbadania mechanizmów patofizjologicznych, oceny strategii leczenia i oceny potencjalnych interwencji1,2,3. Zdolność do odtworzenia kluczowych aspektów fizjologii układu oddechowego człowieka i reakcji na różne bodźce w modelach świńskich pozwala na kompleksową ocenę modalności terapeutycznych przed przejściem do badań klinicznych na ludziach1,2,3. Ten paradygmat badawczy umożliwia naukowcom wypełnienie luki między badaniami przedklinicznymi a zastosowaniem klinicznym, ułatwiając opracowywanie nowatorskich terapii i poprawiając wyniki leczenia pacjentów1. W związku z tym ustanowienie wydajnego, skutecznego i powtarzalnego modelu ostrej niewydolności oddechowej świń służy jako kluczowe narzędzie w pogłębianiu wiedzy na temat chorób układu oddechowego i kierowaniu rozwojem skutecznych interwencji w medycynie ludzkiej1.
Niewydolność oddechowa, stan krytyczny, doświadczyła ograniczonego postępu w diagnozowaniu i leczeniu w ciągu ostatnich trzech dekad4. Obecnie stosowane wskaźniki oceny i klasyfikacji, które obejmują objawy subiektywne, wyniki badania fizykalnego, SpO2 i częstość oddechów, często wykazują ograniczenia w wykrywaniu ostrych chorób płuc na wczesnym etapie5,6,7. Ta nieadekwatność nie tylko utrudnia efektywną selekcję i alokację zasobów, ale także nie zapewnia skutecznego, ilościowego monitorowania postępu choroby i odpowiedzi na leczenie u pacjentów z przewlekłymi chorobami płuc. Pojawiający się krajobraz przewlekłych chorób układu oddechowego, takich jak długi COVID, wraz z obciążeniem zasobów szpitalnych ostrymi niewydolnościami oddechowymi podkreśla pilną potrzebę rozszerzenia badań translacyjnych i wspierania innowacji w leczeniu chorób układu oddechowego.
Bezpośredni wlew kwasu oleinowego do krwiobiegu świni został uznany za skuteczną metodę wywoływania ostrej niewydolności oddechowej8. Kwas oleinowy, jednonienasycony kwas tłuszczowy, wykazał zdolność do wywoływania znacznego uszkodzenia płuc i upośledzenia funkcji oddechowych po wprowadzeniu do krążenia płucnego8. Po infuzji kwas oleinowy wywołuje zwężenie naczyń krwionośnych, co skutkuje zwiększonym ciśnieniem i oporem tętnic płucnych, co prowadzi do upośledzenia wymiany gazowej i natlenienia9. Ponadto kwas oleinowy wspomaga aktywację szlaków zapalnych, w tym uwalnianie mediatorów prozapalnych i rekrutację komórek odpornościowych, które przyczyniają się do rozwoju uszkodzenia płuc i niewydolności oddechowej10. Wszystko to powoduje ciężką hipoksemię, wzrost ciśnienia w tętnicach płucnych i gromadzenie się pozanaczyniowej wody w płucach11. Ocena histologiczna miąższu płuc wykazała uszkodzenie, które jest nie do odróżnienia od ostrej niewydolności oddechowej u ludzi9.
Ten artykuł opisuje metodę polegającą na bezpośrednim podawaniu kwasu oleinowego do tętnicy płucnej w celu wywołania ostrej niewydolności oddechowej, unikając nieuleczalnych, poważnych zaburzeń hemodynamicznych. Oczekuje się, że opisana metoda będzie cennym narzędziem dla przyszłych badaczy badających mechanizmy patofizjologiczne leżące u podstaw ostrej niewydolności oddechowej oraz oceniających potencjalne interwencje terapeutyczne i innowacje.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół został zatwierdzony przez Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt Uniwersytetu Vanderbilt (protokół M1800176-00) i ściśle przestrzegał wytycznych Narodowego Instytutu Zdrowia dotyczących opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych. W tym eksperymencie wykorzystano samce i samice świń Yorkshire o wadze około 40-45 kg. Zwierzęta zostały pozyskane ze źródła komercyjnego (patrz tabela materiałów). Obecna praktyka nie obejmuje badań przesiewowych pod kątem jakichkolwiek wcześniej istniejących schorzeń u nabytych świń. Chociaż uznaje się, że praktyka ta może potencjalnie zakłócać lub maskować zamierzone wyniki, jest uważana za mało prawdopodobną według sprzedawcy i to ograniczenie jest akceptowane.
1. Przygotowanie zwierząt
2. Napar kwasu oleinowego
3. Analiza przebiegu żylnego i procedura zarządzania respiratorem
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wstępne dane pilotażowe uzyskane z pojedynczej świni wykazują wzrost RIVA-RI przed wystąpieniem zmian w innych parametrach monitorowania oddechowego (RR i SpO2), co jest zgodne ze zmianami PaO2 (Rysunek 3). Spadek PaO2 jest „pozytywnym” wynikiem, który ma zostać osiągnięty w tym modelu. Wstępne dane pokazują również, że wraz z progresją choroby, rozpoczynającą się w 30. minucie, następuje wzrost RIVA-RI oraz spadek PaO2 (Rysune...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Kluczowym elementem tego protokołu jest ścisłe monitorowanie stanu hemodynamicznego świni podczas podawania kwasu oleinowego w celu wywołania niewydolności oddechowej15. Niezwykle ważne jest, aby naukowcy poświęcili niezbędny czas na odpowiednie ustawienie urządzeń do monitorowania hemodynamicznego. Specyficzną wadą tego modelu jest potencjalna niestabilność hemodynamiczna, która może powstać w wyniku zapalenia i uszkodzenia układu oddechowego 8...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Tymczasowy patent na własność intelektualną związaną z nieinwazyjną analizą przebiegów żylnych układu oddechowego został złożony przez autorów (BA, CB i KH).
Autorzy chcieliby podziękować Dr. José A. Diazowi, Jamiemu Adcockowi, Mary Susan Fultz i S.R. Light Laboratory w Vanderbilt University Medical Center za ich pomoc i wsparcie. Prace te zostały wsparte grantem z Narodowego Instytutu Serca, Płuc i Krwi Narodowych Instytutów Zdrowia (BA; R01HL148244). Wyłączną odpowiedzialność za treść ponoszą autorzy i niekoniecznie reprezentują one oficjalne poglądy National Institutes of Health.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 1% Isofluran | Primal, Boston, MA, USA | 26675-46-7 | https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/792632?gclid=Cj0KCQjw9fqnBhDSARIsAHl cQYS_W-q6tS2s6LQw2Qn7Roa3T GIpTLPf52351vrhgp44foEcRozPqt YaAtvfEALw_wcB |
| Cewnik tętniczy | Merit Medical, Jordania Południowa, UT, USA | MAK401 | MAK Mini Access Kit 4F |
| Wzmacniacz ciśnienia krwi | AD Instrumenty, Colorado Springs, CO, USA | FE117 | https://www.adinstruments.com/products/bp-blood-pressure-amp |
| Centralny cewnik żylny | Arrow International, Cleveland, OH, USA | AK-09800 | 8,5 Fr. x 4" (10 cm) |
| Jednorazowe przetworniki ciśnienia | Arrow-Flex AD Instruments, Colorado Springs, CO, USA | MLT0670 | https://www.adinstruments.com/products/disposable-bp-transducers |
| Trzystopniowe kaniule żylne Edwards Lifesciences | , Irvine, CA | TF293702 | https://www.graylinemedical.com/products/edwards-lifesciences-triple-stage-venous-cannulas-venous-dual-stage-cannula-tf293702?variant=31851942576185&=1& gclid=Cj0KCQiAr8eqBhD3ARIsAIe -buNdmkzavUBaIx-1be7boWn2kW hbUR6QCjaobB08uuK9qJW66JvY TM4aAufGEALw_wcB |
| Kelly Scissors | MPM Medical Supply, Freehold, NJ 07728 | 104-5516 | https://www.mpmmedicalsupply.com/products/kelly-scissors |
| Kendall 930 FoamElectrodes | Covidien, Mansfield, MA, USA | 22935 | https://www.cardinalhealth.com/en/product-solutions/medical/patient-monitoring/electrocardiography/monitoring-ecg-electrodes/radiolucent-electrodes/kendall-930-series-radiolucent-foam-electrodes.html |
| Chlorowodorek ketaminy 100 mg / ml, roztwór do wstrzykiwań, 10 ml | Patterson Veterinary, Loveland, CO 80538 | 07-894-8462 | https://www.pattersonvet.com/ProductItem/078948462?omni=ketamine |
| LabChart 8 oprogramowanie | AD Instruments, Colorado Springs, CO, USA | Nie dotyczy | |
| Zwijacz Lahey | BOSS Instruments LTD, Gordonsville, VA 22942 | 18-1210 | https://bossinstruments.com/product/7-3-4-lahey-thyroid-retractor-6mmx28mm/ |
| Kwas oleinowy | Sigma-Aldrich, Merck, Darmstadt, Niemcy | O1008 | https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/sial/o1008?gclid=CjwKCAjwzJmlBhBBEiwAEJy Lu2047wRpXqF_Z2BegUyhgZJ _WygsWfErhgrGCIyMp8PxwNH sTZ8qARoCl1QQAvD_BwE& gcl src=aw.ds |
| Obwodowy cewnik dożylny Angiocath 18-24 G 1,16 cala | McKesson, Irving, TX, USA | 329830 | https://mms.mckesson.com/product/329830/Becton-Dickinson-381144 |
| Piezoelektroda | MuRata Manuractoring Co, Ltd., Nagaokakyo, Kioto, Japonia | 7BB-12-9 | https://www.murata.com/en-us/products/productdetail?partno=7BB-12-9 |
| PlasmaLyte | Baxter International, Deerfield, IL, USA | 2B2544X | https://www.ciamedical.com/baxter-2b2544x-each-solution-plasma-lyte-a-inj-ph-7-4-1000ml |
| Cewnik do tętnic płucnych | Edwards Life Sciences, Irvine, CA | 131F7 | Swan Ganz 7F x 110cm |
| Standardowe rurki dotchawicze | Teleflex, Morrisville, NC 27560 | 5-10313 | https://www.teleflex.com/usa/en/product-areas/anesthesia/airway-management/endotracheal-tubes/standard-tubes/index.html |
| Cewnik Foleya SurgiVet Clearview, 8 Fr, 55 cm Silikon | Penn Veterinary Supply, Inc, West Rendering, PN 13971 | SVCFC1030 | https://www.pennvet.com/customer/portal/catalog/home?urile=wcm:path%3APennVet+Catalog/Super+Sku+Catalog/SS0672/Surgivet+Clearview+Silicone+Foley+Catheters |
| Telazol (chlorowodorek tyletaminy i chlorowodorek zolazepamu), roztwór do wstrzykiwań, 5 ml | Patterson Veterinary, Loveland, CO 80538 | 07-801-4969 | https://www.pattersonvet.com/ProductItem/078014969?omni=telazol |
| Standardowe ostrze laryngoskopowe Welch Allyn E-MacIntosh | MFIMedical, San Diego, CA 92131 | WLA-69242 | https://mfimedical.com/products/welch-allyn-e-macintosh-standard-laryngoscope-blade?variant=12965771870285¤cy =USD& utm_medium=product_sync & utm_source=Google& utm_content =sag_organic& utm_campaign=sag _organic& gclid=Cj0KCQiAr8eqBhD 3ARIsAIe-buMhpgM96qRXkCUKA 6Mhmdat0p93JbecCGTaLStexhV pkUVa9VkWUzgaAr-iEALw_wcB |
| Ksylazyna HCl 100 mg/ml, roztwór do wstrzykiwań, 50 ml | Patterson Veterinary, Loveland, CO 80538 | 07-894-5244 | https://www.pattersonvet.com/ProductItem/078945244 |
| Yorkshire Pigs | Oak Hill Genetics, Ewing, IL, USA | 138274 | Samica/samiec świni - Yorkshire/Landrace 81-100 funtów |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.