Artykuł metodologiczny

Procedura operacyjna i środki ostrożności związane z terapią ognistą Lingnan u szczurów modelowych z osteoporozą

DOI:

10.3791/65970

⸱

26 kwietnia 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1College of Acupuncture and Orthopedics, Hubei University of Chinese Medicine, 2Department of Rehabilitation Medicine, General Hospital of Central Theater Command, 3Hubei Shizhen Laboratory, 4Hubei International Science and Technology Cooperation Base of Preventive Treatment by Acupuncture and Moxibustion

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tutaj prezentujemy protokół zastosowania terapii ognistą igłą Lingnan w interwencji szczurów modelowych z osteoporozą.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W porównaniu do terapii igłami nitkowymi, terapia ognistą ma zarówno stymulację igieł, jak i rozgrzewający wpływ ciepła, co sprawia, że ma nieoczekiwany wpływ na niektóre choroby przewlekłe i nieuleczalne. Osteoporoza (OP) występuje często u kobiet po menopauzie oraz mężczyzn w średnim i starszym wieku, a cykl leczenia jest długi. Według Tradycyjnej Medycyny Chińskiej (TCM), terapia ognistą Lingnan wykazała potencjał w leczeniu osteoporozy. Jednak przed nami jeszcze długa droga, zanim będzie można go powszechnie stosować. Niniejszy artykuł koncentruje się na zastosowaniu terapii ognistej Lingnan w interwencji OP u szczurów. Obejmuje dobór narzędzi igłowych, wybór punktu akupunkturowego, ułożenie ciał szczurów i metody fiksacji. Przedstawiamy również kroki i środki ostrożności, które należy podjąć podczas i po igłowaniu igłami ogniowymi. Eksperyment przeprowadzono na trzech grupach: grupie normalnej, grupie modelowej i grupie z igłami ognistymi, z których każda zawierała 10 szczurów. Szczury w grupie z ognistymi igłami były leczone interwencją ognistą igłą przez sześć sesji. Po okresie interwencji pobraliśmy wycinki kości udowej i wykonaliśmy mikrotomografię komputerową. Wyniki sugerują, że igłowanie ogniem może poprawić morfologię kości i gęstość mineralną u szczurów OP. Informacje te mogą służyć jako podstawa metodologiczna do prowadzenia podstawowych badań nad terapią ogniowo-igłową.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Medycyna chińska uważa, że czynniki takie jak klimat i środowisko mogą wpływać na sylwetkę człowieka, co z kolei wpływa na występowanie i rozwój chorób. Region Lingnan w Chinach, obejmujący głównie Guangdong, Guangxi i wyspę Hainan, znajduje się w regionie klimatu tropikalnego monsunu. W rezultacie osoby mieszkające w tym regionie przez długi czas są podatne na jakąś formę niedoboru śledziony. W niektórych przypadkach rozprzestrzenia się na nerki i wątrobę, prowadząc do występowania osteoporozy1. Śledziona i żołądek pełnią funkcję w transporcie i wchłanianiu wody i ziaren, które są źródłem qi i biochemii krwi, podczas gdy wątroba pomaga w utrzymaniu szpiku. Tak więc odżywianie kości opiera się na zaopatrzeniu śledziony, żołądka i wątroby. W medycynie chińskiej nerka jest zdolna do wytwarzania szpiku i wzmacniania kości, a jej witalność bezpośrednio wpływa na siłę i funkcję kości. Dlatego niewydolność nerek jest bezpośrednio związana z osteoporozą. Według TCM, podstawowym powodem jest niedobór wątroby (Gan)-nerki (Shen) i brak esencji (Jing). W niektórych przypadkach może dojść do niedożywienia z powodu niedoboru śledziony (Pi) i żołądka (Wei) lub braku równowagi tych dwóch. Oznacza to, że niedobór wątroby (Gan), nerek (Shen), śledziony (Pi) i żołądka (Wei) jest główną przyczyną, podczas gdy zewnętrzna qi (Xie qi) blokuje meridiany i uszkadza kości i mięśnie. Według Światowej Organizacji Zdrowia (WHO) OP jest stanem chorobowym charakteryzującym się niską masą kostną i pogorszeniem stanu tkanek2, co stanowi poważny problem dla osób starszych. Dobór odpowiednich interwencji ma kluczowe znaczenie w profilaktyce i leczeniu osteoporozy.

Współcześni akupunkturzyści opracowali unikalną cechę Lingnan terapii ognistą, łącząc klimat Lingnan i fizyczne cechy ludu Lingnan3. Terapia ogniowa to rodzaj metody leczenia, w której specjalne igły są wypalane na czerwono i szybko nakłuwane w określone części lub punkty akupunkturowe ludzkiego ciała w celu leczenia różnych dolegliwości. Metoda ta jest szeroko stosowana w chorobach skóry, chorobach układu mięśniowo-szkieletowego i stawów, chorobach neurologicznych i innych chorobach ogólnoustrojowych i wykazuje dobrą skuteczność4. Leczenie osteoporozy za pomocą ognistych igieł jest stosowane w klinikach od dawna i ma lepszy efekt leczniczy niż zwykła akupunktura lub doustne podawanie tradycyjnej medycyny chińskiej5,6,7. Terapia ognistą igłą Lingnan integruje akupunkturę, igły trójsieczne i moksoterapię bliznowacą. Może poprawić qi i krążenie krwi w meridianach, jednocześnie ogrzewając nerki. Leczenie to może rozwiązać zarówno problem zastoju krwi, jak i niewydolności nerek (Shen), które przyczyniają się do patogenezy OP w TCM. Co więcej, ma zalety niskiego kosztu, szybkich efektów, krótkiego okresu leczenia i bezpieczeństwa. Brakuje jednak badań nad jego mechanizmem. W artykule przedstawiono specyficzną procedurę Lingnan Fire-Needle u szczurów modelowych z osteoporozą i przedstawiono podstawy metodologiczne do prowadzenia powiązanych badań podstawowych.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie eksperymenty zostały przeprowadzone zgodnie z Narodowym Instytutem Zdrowia - Przewodnik dla Opieki i Użytkowania Zwierząt Laboratoryjnych i zostały zatwierdzone przez Hubei University of TCM - Institutional Animal Care and Use Committee. Do badania wykorzystano dorosłe samice szczurów rasy Sprague-Dawley (SD) o masie ciała od 220 ± 20 g. Wszystkie szczury utrzymywano w 12-godzinnym cyklu światło/ciemność w temperaturze 23 ± 1 °C i wilgotności 40%-50%, ze swobodnym dostępem do pożywienia i wody.

1. Przygotowanie przedoperacyjne

  1. Projektowanie grupowe
    1. Po genotypowaniu 30, 3-miesięcznych samic szczurów, losowo podziel je na trzy grupy (n = 10 w każdej grupie): grupę normalną, grupę modelową i grupę ognistą. Traktuj szczury w grupie z ognistymi igłami za pomocą interwencji ognistej igły 1x dziennie przez 6 sesji, z 1 dniem odpoczynku między sesjami.
      UWAGA: Grupa normalna i grupa modelowa zawiesiły szczura związanego bezpieczną powłoką zgodnie z tą samą częstotliwością i tym samym czasem co grupa z igłą ogniową, ale bez leczenia igłą ogniową.
  2. Przygotowanie modelu osteoporozy u szczurów
    1. W przypadku szczurów w grupie modelowej i grupie z igłą ognistą chirurgicznie usuń jajniki, aby ustalić model osteoporozy, jak opisano w8,9,10.
      1. W przypadku wycięcia jajników należy podać znieczulenie przez dootrzewnowe wstrzyknięcie 2% pentobarbitalu sodu (0,2 ml / 100 g) przed operacją i uznać znieczulenie za skuteczne, gdy zwierzęta nie reagują na znieczulenie chirurgiczne w oparciu o brak odpowiedzi z testu szczypania palca u nogi. Używaj maści weterynaryjnej na oczy, aby zapobiec wysuszeniu podczas znieczulenia. Buprenorfinę (0,05 mg/kg) należy wstrzyknąć podskórnie jako środek przeciwbólowy przed zabiegiem chirurgicznym. Utrzymuj warunki aseptyczne podczas pracy.
        UWAGA: Jeśli operacja nie została zakończona, a szczur wykazuje oznaki resuscytacji, dootrzewnowe wstrzyknięcie 2% pentobarbitalu roztworu sodu może być uzupełnione tymczasowo i odpowiednio, przy czym każda dodatkowa dawka nie przekracza 20% całkowitej wstrzykniętej ilości.
      2. Po zabiegu umieść szczury na poduszce grzewczej dla małych zwierząt i ustaw temperaturę na 32 °C. Nie zostawiaj szczurów bez opieki, dopóki nie odzyskają przytomności i nie będą mogły swobodnie się czołgać. Nie zwracaj ich do towarzystwa innych zwierząt, dopóki w pełni nie wyzdrowieją.
      3. Kiedy szczury zostaną ożywione, sprawdź szwy pod kątem integralności i umieść szczury z powrotem w klatce. Wstrzyknij wszystkim szczurom domięśniowo sól sodową penicyliny (50 000 j. dziennie, przez 3 dni) i wstrzyknij dootrzewnowo 0,1 ml 0,05% roztworu diklofenaku sodu (dziennie, przez 3 dni), aby zapobiec infekcji i przyspieszyć gojenie9,10.
    2. Obserwuj cykl rujowy zgodnie z rozmazem złuszczonych komórek pochwy samic szczurów, jak opisano w11. Jeśli cykl jest nieuporządkowany, model jest ustanawiany pomyślnie11.
      UWAGA: Osteoporoza po owariektomii u szczurów rozwija się po około 8-12 tygodniach.
  3. Wybór narzędzi igłowych
    1. Kupuj igły przeciwpożarowe od producentów urządzeń medycznych. Upewnij się, że narzędzia igłowe są wykonane ze stopu wolframu i manganu, który jest odporny na temperaturę, nie jest plastyczny, niełatwy do odkształcenia i równomiernie się nagrzewa. Igła ogniowa ma kształt igły z włókna. Upewnij się, że igła jest gruba, końcówka jest ostra i prosta, a uchwyt jest owinięty drutem miedzianym, który izoluje ciepło i nie parzy rąk.
    2. Wybierz jednogłowicową igłę ogniową o wymiarach 0,40 mm x 13 mm, ponieważ szczury są małe. Sprawdź, czy igła ogniowa ma zadziory i pęknięcia.
      UWAGA: W praktyce klinicznej większość używanych igieł ogniowych to igły opracowane przez He Puren, krajowego mistrza medycyny12. Na tej podstawie Lin Guohua stworzył Lingnan Long-Headed Fire Needle i Lingnan Three-Headed Fire Needle13. Wybierz różne rozmiary igieł ognistych w zależności od potrzeb eksperymentu.
  4. Wybór i umiejscowienie punktów akupunkturowych
    1. Zgodnie z odpowiednimi danymi i piśmiennictwem wybierz punkty akupunkturowe do leczenia osteoporozy pomenopauzalnej.
      UWAGA: Najczęściej używanymi punktami akupunkturowymi są, w kolejności częstotliwości, Shenshu (BL 23), Zusanli (ST 36), Pishu (BL 20), Xuanzhong (GB 39) i Dazhu (BL 11)14,15. W podstawowych badaniach nad interwencją akupunkturową w osteoporozie u szczurów z modelem bezowulacyjnym najczęściej stosowanymi punktami akupunkturowymi są Shenshu (BL 23), Sanyinjiao (SP 6), Guanyuan (CV 4) i Zusanli (ST 36)16,17,18.
    2. Określ punkty akupunkturowe wybrane do tego eksperymentu. Odnosząc się do punktów akupunkturowych wybranych w poprzednich badaniach14,15,16,17,18 i patogenezy osteoporozy, wybierz cztery punkty akupunktury, a mianowicie Shenshu (BL 23), Pishu (BL 20), Zusanli (ST 36) i Sanyinjiao (SP 6), do tego badania. Odpowiadają one meridianowi pęcherza moczowego, meridianowi Du, meridianowi śledziony i meridianowi nerkowemu.
      UWAGA: Zabrania się używania igieł ognistych na częściach z dużymi naczyniami i pniami nerwowymi.
    3. Ogol miejsce akupunktury za pomocą elektrycznej maszynki do strzyżenia zwierząt przed ustawieniem w celu odsłonięcia punktu akupunktury.
    4. Lokalizacja punktów akupunkturowych odnosi się do nazw i lokalizacji powszechnie używanych punktów akupunkturowych w19. Zlokalizuj punkty akupunkturowe w następujący sposób: Shenshu (BL 23) znajduje się po dwóch dolnych stronach drugiego kręgu lędźwiowego, 6 mm od środkowej linii grzbietowej; Pishu (BL 20) znajduje się między żebrami po dwóch dolnych stronach 12. kręgupiersiowego, 6 mm od środkowej linii grzbietowej; Zusanli (ST 36) znajduje się po tylnej i bocznej stronie kolana, około 3 mm poniżej małej głowy kości strzałkowej; a Sanyinjiao (SP 6) znajduje się około 10 mm prosto w górę od czubka wewnętrznej kostki tylnej kończyny.
    5. Oznacz je markerem na bazie oleju po zlokalizowaniu punktów.
  5. Metoda unieruchamiania szczurów
    UWAGA: W celu zmniejszenia stresu podczas unieruchamiania i leczenia szczurów, jako metodę unieruchomienia wybrano zawieszone szczury związane bezpieczną powłoką20,21. Metoda zawieszania sierści szczura ma następujące zalety: Po pierwsze, w pełni wykorzystuje nawyk szczura do preferowania ciemnego otoczenia i zmniejsza reakcję szczura na stres podczas utrwalania. Po drugie, zawieszone szczury są cichsze i bardziej chętne do współpracy podczas całego procesu leczenia ogniem ze względu na brak punktów siły na ich kończynach i palcach. Po trzecie, punkty akupunkturowe na grzbiecie i kończynach szczurów były wystarczająco odsłonięte, aby ułatwić leczenie. Pojedynczy zabieg wymaga krępowania szczura przez 5-10 min. Gdy są zabezpieczone w sierści, szczury nie walczą w unieruchomieniu i są spokojne.
    1. Przygotuj sierść szczura. Zszyj oczyszczoną tkaninę i ułóż z niej płaszcz szczura o wymiarach 50 cm x 13 cm w kształcie tuby. Wytnij otwory na każdą z czterech kończyn i tył płaszcza szczura i zszyj krawaty w czterech rogach.
    2. Załóż rękawiczki, połóż szczura na stole, który nie jest śliski, lewą ręką przytrzymaj ogon szczura i delikatnie pociągnij do tyłu. Otwórz port sierści szczura prawą ręką. Korzystając z nawyku szczura do ciemności i kopania, umieść go u ujścia sierści szczura, szczur sam by się w nim zakopał.
    3. Kiedy szczur zagrzebie się w środku sierści szczura, lewą ręką przytrzymaj obie strony łopatek szczura, a prawą ręką wyciągnij dwie przednie kończyny szczura.
    4. Zaciśnij liny z przodu płaszcza, skrzyżuj liny i owiń je wokół grzbietu szczura. Dostosuj elastyczność lin i zawiąż węzeł na grzbiecie szczura. Na koniec przymocuj tylny koniec ciała szczura w podobny sposób, tak aby jego obustronne tylne kończyny znajdowały się poza sierścią szczura.
    5. W przypadku zawieszenia typu huśtawka weź dwa haki S i zaczep je w węźle z tyłu płaszcza szczura i zaczep haki na żelaznej ramie. W tym momencie szczur jest zawieszony na pasku materiału, w stanie lekko kołyszącym (Rysunek 1).
      UWAGA: Wysokość paska materiału od ziemi wynosi około 70 cm, aby eksperymentator siedzący na stołku mógł działać wygodnie i bez wysiłku. Umieść grubą wyściółkę na płaskiej powierzchni pod szczurem jako środek ostrożności, jeśli zwierzę się poślizgnie.

2. Leczenie akupunkturą

  1. dezynfekcja
    1. Wysterylizuj obszar lokalny 5% roztworem dezynfekującym jodoforu 3x przed akupunkturą. Dodaj alkohol do nacierania po każdym peelingu jodoforowym.
  2. Płonące igły
    UWAGA: Należy podjąć środki ostrożności, aby zapobiec oparzeniom i obrażeniom.
    1. Weź kleszcze hemostatyczne, aby podnieść wacik nasączony 95% alkoholem lewą ręką i podpal go zapalniczką.
    2. Trzymaj uchwyt igły kciukiem, palcem wskazującym i środkowym palcem prawej ręki w lekko zakrzywionej pozycji, tak jakbyś trzymał długopis.
    3. Umieść końcówkę igły i korpus igły na wacikach nasączonych alkoholem i podgrzej je; najpierw podgrzej korpus igły, a następnie podgrzej końcówkę igły. Palić igłę, aż stanie się jasna biała lub czerwona, w zależności od celu leczenia (Rysunek 2).
      UWAGA: Korpus igły powinien być całkowicie spalony na jaskrawobiały lub czerwony kolor, w przeciwnym razie wpłynie to na skuteczność akupunktury lub spowoduje infekcję pooperacyjną i inne problemy.
  3. Akupunktura
    UWAGA: W zależności od prędkości, głębokości, zasięgu, czasu utrzymywania igły i celu leczenia, Lingnan Fire-Needle można podzielić na różne techniki operacyjne, takie jak akupunktura punktowa, akupunktura rozproszona, akupunktura gęsta, akupunktura szybka i akupunktura wolna22. Kluczem do pracy z igłą ognistą Lingnan jest kolor czerwony, dokładny i szybki.
    1. Poczekaj, aż igła spali się na czerwono, odsuń igłę od płomienia i przytrzymaj ją powyżej punktu akupunkturowego.
    2. Skieruj końcówkę igły pionowo na punkt akupunkturyczny, szybko nakłuj i wyciągnij. Upewnij się, że cały proces został zakończony w ciągu 1 sekundy.
    3. Głębokość penetracji punktów akupunkturowych wynosi około 1-2 mm, należy przekłuć tylko rozgrzaną do czerwoności końcówkę igły.
      UWAGA: Głębokość akupunktury należy określić w zależności od stanu, budowy, wieku, grubości mięśni akupunktury, głębokości naczyń krwionośnych i rozmieszczenia nerwów.
    4. Nakłuj każdy punkt akupunkturowy 3x-5x. Powtórz to dla wszystkich punktów akupunkturowych (Rysunek 3).
      UWAGA: Podczas wykonywania operacji bądź w pełni skoncentrowany i zwinny. W tej samej procedurze na szczurach należy użyć tej samej igły ogniowej, przy czym igła powinna być ponownie sterylizowana przez podpalenie między każdymi dwoma nakłuciami; Igły nie należy odkładać ani stawać się niesterylna.

3. Postępowanie po akupunkturze

  1. Odsunąć igłę ognistą od skóry i przytrzymać sterylny, suchy wacik, aby nacisnąć otwór na igłę, aby zapobiec krwawieniu. Po terapii ognistymi igłami szczury wykazywały nieupośledzoną mobilność i brak wykrywalnych powikłań.
    UWAGA: Jeśli po nakłuciu ogniem wystąpi krwawienie, nie ma potrzeby tamowania krwawienia, wystarczy przetrzeć suchym wacikiem po jego naturalnym ustaniu.

4. Zbieranie i analiza danych

  1. Po 6 cyklach interwencji ogniowej należy poddać szczury eutanazji poprzez dootrzewnowe wstrzyknięcie dużej dawki pentobarbitalu sodu (150-200 mg / kg). Zbierz próbki kości udowej i wykonaj mikrotomografię komputerową23.
  2. Analizuj dane statystycznie za pomocą oprogramowania analitycznego. Pokazuj pomiary jako średnią i analizuj za pomocą jednoczynnikowej ANOVA, przy czym p <0,05 jest uważane za statystycznie istotne.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dane w Tabeli 1 pokazują, że w porównaniu z normalną grupą, grubość kości beleczkowej (Tb.Th), liczba kości beleczkowej (Tb.N) i parametr statyczny ułamek objętości kości beleczkowej (BV/TV) w grupie modelowej zostały znacznie zmniejszone (p <0,05), a separacja kości beleczkowej (Tb.Sp) była podwyższona (p <0,05); co wskazuje, że struktura kostna kości beleczkowej w obszarach kości udowej wzbogaconych w kości beleczkowej Nasada szczura została znacznie zakłócona po deosteoporozie, co wskazuje na oczywiste uszkodzenie.

W porównaniu z grupą modelową, grubość beleczka, liczba beleczków i udział objętości kości udowej w parametrze statycznym beleczkowej kości udowej w grupie akupunktury ogniowej były znacznie zwiększone (p <0,05), a separacja beleczkowa była zmniejszona (p <0,05). Sugeruje to, że terapia ognistą igłą może poprawić uszkodzenia struktury kości gąbczastej kości udowej u szczurów modelowych z osteoporozą wywołane usunięciem kości.

Rysunek 4 pokazuje trójwymiarowe obrazy struktury macierzy gąbczastej kości szczura w każdej grupie. Rysunek 4A to normalna grupa, Rysunek 4B to grupa modelowa, a Rysunek 4C to grupa ognistych igieł. Jak widać na rysunku, w porównaniu z normalną grupą, w grupie modelowej utracono dużą liczbę beleczk, a nawet na obwodzie macierzy gąbczastej kości udowej, a w dolnej części pojawiła się duża liczba ubytków. Uszkodzeniu uległa ogólna ciągłość struktury kostnej, w wyniku czego pojawiła się część wolnej beleczki kostnej. W porównaniu z grupą modelową nastąpił duży wzrost grubości beleczków w środku i na obwodzie kości gąbczastej kości udowej w grupie ognistej igły oraz poprawiono ciągłość ogólnej struktury kości. Sugeruje to, że igły ogniste mogą chronić strukturę beleczkową kości gąbczastej kości udowej w szczurzym modelu osteoporozy wywołanej owariektomią.

figure-results-1
Rysunek 1: Metoda utrwalania szczurów: huśtawka szczurów związanych sierścią.Po ubraniu szczura w płaszcz szczura, szczur jest zabezpieczany i zawieszany w powietrzu poprzez zaczepienie płaszcza szczura za pomocą dwóch haczyków S. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-results-2
Rysunek 2: Ognista igła Lingnan. (A) Narzędzia igłowe. Wybierz cienką igłę ogniową o rozmiarze 0,40 mm x 13 mm. (B) Igły do spalania. Połóż końcówkę igły i korpus igły na wacikach nasączonych alkoholem i podgrzej. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-results-3
Rysunek 3: Procedura akupunktury ognistej igłą w czterech punktach akupunkturowych. (A) Pishu (BL 20): Znajduje się między żebrami po dwóch dolnych stronachdwunastego kręgu piersiowego, 6 mm od środkowej linii grzbietowej (B) Shenshu (BL 23): Znajduje się na dwóch dolnych stronach drugiego kręgu lędźwiowego, 6 mm od środkowej linii grzbietowej (C) Zusanli (ST 36): Znajduje się po tylnej i bocznej stronie kolana, około 3 mm poniżej małej głowy kości strzałkowej. (D) Sanyinjiao (SP 6): Znajduje się około 10 mm prosto w górę od czubka wewnętrznej kostki kończyny tylnej. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-results-4
Rysunek 4: Porównanie trójwymiarowej struktury kości gąbczastej dystalnej kości udowej szczurów w różnych grupach. (A) Normalna grupa. (B) Grupa modelowa. (C) Grupa ognistych igieł. Podziałka skali: 500 μm. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

grupaTb.N (mm)Tb.Sp (mm)Tb.Th (mm)BV/TV
Grupa normalna3,29±0,470,23±0,060,12±0,030,39±0,14
Grupa modeli0,96±0,78*0,66±0,44*0,09±0,01*0,17±0,11*
grupa ognistych igieł2,73±0,76Δ0,33±0,20Δ0,12±0,02Δ0,33±0,16Δ

Tabela 1: Wpływ igłowania ogniem na wskaźniki mikrostrukturalne osteoporozy udowej. Dane pokazują średnią ± SD, n= 10. Dla porównania przeprowadzonego z grupą normalną, *p<0,05; Dla porównania wykonanego z grupą modelową, Δp<0,05.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Terapia ognistą Lingnan ma głębokie tło historyczne. Zapisy dotyczące igieł ogniowych i metod igłowania można prześledzić wstecz do Huangdi Neijing. Współcześni akupunkturzyści Situ Bell i Zhang Jiawei połączyli klimat Lingnan i cechy fizyczne jego mieszkańców, aby stworzyć terapię ognistą Lingnan3. Lin Guohua podsumował terapię Lingnan Fire-Needle, jako rozgrzewającą, pogłębiającą, tonizującą, oczyszczającą i eliminującą, z ociepleniem jako esencją24.

Pierwszym krokiem do korzystania z igieł ogniowych jest wybór odpowiedniego rodzaju igły. Igły ogniste można podzielić na trzy główne kategorie: jednogłowicowe, wielogłowicowe i płaskie. Jednogłowicowa igła ogniowa jest szeroko stosowana w praktyce klinicznej i jest powszechnie stosowana w chorobach wieloukładowych. Wielogłowicowa igła ogniowa łączy w sobie trzy cienkie lub trzy średnio grube igły ogniowe w kształcie trójkąta, stosowane głównie w leczeniu chorób skóry. Igła ogniowa z płaską główką jest powszechnie stosowana do usuwania różnego rodzaju pieprzyków, brodawek i innych nadmiernych organizmów na skórze25,26. W badaniu wybrano igły jednogłowicowe, ponieważ mają one szerszy zakres zastosowań i więcej funkcji, co ułatwia uzyskanie cienkich igieł odpowiednich do wielkości szczurów.

Po drugie, właściwe stosowanie terapii ognistej wymaga krytycznych kryteriów kauteryzacji igieł. Naukowcy27 odkryli, że kauteryzacja igieł do określonej temperatury jest niezbędna dla ich skuteczności. Stymulacja może nie złagodzić istotnych zmian patologicznych, jeśli temperatura nie jest wystarczająco wysoka. Dlatego, aby osiągnąć pożądany efekt terapeutyczny, igły używane w terapii ogniowo-igłowej muszą zostać spalone do czerwonawego lub jasnobiałego koloru, a następnie szybko wprowadzone w wybrane punkty lub części. Ponadto, ponieważ kryteria palenia igieł za pomocą igieł ogniowych różnią się w zależności od narzędzi do igłowania ogniem, miejsc igłowania i leczonych chorób, opracowaliśmy obszerny zestaw kryteriów palenia igieł ognistych, do których można się odwołać w Tabeli 2. W niniejszym badaniu użyliśmy jednogłowicowej igły ogniowej do wielopunktowej stymulacji zamiast wielogłowicowej igły ogniowej. Wynikało to z faktu, że wiele igieł znajdujących się zbyt blisko siebie nie mogło zapewnić, że każda igła zostanie równomiernie kauteryzowana.

Narzędzia igłoweStopień spalenia igłyWskazania
Igła ogniowa z pojedynczą głowicąCzerwonawo-czerwony.Choroby kości i stawów oraz choroby bolesne
Wielogłowicowa igła ogniowaKońcówka igły jest lekko gorąca.Choroby skóry, takie jak trądzik
Igła ogniowa z płaską główkąJasna biel. Uchwyt igły jest lekko gorący.Nowotwór, taki jak brodawki nitkowate

Tabela 2: Kryteria spalania igieł.

Jeśli chodzi o kąt wkłucia igły ognia, jest on zazwyczaj pionowy. Jeśli chodzi o to, jak głęboko należy wprowadzić igłę, nie ma jeszcze ustalonych standardów. Jednak ogólnie sugeruje się, że głębsze wprowadzenie jest lepsze w przypadku obszarów o większej liczbie mięśni i grubszej skórze, podczas gdy płytsze wprowadzenie jest bardziej odpowiednie w przypadku obszarów o cieńszej skórze i mięśniach. Ponadto wielu ekspertów w tej dziedzinie uważa, że głębokość igłowania ogniem powinna być taka sama jak w przypadku igłowania nitkowatego28. Badanie sugeruje, że głębokość igieł ognia powinna być płytsza niż igły nitkowate podczas nakłuwania akupunkturów i nieco głębiej niż igły nitkowate podczas igłowania punktów bólu22. W rezultacie, jeśli chodzi o faktyczne stosowanie igieł ogniowych, zaleca się najpierw odniesienie się do normy dla igieł nitkowatych, a następnie określenie głębokości igłowania w oparciu o doświadczenie kliniczne.

Opierając się na zbiorowej opinii 192 ekspertów z Lingnan, główną przyczyną OP w grupach wysokiego ryzyka jest niewydolność nerek (Shen), która prowadzi do wtórnego zastoju krwi. Dlatego leczenie OP polega na jednoczesnym zajęciu się zarówno niewydolnością nerek (Shen), jak i zastojem krwi29. Obecnie akupunktura jest szeroko stosowaną metodą leczenia OP. Różne rodzaje zabiegów akupunktury obejmują terapię nitkowatą, moksowanie, akupunkturę ciepłą, elektroakupunkturę (EA), terapię osadzaniem nici, wstrzykiwanie akupunktur, połączenie akupunktury i medycyny oraz połączenie akupunktury i moksucji. Wśród nich najczęściej stosowanymi metodami leczenia w praktyce klinicznej są terapia osadzania nici, moksowanie oraz połączenie akupunktury i medycyny30. Klinicznie terapia ognistą jest szeroko stosowana w 137 różnych chorobach ukierunkowanych na kilka układów narządów, takich jak układ ruchowy, układ nerwowy, układ hormonalny, układ trawienny, położnictwo i ginekologia, wśród których najczęściej stosowane są choroby motoryczne31. Terapia ognistą Lingnan to zabieg, który łączy w sobie zalety akupunktury, igieł trójsiecznych i moksoterapii bliznowaciejącej. Może poprawić qi i krążenie krwi w meridianach oraz ogrzać nerki (Shen). Leczenie to może rozwiązać zarówno problem zastoju krwi, jak i niewydolności nerek (Shen), które przyczyniają się do patogenezy OP w TCM. Ponadto ma tę zaletę, że jest tani, ma szybkie efekty, krótki okres leczenia i jest bezpieczny. Badania kliniczne pokazują również, że połączenie terapii ognistej i akupunktury jest bardziej skuteczne w leczeniu OP niż zwykła akupunktura lub leczenie 5,6. Ból stawów jest jednym z typowych objawów OP i potwierdzono, że skuteczność terapii ogniowo-igłowej jest znacznie lepsza niż terapii nitkowatej w leczeniu bólu stawów32.

Wytrzymałość kości zależy od gęstości kości, ilości kości na jednostkę objętości. Liczba i rozmieszczenie beleczków kostnych, składników masy kostnej, znacząco wpływa na objętość kości, a co za tym idzie, gęstość kości. Frakcja objętości kości wskazuje procent objętości kości na jednostkę objętości tkanki i jest podstawowym odniesieniem dla masy kostnej23. Jako część układu kostnego, podstawową funkcją kości gąbczastej jest podtrzymywanie i ułatwianie ruchu. Jednak zwiększenie jego rozmiaru może zmniejszyć gęstość kości, zmniejszając ich wytrzymałość. Struktura szkieletowa kości gąbczastej jest gąbczasta i składa się z beleczków. Dlatego struktura kości gąbczastej jest określana przez beleczki. Aby utrzymać wytrzymałość kości gąbczastej, ważne jest, aby zapewnić wystarczającą ilość beleczek jako szkieletu. Po drugie, konieczne jest zachowanie względnie odpowiedniej liczby połączeń między beleczkami, aby zapewnić stabilność strukturalną kości33. Aby beleczki były w stanie przenosić określoną ilość obciążenia, należy zachować ich grubość. Strukturę kości gąbczastej ocenia się na podstawie liczby obecnych beleczków, ich połączeń i grubości34. Po porównaniu parametrów strukturalnych kości gąbczastej (Tabela 1) nasze wyniki ujawniły istotne różnice między grupą modelową szczurów a grupą normalną. Liczba beleczków, grubość beleczki i udział objętości kości udowej uległy zmniejszeniu, natomiast separacja beleczkowa była podwyższona w grupie modelowej. Wyniki te sugerują, że struktura kości gąbczastej zmienia grupę modelową, co może prowadzić do osteoporozy lub innych chorób kości. Na podstawie trójwymiarowego obrazu strukturalnego kości gąbczastej zaobserwowano, że w środkowej części brakowało beleczków, brakowało również ponad połowy beleczków w górnej części obwodu. Wskazuje to, że integralność struktury kostnej kości udowej u szczurów po wycięciu jajników została naruszona. W porównaniu z grupą modelową, kość udowa w grupie ognistej igły wykazywała zwiększone beleczki, grubość beleczka, frakcję objętości kości i zmniejszoną separację beleczkowaną. Dodatkowo, gdy wzięto pod uwagę trójwymiarowy schemat strukturalny kości gąbczastej, zaobserwowano, że centralna jama grupy ognistej igły została zmniejszona, a beleczki kości obwodowych były kompletne (ryc. 4). Badanie to pokazuje, że terapia ognistą skutecznie zapobiega i kontroluje uszkodzenie struktury kości gąbczastej kości udowej u szczurów, które przeszły owariektomię.

Ograniczenia modelu owariektomii szczurów wybranych do tego badania są następujące. Zmniejszenie estrogenów jest jednym z czynników ryzyka pierwotnego OP35. Z tego powodu operacja wycięcia jajników jest niezawodną metodą ustalania modeli szczurów OP 8,9,10. Ponadto szczury SD są nie tylko łatwo dostępne, ale także posłuszne, z relaksującymi warunkami karmienia. W związku z tym początkowo zbadaliśmy ten model i zaleciliśmy użycie cienkich igieł ogniowych do stymulacji akupunktów. Naszym długoterminowym planem jest rozszerzenie zakresu badań poprzez dalszą walidację skuteczności terapii ognistym w łagodzeniu OP u innych modeli, takich jak starzejące się szczury. Wreszcie, Tabela 3 podsumowuje skuteczność samej akupunktury na szczurach modelowych z osteoporozą i jej mechanizm działania. Zamierzamy przeprowadzić bardziej dogłębne badanie możliwych mechanizmów w najbliższej przyszłości 36,37,38,39,40,41,42.

Wskaźnik wynikuMechanizm działaniaOdniesienie
resorpcja kościAkupunktura zapobiega utracie masy kostnej i zmianom strukturalnym poprzez hamowanie resorpcji kości.36
wytrzymałość kościAkupunktura zwiększała objętość i grubość kości beleczkowej, zmniejszała separację beleczkowatą piszczeli i ograniczała wydalanie fosforu i Dpd, jednocześnie zwiększając stężenie osteokalcyny w surowicy.37
metabolizm kostnyAkupunktura może znacznie obniżyć poziom ALP, BGP i TRAP w surowicy u szczurów OVX.38
Szlak sygnałowyAkupunktura poprawia gęstość mineralną kości, osłabia odpowiedź zapalną in vivo i zwiększa poziom czynników wpływających na osteogenezę u szczurów poprzez modulację szlaku sygnałowego Wnt.39,40
Działanie endokrynomodulująceAkupunktura modulowała poziom estradiolu, hormonu uwalniającego kortykotropinę (CRH), hormonu adrenokortykotropowego (ACTH) i kortykosteronu (CORT) w surowicy.41
Masy ciałaAkupunktura moduluje zmiany poziomu leptyny, aby zahamować przyrost masy ciała.36,41
Czynnik neurotroficzny pochodzenia mózgowegoakupunktura może podnieść poziom ekspresji BDNF i TrkB oraz przyspieszyć proces gojenia się złamań po osteoporozie.42

Tabela 3: Wpływ prostej akupunktury na skuteczność szczurów modelowych osteoporozy.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy oświadczają, że nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca została wsparta funduszami z Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (NSFC) nr 82374564 (do YJD) i nr 82074566 (do YJD) oraz z Bazy Dziedziczenia Sun Guojie dla TCM Akupunktura-Moxibustion Światowej Federacji Towarzystw Akupunktury-Moxibustion w Wuhan, Chiny (Światowa Federacja Towarzystw Akupunktury-Moxibustion [2019] Nr 26) dla YJD i projektu budowy National Famous TCM Inheritance Studio Narodowej Administracji Tradycyjna Medycyna Chińska, Chiny (Krajowa Administracja Tradycyjnej Medycyny Chińskiej [2022] nr 5) do YJD.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
75% AlkoholShandong Lircon medicaltechnology co., ltdDezynfekcja
95% AlkoholShandong Lircon medicaltechnology co., ltdIgły do oparzeń
Dorosła samica szczurów Sprague-Dawley (SD)Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd.SCXK 2020-0001Modelowanie osteoporozy
Mata grzewcza termostatu DeluxeInstrumenty Zhenhua Doutrzymywania temperatury ciała szczurów.
Diklofenak sodu do wstrzykiwań,prowincja Shandong, Jianmu Bio-pharmaceutical Co.150182913Przeciwgorączkowe i przeciwbólowe
Podwyższony stojak mocującyTaizhou Shi Ai Instrumenty i sprzęt naukowy i edukacyjny Co.Napraw szczury
Igły ognisteBeijing Luoya Shanchuan Medical Equipment Co., Ltd.20190240Narzędzie do igłowania
kleszczy hemostatycznychQingdao Schultz Biotechnology Co.Napraw szczury
LiguterShanghai Machi Trading Co.H5Zapal alkohol
Lodophor roztwór dezynfekującyQingdao Hai's Hainuo Inovation Disinfection Technology Co., Ltd.2016-0604Dezynfekcja
Bawełniana kulka medycznaJiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd.20172142357Dezynfekcja
pentobarbitalu soduBeijing Jiehui Biotechnology Co.P3761znieczulenie
Elektryczna maszynka do strzyżenia dla zwierzątFenghua Xikou Lubao Knives & Nożyczki FabrykaGolenie sierści szczurów
Własnoręcznie wykonany płaszczNapraw szczury
PęsetaQingdao Schultz Biotechnology Co.Szczypnij waciki
urządzeń elektrycznych dla szczurów

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Shen, G. Y., et al. Analysis of the relationship between spleen deficiency constitution and osteoporosis in Lingnan people. Chinese J Info Tradl Chinese Med. 23 (4), 108-109 (2016).
  2. Consensus development conference. Consensus development conference: diagnosis, prophylaxis, and treatment of osteoporosis. Am J Med. 94 (6), 646-650 (1993).
  3. Lin, S. Y., et al. The origin and brief introduction of Lingnan fire-needling therapy. J Clin Acupuncture Moxibustion. 33 (9), 69-71 (2017).
  4. Zheng, Y. J., Zhao, X. F. Progress of research on the mechanism of action and clinical application of fire needle therapy. J Practical Tradl Chinese Med. 39 (9), 1908-1912 (2023).
  5. Hong, L. Y., et al. Clinical observation on the treatment of senile osteoporosis pain by fire needle combined with acupuncture. Yunnan J Tradl Chinese Med Materia Medica. 43 (4), 46-48 (2022).
  6. Yu, P. W., Hui, L. Y. Acupuncture plus fire needling in the treatment of postmenopausal osteoporosis in 56 cases. Chinese Arch Tradl Chinese Med. 107 (5), 811-812 (2003).
  7. Wang, N., Huang, Z. S., Bai, Y. F. Observation of TCM mastic combined with heat- needle on the treatment ofpostmenopausal osteoporosis and its effects on serum interleukin 6 and osteoprotegerin. Hebei J Tradl Chinese Med. 38 (06), 817-821 (2016).
  8. Yousefzadeh, N., Kashfi, K., Jeddi, S., Ghasemi, A. Ovariectomized rat model of osteoporosis: a practical guide. Excli j. 19, 89-107 (2020).
  9. Mansour, H. M., Fawzy, H. M., El-Khatib, A. S., Khattab, M. M. Lapatinib ditosylate rescues memory impairment in D-galactose/ovariectomized rats: Potential repositioning of an anti-cancer drug for the treatment of Alzheimer's disease. Exp Neurol. 341, 113697(2021).
  10. Xie, Y., et al. Erzhi pills ameliorate cognitive dysfunction and alter proteomic hippocampus profiles induced by d-galactose and Aβ(1-)(40) injection in ovariectomized Alzheimer's disease model rats. Pharm Biol. 59 (1-), 1402-1414 (2021).
  11. Chen, S., et al. Establishment of osteoporosis mordel by surgical castration in female rats and its evaluation. J Hunan Uni Chinese Med. 40 (11), 1315-1319 (2020).
  12. Song, Y. Q., et al. Overview on the modern development of fire needling device: from tradition to innovation. Chinese Acupuncture Moxibustion. 43 (1), 114-118 (2023).
  13. Zeng, J. C., Xiao, Q. E., Lu, L. H., Lin, G. H. Clinical experience of LIN Guohua using Lingnan fire needling. Liaoning J Tradl Chinese Med. 49 (4), 31-33 (2022).
  14. Wang, Y. F., et al. Acupoint selection rules and mechanism of acupuncture and moxibustion in the treatment of post menopausal osteoporosis based on literature analysis. J Liaoning Uni Tradl Chinese Med. 24 (2), 192-196 (2022).
  15. Lin, H., et al. Acupuncture for primary osteoporosis: Evidence, potential treatment prescriptions, and mechanisms. Evid Based Complement Alternat Med. 2019, 2705263(2019).
  16. Yin, Q., Pan, H., Ding, X. J., Qin, X. G., Guo, X. R. Mechanism of acupuncture therapy on RANKL/OPG signaling pathway to regulate bone metabolism balance in osteoporosis model rats. Rehabilitat Med. 31 (4), 292-299 (2021).
  17. Qiao, L., Li, Z. H. Acupuncture regulates bone metabolism by regulating DKK1 pathway to improve osteoporosisin OVX rats. J Cervicodynia Lumbodynia. 42 (2), 145-150 (2021).
  18. Chen, Z., Mo, Y. Q., Tang, H. Y. Runx2 promoter methylation level changes in bone tissue of rats with ovariectomized osteoporosis treated by electroacupuncture. Chinese J Tissue Eng Res. 25 (29), 4644-4649 (2021).
  19. Moxibustion, C. A. F. A. A. Names and location of commonly used acupoints in experimental animals Part 2: Rats. Acupuncture Res. 46 (4), 351-352 (2021).
  20. Tu, S. J., Chen, P., Yang, H. Y. Fixation method for needle warming moxibustion treatment on swinging rats bound with coat. Chinese J Comp Med. 31 (5), 128-132 (2021).
  21. Liu, Q., et al. Improved Suspension Fixation Using Rat Jacket in Rat Acupuncture Experiments. J Vis Exp. (198), e65652(2023).
  22. He, P. R. Mechanism and clinical application of fire needle. Chinese Med Mod Dist Edu China. 2 (10), 20-24 (2004).
  23. Bouxsein, M. L., et al. Guidelines for assessment of bone microstructure in rodents using micro-computed tomography. J Bone Miner Res. 25 (7), 1468-1486 (2010).
  24. Lin, S. Y., et al. Professor Lin Guohua 's experience in clinical application of Lingnan Fire-Needle. Guiding J Tradl Chinese Med Pharm. 24 (22), 101-103 (2018).
  25. Li, W., Hu, Q. S. A survey of clinical application of fire needle in recent ten years. Shaanxi J Tradl Chinese Med. 33 (1), 117-119 (2012).
  26. Liang, L. Y., Zhang, Z., Yang, Y. A probe into the academic characteristics of "he's three methods of acupuncture and moxibustion". J Sichuan Tradl Chinese. 37 (5), 6-9 (2019).
  27. Wu, J. Observation on the efficacy of fire acupuncture and warm acupuncture plus cupping in the controlled treatment of scapular tibial strain injury. Chinese Acupuncture Moxibustion. (7), 23-24 (1999).
  28. BAMTMRA Association. Preparation and clinical application of technical standards for the operation of the fire-needle method. China Asso Acupuncture-Moxibustion Acad Ann Conf. , (2009).
  29. Zeng, L. F., et al. Expert questionnaire survey and result analysis of TCM symptom assessment in high risk population of osteoporosis in Ling-nan region. Chinese Genl Pract. 26 (24), 2986-2991 (2023).
  30. Li, J. T., et al. Clinical and mechanism research progress of acupuncture and moxibustion in treating postmenopausal osteoporosis over past 10 years. J Clin Acupuncture Moxibustion. 39 (4), 106-111 (2023).
  31. Wang, H. B., Li, X. H., Song, X. L., Xu, L. L., Mo, J. Bibliometric analysis of clinical application of fire needle therapy. J Tradl Chinese Med Li. 27 (3), 52-54 (2009).
  32. Li, Y., Zhou, Z., He, X. J., Xu, W. G., He, P. R. Therapeutic effect of fire-needle therapy on arthralgia syndrome. Chinese Acupuncture Moxibustion. (7), 34-37 (2003).
  33. Compston, J. E. Connectivity of cancellous bone: assessment and mechanical implications. Bone. 15 (5), 463-466 (1994).
  34. Chen, J., et al. Expert consensus about the current application of bone histomorphometry. Chinese J Osteoporosis. 20 (9), 1031-1038 (2014).
  35. Lu, L., Tian, L. Postmenopausal osteoporosis coexisting with sarcopenia: the role and mechanisms of estrogen. J Endocrinol. 259 (1), e230116(2023).
  36. Atsushi, T., et al. Effect of acupuncture at acupoint of Shenshu (BL 23) on the bones of ovariectomized rats. J Tradit Chin Med. 38 (1), 54-60 (2018).
  37. Zhang, W., et al. Acupuncture increases bone strength by improving mass and structure in established osteoporosis after ovariectomy in rats. J Tradit Chin Med. 26 (2), 138-147 (2006).
  38. Ma, J., Yun-guang, H., Zhang, D. H. Effects of acupuncture on bone metabolism and serum estradiol level in ovariectomy-induced osteoporosis rats. Zhen Ci Yan Jiu. 33 (4), 235-239 (2008).
  39. Li, L., et al. Study on the Mechanism of Acupuncture at "Shenshu" and "Zusanli" for the Treatment of Postmenopausal Osteoporosis. Journal of Yunnan University of Chinese Medicine. 41 (04), 29-34 (2018).
  40. Guo, D., Gao, Z. P., Zhang, Y. P., Wu, D. Effect of acupuncture on bone mineral density and bone metabolism inpostmenopausal osteoporotic fracture rats through Wnt signaling pathway. Chinese Journal of Osteoporosis. 29 (03), 349-355 (2023).
  41. Li, X., et al. Overall adjustment acupuncture improves osteoporosis and exerts an endocrine-modulating effect in ovariectomized rats. Front Endocrinol (Lausanne). 13, 1074516(2022).
  42. Hua, C., Liu, Q. S. Effects of acupuncture on the expression of brain-derived neurotrophic factor in the ovariectomized rat fracture model). Zhongguo Zhen Jiu. 29 (4), 303-308 (2009).

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

szczury z osteoporozpunkty akupunkturoweg sto mineralna ko ciskany mikro CTtradycyjna medycyna chi skaig a do akupunkturymorfologia ko cileczenie niefarmakologiczne

Powiązane artykuły