Errata: prosty protokół testu wgłębnego do wizualizacji i ilościowego określenia resorpcji osteoklastycznej in vitro

Summary

Wydano erratę dla: Prosty protokół testu dołowego do wizualizacji i ilościowego określenia resorpcji osteoklastycznej in vitro. Sekcja Protokół została zaktualizowana.

Abstract

To poprawia artykuł 10.3791/64016

Protocol

Wydano erratę dla: Prosty protokół testu dołowego do wizualizacji i ilościowego określenia resorpcji osteoklastycznej in vitro. Sekcja Protokół została zaktualizowana.

Krok 1.1 Protokołu został zaktualizowany z:

Przygotowanie podstawowego roztworu wapnia (25 mM CaCl₂·2H₂O, 1.37 mM NaCl, 15 mM MgCl₂·6H₂O w buforze Tris)

do:

Przygotowanie podstawowego roztworu wapnia (25 mM CaCl₂·2H₂O, 1.37 M NaCl, 15 mM MgCl₂·6H₂O w buforze Tris)

Krok 1.1.1 Protokołu został zaktualizowany z:

Przygotuj 1,0 M bufor Tris i dostosuj pH do 7,4 za pomocą 1 M HCl.

do:

Przygotuj 50 mM bufor Tris i dostosuj pH do 7,4 za pomocą 1 M HCl.

Krok 1.1.2 Protokołu został zaktualizowany z:

Ustaw szklaną zlewkę na mieszadle magnetycznym i dodaj 100 ml buforu 1.0 M Tris.

do:

Ustaw szklaną zlewkę na mieszadle magnetycznym i dodaj 100 ml 50 mM buforu Tris.

Krok 1.2 Protokołu został zaktualizowany z:

Przygotowanie podstawowego roztworu fosforanowego (11,1 mM Na2HPO4·H2O, 42 mM NaHCO3 w buforze Tris)

do:

Przygotowanie podstawowego roztworu fosforanowego (11,1 mM Na2HPO4, 42 mM NaHCO3 w buforze Tris)

Krok 1.2.1 Protokołu został zaktualizowany z:

Ustaw szklaną zlewkę na mieszadle magnetycznym i dodaj 100 ml buforu 1.0 M Tris.

do:

Ustaw szklaną zlewkę na mieszadle magnetycznym i dodaj 100 ml 50 mM buforu Tris.

Krok 1.2.2 Protokołu został zaktualizowany z:

Odważ 0,158 g Na2HPO4·H2O i 0,353 g NaHCO3 i rozpuść w buforze Tris jeden po drugim.

do:

Odważ 0,158 g Na2HPO4 i 0,353 g NaHCO3 i rozpuść w buforze Tris jeden po drugim.

Krok 1.3.1 Protokołu został zaktualizowany z:

Przygotuj 30 ml roztworu roboczego, mieszając 15 ml 1,0 M buforu Tris, 7,5 ml roztworu podstawowego wapnia (krok 1.1.4) i 7,5 ml roztworu podstawowego fosforanu (krok 1.2.3). Przefiltrować roztwór za pomocą filtra 0,2 μm.

do:

Przygotuj 30 ml roztworu roboczego, mieszając 15 ml 50 mM buforu Tris, 7,5 ml roztworu podstawowego wapnia (krok 1.1.4) i 7,5 ml roztworu podstawowego fosforanu (krok 1.2.3). Przefiltrować roztwór za pomocą filtra 0,2 μm.

Krok 1.4 Protokołu został zaktualizowany z:

Przygotowanie roztworu fosforanu wapnia (2.25 mM Na2HPO4·H2O, 4 mM CaCl2·2H2O, 0.14 M NaCl, 50 mM zasada Tris w ddH2O)

do:

Przygotowanie roztworu fosforanu wapnia (2,25 mM Na2HPO4, 4 mM CaCl2·2H2O, 0,14 M NaCl, 50 mM zasady Tris w ddH2O)

Krok 1.4.1 Protokołu został zaktualizowany z:

Dodaj 2 ml 1 M HCl do 40 ml dejonizowanej wody w zlewce z magnetycznym kulką mieszającą i rozpuść 0,016 g Na2HPO4·H2O, 0,0295 g CaCl2·2H2O, 0,409 g NaCl i 0,303 g zasady Tris jeden po drugim.

do:

Dodaj 2 ml 1 M HCl do 40 ml dejonizowanej wody w zlewce z magnetycznym kulką mieszającą i rozpuść 0,016 g Na2HPO4, 0,0295 g CaCl2·2H2O, 0,409 g NaCl i 0,303 g zasady Tris jeden po drugim.