Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Opracowanie modelu raka jelita grubego u myszy i ocena efektu terapeutycznego medycyny chińskiej

2.1K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/66045

⸱

13 października 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1College of Traditional Chinese Medicine, Changchun University of Chinese Medicine, 2School of Clinical Medicine, Changchun University of Chinese Medicine, 3Department of Radiotherapy, Jilin Provincial Cancer Hospital

W tym artykule

Podsumowanie

Ten protokół dostarcza mysi model wrzodziejącego raka jelita grubego związanego z zapaleniem jelita grubego wywołanego przez azmetan w połączeniu z siarczanem dekstranu sodu. Model został wykorzystany do oceny skuteczności związków tradycyjnej medycyny chińskiej w profilaktyce i leczeniu raka jelita grubego.

Streszczenie

Rak jelita grubego (CRC) jest powszechnym nowotworem układu pokarmowego i stał się trzecim najczęstszym nowotworem złośliwym na świecie i drugą najczęstszą przyczyną zgonów związanych z nowotworem złośliwym. Wrzodziejące zapalenie jelita grubo-śledziowego (UC) jest zmianą przedrakową, a CRC związane z UC (UC-CRC) jest najczęstszym podtypem CRC. Dlatego rozsądny model UC-CRC jest kamieniem węgielnym i gwarancją rozwoju nowych leków. Tradycyjna medycyna chińska (TCM) jest szeroko stosowana w leczeniu UC-CRC ze względu na swoją dobrą skuteczność. Jako klasyczna recepta tonizująca na TCM, wywar Liujunzi (LJZD) jest szeroko stosowany w leczeniu UC-CRC. W tym badaniu ustalono model UC-CRC poprzez połączenie azometanu i siarczanu dekstranu sodu, a następnie podano LJZD. Dane potwierdziły, że LJZD może skutecznie hamować przejście raka w UC-CRC za pomocą masy ciała myszy, długości jelita grubego, czynników patologicznych i zapalnych, funkcji bariery jelitowej i markerów nowotworowych. Protokół ten zapewnia system oceny skuteczności TCM w zapobieganiu i leczeniu UC-CRC.

Wprowadzenie

Rak jelita grubego (CRC) jest powszechnym nowotworem złośliwym przewodu pokarmowego, trzecim najczęstszym nowotworem złośliwym i drugą najczęstszą przyczyną zgonów na świecie, odpowiadając za 10% globalnej zachorowalności na raka i 9,4% całkowitej liczby zgonów związanych z rakiem1,2. Czynniki genetyczne, przewlekłe stany zapalne, dieta wysokotłuszczowa, cukrzyca i nieprawidłowa flora jelitowa są czynnikami ryzyka CRC3,4. Wśród nich nieswoiste zapalenie jelit, zwłaszcza wrzodziejące zapalenie jelita grubego (UC), jest wyraźnym czynnikiem ryzyka CRC5,6. UC-CRC ASSOCIATED UC (UC-CRC) to proces przejściowy stanu zapalnego, atypowego przerostu i raka oparty na przewlekłym zapaleniu jelita grubego, który różni się od typowego modelu rozwoju gruczolakoraka CRC7,8. W porównaniu z populacją ogólną, ryzyko CRC jest około 10-40 razy wyższe u pacjentów z nieswoistymi zapaleniami jelit9.

Obecnie chirurgia jest nadal standardowym sposobem leczenia CRC, a w zależności od lokalizacji i stadium nowotworu, radioterapia, ogólnoustrojowa terapia lekowa lub kombinacja obu tych metod są możliwe10. Chociaż te tradycyjne metody leczenia poczyniły ogromne postępy, ze względu na wysoką heterogeniczność i wskaźnik nawrotów CRC, rokowanie jest złe, a efekt leczenia nie jest idealny11,12. Dlatego wczesne wykrycie, wczesna diagnoza i kompleksowe leczenie są kluczem do poprawy wskaźnika przeżycia pacjentów z CRC, a szczególnie ważne jest zwrócenie uwagi na transformację WZJG w CRC. Z biegiem lat tradycyjna medycyna chińska (TCM) przyciągnęła wiele uwagi w leczeniu UC-CRC lub przewlekłego zapalenia żołądka ze względu na ograniczone skutki uboczne i znaczną skuteczność. Opierając się na leczeniu dialektycznym, słynni praktycy medycyny chińskiej różnych pokoleń stworzyli dużą liczbę klasycznych recept, takich jak Huangqi Jianzhong decoction13, Sijunzi decoction14 i Sishen pill15.

Odwar Liujunzi (LJZD) wywodzi się z dzieł Yi Xue Zheng Zhuan skompilowanych w czasach dynastii Ming i jest klasyczną receptą w TCM16. Jak pokazano w tabeli 1, LJZD składa się z sześciu tradycyjnych ziół, w tym Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.), Wolf (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Citrus reticulata Blanco (Chenpi) i Pinellia ternata (Thunb.) Breit (Banxia), który ma działanie uzupełniające qi i wzmacniające śledzionę, wysuszające wilgoć i rozpuszczające flegmę. We współczesnej praktyce klinicznej jest często stosowany w leczeniu przewlekłego zapalenia błony śluzowej żołądka, wrzodów żołądka i wrzodów dwunastnicy. Nowoczesne badania farmakologiczne wykazały, że LJZD i zmodyfikowany LJZD mają wysoką wartość aplikacyjną w leczeniu uzupełniającym WZJG i raka przewodu pokarmowego17,18,19.

Obecnie istnieje wiele sposobów konstruowania mysich modeli UC-CRC, ale mysi model indukowany azoksymetanem (AOM)/siarczanem dekstranu sodu (DSS) jest najczęściej używanym modelem UC-CRC; objawy kliniczne, obserwacje morfologiczne i patologiczne dowiodły, że model jest bardzo podobny do ludzkiego UC-CRC20,21. Podstawową zasadą jest najpierw wywołanie kancerogenezy za pomocą chemicznego czynnika rakotwórczego OZUŚ, a następnie ciągłe wystawianie myszy na działanie środowiska stymulacji stanu zapalnego DSS, aby symulować ciągłe uszkodzenie i naprawę nabłonka błony śluzowej jelit, konstruując w ten sposób model myszy UC-CRC22. Celem tego badania jest ustalenie mysiego modelu UC-CRC poprzez dootrzewnowe wstrzyknięcie OZUŚ i cykliczną stymulację DSS w krótkim okresie oraz ocena wpływu leku i mechanizmu molekularnego LJZD na UC-CRC w celu zapewnienia naukowych podstaw do leczenia UC-CRC.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Procedura na zwierzętach została zatwierdzona przez Komitet Etyki Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Changchun (Numer rekordu: 2021214). Wolne od specyficznych patogenów myszy C57BL/6J (8-10 tygodni, waga 18-22 g), samce i samice, trzymano w niezależnie wentylowanych klatkach w temperaturze 22 °C i wilgotności względnej 65%. Myszy rozpoczęły eksperyment po 7 dniach karmienia adaptacyjnego, podczas którego miały swobodny dostęp do wody i diety.

1. Przygotowanie leku

  1. Przygotowanie LJZD
    UWAGA: Zastosowany lek chiński został zakupiony w Szpitalu Stowarzyszonym Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Changchun i został zidentyfikowany jako prawdziwa medycyna chińska (patrz Tabela 1).
    1. Umieść Dangshen (12 g), Baizhu (12 g), Gancao (6 g), Chenpi (12 g), Jiangbanxia (9 g) do specjalistycznego ceramicznego garnka (patrz Tabela Materiałów). Dodaj 1000 ml wody destylowanej i moczyć w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę (patrz Rysunek 1A).
    2. Proszek 12 g Fuling na drobny proszek za pomocą młynka i moczyć w 300 ml wody destylowanej w innym pojemniku przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej.
    3. Wymieszaj powyższą medycynę chińską w specjalistycznym ceramicznym garnku. Zagotuj mieszaninę, a następnie trzymaj na średnim ogniu, aż pozostanie tylko 300 ml wywaru. Do filtrowania należy użyć gazy medycznej i zachować filtrat w temperaturze pokojowej.
    4. Dodaj 1000 ml wody destylowanej i powtórz powyższą operację wywaru jeszcze raz. Przefiltruj ponownie za pomocą gazy medycznej. Połączyć filtrat i gotować go, aż pozostanie tylko 150 ml.
    5. Odwirować zagęszczoną ciecz o stężeniu 10 000 x g przez 5 minut, a następnie zagęścić otrzymany supernatant do 30 ml na średnim ogniu. Przenieś końcowy koncentrat do naczynia i wysusz go w elektrycznym piecu suszącym, aż pozostanie tylko substancja rozpuszczona w postaci proszku.
    6. Zważyć powyższą substancję stałą i rozpuścić ją w sterylnej wodzie destylowanej, aby uzyskać roztwór zawierający 22,85 mg leku na 0,2 ml (114,16 mg/ml), co stanowi dzienną dawkę myszy.
  2. Preparat kwasu 5-aminosalicylowego
    UWAGA: Kwas 5-aminosalicylowy (5-ASA; patrz tabela materiałów) ma dobre działanie zapobiegawcze na UC-CRC i był stosowany jako pozytywny lek w tym badaniu23.
    1. Rozpuścić 64 mg proszku 5-ASA w 200 ml sterylnej wody destylowanej, aby uzyskać 1,82 mg/ml roztworu 5-ASA. Dzienna dawka dla pojedynczej myszy wynosiła 0,2 ml.
  3. Przygotowanie roztworu do wstrzykiwań AOM
    1. Dodać 2,5 ml sterylnej wody destylowanej do 25 mg proszku AOM (patrz tabela materiałów) i wymieszać za pomocą mieszalnika wirowego (patrz tabela materiałów) w celu uzyskania 10 mg/ml roztworu podstawowego AOM, przechowywać w temperaturze -20 °C do momentu użycia.
    2. Przygotować roztwór do wstrzykiwań AOM, rozcieńczając roztwór podstawowy AOM sterylną wodą destylowaną w stosunku 10:1 (1 mg/ml).

2. Ustanowienie modelu UC-CRC

UWAGA: Eksperyment został podzielony na 4 grupy: kontrolną, modelową, LJZD i grupę 5-ASA, po 10 myszy w każdej grupie. Z wyjątkiem grupy kontrolnej, pozostałe grupy były leczone OZUŚ i DSS.

  1. Dootrzewnowe wstrzyknięcie roztworu do wstrzykiwań AOM
    UWAGA: Po adaptacyjnym karmieniu przez 7 dni, myszom podawano roztwór do wstrzykiwań AOM (1 mg / ml) we wstrzyknięciu dootrzewnowym (patrz Ryc. 1B).
    1. Trzymaj mysz brzuszkiem do góry i głową lekko w dół. Chwyć skórę pleców, aby napiąć skórę brzucha i przekłuć skórę około 1 cm na prawo od przecięcia linii korzeniowej obu ud na linii środkowej części brzucha za pomocą strzykawki o pojemności 1 ml (patrz tabela materiałów).
    2. Wcisnąć igłę strzykawki o pojemności 1 ml na odległość 3-5 mm pod skórą, trzymając ją równolegle do linii środkowej jamy brzusznej, a następnie wprowadzić igłę 0,3-0,5 mm do jamy brzusznej pod kątem 45°.
    3. Po przejściu końcówki przez mięsień brzucha operator wyczuwa nagłą utratę oporu. Następnie pociągnąć strzykawkę na zewnątrz i do tyłu, aby obserwować, czy nie dochodzi do przesiąkania cieczy. Jeśli nie, należy powoli wstrzyknąć roztwór do wstrzykiwań AOM do myszy w dawce 0,1 ml/10 g.
  2. Cykliczna stymulacja 2% roztworu DSS
    UWAGA: Każdej myszy indukowanej OZUŚ podano 500 ml roztworu DSS w 3, 6 i 9 tygodniu, a myszy piły swobodnie w tym okresie.
    1. Przygotować 2% roztwór DSS, dodając 500 ml sterylnej wody destylowanej do 10 g DSS (patrz tabela materiałów). Wymieszać za pomocą mieszalnika wirowego i przechowywać w temperaturze 4 °C do momentu użycia.
    2. Każda mysz indukowana przez AOM wypija swobodnie 500 ml 2% roztworu DSS przez 7 dni w 3, 6 i 9 tygodniu po indukcji AOM.

3. Leczenie odwykowe

UWAGA: Dorośli ludzie potrzebują 63 g LJZD dziennie. Zgodnie ze wzorem przeliczeniowym eksperymentalnej dawki leku dla myszy i ludzi, równoważna dawka doświadczalna dla myszy (mg/kg) = dawka dla ludzi (mg/kg)/masa ciała (60 kg) x 9,1, dawka dobowa dla myszy wynosiła około 9,6 g/kg.

  1. Potraktuj grupę LJZD i 5-ASA 0,1 ml/10 g przygotowanego roztworu LJZD i 5-ASA przez zgłębnik żołądka odpowiednio w 7. i 15. tygodniu.
    1. W przypadku podawania dożołądkowego myszom należy wykonać następującą procedurę. Trzymaj mysz w lewej ręce, a w prawej trzymaj aparat do perfuzji żołądka. Włóż igłę strzykawki do ust i wsuń ją w dół tylnej ściany gardła myszy. Zsuń się w dół gardła, gdy myszy połykają i kontynuuj poruszanie się do przodu. Gdy pojawiło się uczucie oporu i strzykawkę można było wepchnąć do gardła, wyciągnij igłę i dokończ wstrzyknięcie.
  2. Potraktuj grupę kontrolną i modelową taką samą ilością soli fizjologicznej (patrz Tabela materiałów).
  3. Myszy w każdej grupie należy leczyć odpowiednim lekiem raz dziennie o tej samej porze w okresie podawania.

4. Ocena modelu UC-CRC i skuteczności LJZD

  1. Wynik wskaźnika aktywności choroby
    UWAGA: Zgodnie z tabelą 2, wynik wskaźnika aktywności choroby (DAI) oceniano, łącząc utratę wagi, lepkość kału i krwawienie ze stolca myszy.
    1. Rejestruj masę ciała myszy codziennie od początku żywienia adaptacyjnego do końca leczenia farmakologicznego.
    2. Uważnie obserwuj konsystencję kału każdej eksperymentalnej myszy i rejestruj wypróżnienia jako jeden z trzech warunków: normalne, luźne stolce i wodnista biegunka.
    3. Zapisz krwawienie z kału zwierząt doświadczalnych jako jeden z trzech warunków: brak krwawienia, niewielkie krwawienie i widoczna krew w stolcu.
  2. Wykrywanie poziomu IL-6 w surowicy
    1. Traktuj myszy LJZD lub 5-ASA przez 9 tygodni. Napraw myszy, chwytając lewą ręką skórę szyi myszy i delikatnie naciskając stół doświadczalny, aby przyjąć boczną pozycję odleżynowa. Odetnij wąsy myszy nożyczkami. Ostrożnie odetnij wąsy myszy nożyczkami (patrz Tabela materiałów), aby zapobiec zanieczyszczeniu krwi.
      UWAGA: Myszy, które nie mogły się swobodnie poruszać, były uważane za prawidłowo naprawione. Jeśli tak się nie stanie, myszy należy naprawić.
    2. Znieczulić mysz przez inhalację 2% izofluranu. Wysterylizuj skórę wokół gałki ocznej etanolem (patrz tabela materiałów). Delikatnie dociśnij skórę oczu z boku, aby gałka oczna była przekrwiona i wystająca.
    3. Zaciśnij gałkę oczną pęsetą łokciową i dokładnie i szybko usuń gałki oczne. Pozwól, aby krew spłynęła do rurki odśrodkowej (patrz Tabela materiałów). W tym czasie dotknij serca myszy, aby przyspieszyć pobieranie krwi.
    4. Pobraną krew należy przechowywać w temperaturze pokojowej przez 30 minut i odwirowywać przy sile 3 500 x g przez 10 minut. Zebrać supernatant i wykryć poziom IL-6 zgodnie z instrukcją zestawu do wykrywania zawartości IL-6 (patrz tabela materiałów).
  3. Oddzielanie tkanki jelita grubego
    1. Poddaj myszy eutanazji po pobraniu krwi, wdychając 5% przedawkowany izofluran i zwichnięcie szyjki macicy (patrz tabela materiałów) zgodnie z etyką zwierząt.
    2. Trzymaj myszy w kriogenicznym środowisku anatomicznym. Unieruchomij myszy w pozycji leżącej. Obetnij włosy w dolnej części brzucha nożyczkami i wysterylizuj je etanolem.
    3. Ściśnij punkt przecięcia między dwoma korzeniami ud a linią środkową brzucha za pomocą kleszczyków do powiek (patrz Tabela materiałów). Wytnij poprzeczne nacięcie około 1-1,5 cm nożyczkami.
    4. Przyciąć podłużne nacięcie wzdłuż środkowej linii brzucha od środka nacięcia poprzecznego w kierunku wyrostka mieczykowatego.
    5. Usuń tkanki okołojelitowe w kierunku odbytu, aby oddzielić jelito grube od otaczającej tkanki. Uważaj, aby nie uszkodzić jelita grubego.
    6. Dociśnij skórę brzucha na boki, aby w pełni odsłonić jelito grube. Usuń jelito grube z jamy brzusznej za pomocą kleszczyków do powiek i odetnij segmenty od odbytu do jelita ślepego (z wyłączeniem); Długość całkowita wynosi około 10 cm. Otrzymane tkanki jelita grubego przechowywać w soli fizjologicznej w temperaturze 4 °C.
  4. Ocena długości i masy odbytnicy
    1. Ekstrahować sól fizjologiczną w temperaturze 4 °C za pomocą igły o pojemności 5 ml (patrz tabela materiałów) w celu przepłukania wnętrza jelita grubego. Następnie umieść jelito grube na bibule chłonnej, aby wchłonąć wilgoć z tkanki.
    2. Zważ tkanki jelita grubego, a następnie umieść je na papierze A4, aby zmierzyć ich długość.
  5. Zmierz liczbę guzów w jelitie grubym
    1. Przeciąć jelito grube wzdłuż, aby w pełni je rozłożyć i obserwować liczbę i wielkość guzów w jelitie grubym.
  6. Analiza patologiczna jelita grubego
    1. Utrwalić jelito grube w 4% paraformaldehydzie przez 24 godziny. Utrwaloną tkankę odbytnicy zanurzyć w stopionej parafinie i ciąć w sposób ciągły o grubości 5 μm za pomocą mikrotomu do zamrażania tkanek.
    2. Zgodnie z procedurą Hou et al.24, odparafinuj skrawki w ksylenie, a następnie odwadniaj je seryjnymi stężeniami etanolu. Po barwieniu roztworem hematoksyliny przez 5 minut spłucz skrawki czystą wodą. Następnie barwić 0,5% roztworem eozyny przez 1 minutę (patrz tabela materiałów).
    3. Ponownie wykonaj odwodnienie gradientowe i zabieg przezroczysty ksylen. Uszczelnij skrawki i obserwuj je pod mikroskopem optycznym (patrz Spis materiałów) i sfotografuj, zgodnie z opisem Xie et al.25.
  7. Analiza immunohistochemiczna jelita grubego
    1. Odwoskować i odwodnić skrawki zgodnie z powyższą metodą. Napraw antygen w sekcjach za pomocą techniki naprawy termicznej pod wysokim ciśnieniem, zgodnie z opisem Gok et al.26.
    2. Namocz skrawki w endogennych blokerach peroksydazy w temperaturze pokojowej przez 15 minut. Uszczelnij skrawki kozią surowicą (patrz tabela materiałów).
    3. Dodać przeciwciało pierwszorzędowe ZO-1 (1:1000), Okludynę (1:1000) i KI67 (1:500; patrz Tabela Materiałów) do sekcji i inkubować przez noc w temperaturze 4 °C. Przepłukać skrawki buforem PBS (patrz Tabela Materiałów), dodać do niego przeciwciało drugorzędowe ogólnego przeznaczenia (1:5000; patrz Tabela Materiałów) i inkubować w temperaturze 37 °C przez 30 minut.
    4. Dodaj roztwór DAB (patrz Tabela materiałów) do sekcji dotyczących opracowywania kolorów. Przeciwbarwić skrawki roztworem hematoksyliny.
    5. Odwodnić, przeźroczyścić i ponownie uszczelnić sekcje. Obserwuj ekspresję białka pod mikroskopem optycznym.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Odwar LJZD przygotowano zgodnie z proporcjami składników leków w Tabela 1 or metoda wywaru w tradycyjnej medycynie chińskiej (TCM) w Rycina 1AZgodnie z punktem czasowym wskazanym w Rysunek 1Bmyszom domięśniowo podano AOM w stężeniu 1 mg/ml w 7.th dnia, a myszy otrzymały swobodny dostęp do wody pitnej zawierającej 2% DSS w 3.rd, 6thoraz 9th tygodniach. Model mysi UC-CRC został pomyślnie ustanowiony w 15...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

CRC jest jednym z najczęstszych nowotworów na świecie, z około 1 148 000 nowych przypadków i ponad 576 000 zgonów każdego roku. CRC można podzielić na trzy typy w zależności od różnych przyczyn, w tym dziedziczne, sporadyczne i UC-CRC31. Częstość występowania CRC u pacjentów z chorobami zapalnymi jelit, takimi jak WZJG, jest znacznie wyższa niż w populacji ogólnej. WZJG stymuluje rozwój CRC poprzez szlak zapalno-nowotworowy, który różni się od typowego szlaku gruczolak-gruczolakorak

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez Departament Nauki i Technologii Prowincji Jilin (YDZJ202201ZYTS181).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
AzoksymetanSigmaA5486
Kwas 5-aminosalicylowyKuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd3819413
myszy C57BL/6JLiaoning Changsheng Biotechnology Co., LtdNO 210726210100853716
Szkiełko nakrywkoweJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd10212432C
Kolor DAB zestaw rozwojowy Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd2005289
Maszyna do odwadniania Wuhan Junjie Electronics Co., LtdJJ-12J
Siarczan dekstranu soduDalian Meilun Biotechnology Co., LtdMB5535
Maszyna do zatapianiaWuhan Junjie Electronics Co., LtdJB-P5
Barwnik hematoksylino-eozynowyWuhan Hundred Degree Biotechnology Co., LtdB1000
IL-6Jiangsu Meimian Industrial Co., LtdMM-0163M2
IsofluraneRWD Life Science Co., LtdR510-22-10
KI67Google Biotechnology IncGB121141
Neutralna gumaWuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd10004160
Slajd obiektowyJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd10212432A Przeciwciało
pierwotne okludynyAffnityDF7504
Ortostatyczny mikroskop optycznyNikonNikon Eclipse CI
Patologiczny mikrotomShanghai Leica Instrument Co., LtdRM2016
Przeciwciało pierwotne ZO-1Abcamab221547
przeciwciało pierwotne

Bibliografia

  1. Sung, H., et al. Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 Cancers in 185 Countries. CA Cancer J Clin. 71 (3), 209-249 (2021).
  2. Tsai, K. Y., et al. Novel heavily fucosylated glycans as a promising therapeutic target in colorectal cancer. J Transl Med. 21 (1), 505(2023).
  3. Chen, X., et al. Smoking, genetic predisposition, and colorectal cancer risk. Clin Transl Gastroenterol. 12 (3), e00317(2021).
  4. Keum, N., Giovannucci, E. Global burden of colorectal cancer: emerging trends, risk factors and prevention strategies. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 16 (12), 713-732 (2019).
  5. Sninsky, J. A., Shore, B. M., Lupu, G. V., Crockett, S. D. Risk factors for colorectal polyps and cancer. Gastrointest Endosc Clin N Am. 32 (2), 195-213 (2022).
  6. Rivera, A. P., et al. Ulcerative colitis-induced colorectal carcinoma: A deleterious concatenation. Cureus. 14 (2), e22636(2022).
  7. Faye, A. S., Holmer, A. K., Axelrad, J. E. Cancer in inflammatory bowel disease. Gastroenterol Clin North Am. 51 (3), 649-666 (2022).
  8. Becker, W. R., et al. Single-cell analyses define a continuum of cell state and composition changes in the malignant transformation of polyps to colorectal cancer. Nat Genet. 54 (7), 985-995 (2022).
  9. Choi, J. K., Kim, D. W., Shin, S. Y., Park, E. C., Kang, J. G. Effect of ulcerative colitis on incidence of colorectal cancer: Results from the nationwide population-based cohort study (2003-2013). J Cancer. 7 (6), 681-686 (2016).
  10. Gallo, G., Kotze, P. G., Spinelli, A. Surgery in ulcerative colitis: When? How. Best Pract Res Clin Gastroenterol. 32-33, 71-78 (2018).
  11. Shah, S. C., Itzkowitz, S. H. Colorectal cancer in inflammatory bowel disease: Mechanisms and management. Gastroenterology. 162 (3), 715.e3-730.e3 (2022).
  12. Fabregas, J. C., Ramnaraign, B., George, T. J. Clinical updates for colon cancer care in 2022. Clin Colorectal Cancer. 21 (3), 198-203 (2022).
  13. Hu, J., et al. Pharmacological and molecular analysis of the effects of Huangqi Jianzhong decoction on proliferation and apoptosis in GES-1 cells infected with H. pylori.Front Pharmacol. 13, 1009705(2022).
  14. Shang, L., et al. Mechanism of Sijunzi decoction in the treatment of colorectal cancer based on network pharmacology and experimental validation. J Ethnopharmacol. 302 (Pt A), 115876(2023).
  15. Zhang, X. Y., et al. Sishen pill maintained colonic mucosal barrier integrity to treat ulcerative colitis via Rho/ROCK signaling pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5536679(2021).
  16. Wu, X., Dai, Y., Nie, K. Research progress of Liujunzi decoction in the treatment of tumor-associated anorexia. Drug Des Devel Ther. 16, 1731-1741 (2022).
  17. Han, Y., et al. Liujunzi decoction exerts potent antitumor activity in oesophageal squamous cell carcinoma by inhibiting miR-34a/STAT3/IL-6R feedback loop and modifies antitumor immunity. Phytomedicine. 111, 154672(2023).
  18. Chen, D., Zhao, J., Cong, W. Chinese herbal medicines facilitate the control of chemotherapy-induced side effects in colorectal cancer: Progress and perspective. Front Pharmacol. 9, 1442(2018).
  19. Wang, M., Wang, S., Su, Q., Ma, T. Effect of combining early chemotherapy with Zhipu Liujunzi decoction under the concept of strengthening and consolidating body resistance for gastric cancer patients and nursing strategy. Contrast Media Mol Imaging. 2021, 2135924(2021).
  20. Lin, Y., Koumba, M. H., Qu, S., Wang, D., Lin, L. Blocking NFATc3 ameliorates azoxymethane/dextran sulfate sodium induced colitis-associated colorectal cancer in mice via the inhibition of inflammatory responses and epithelial-mesenchymal transition. Cell Signal. 74, 109707(2020).
  21. Yu, C. T., et al. Identification of significant modules and targets of Xian-Lian-Jie-Du decoction based on the analysis of transcriptomics, proteomics and single-cell transcriptomics in colorectal tumor. J Inflamm Res. 15, 1483-1499 (2022).
  22. Lin, L., Wang, D., Qu, S., Zhao, H., Lin, Y. miR-370-3p alleviates ulcerative colitis-related colorectal cancer in mice through inhibiting the inflammatory response and epithelial-mesenchymal transition. Drug Des Devel Ther. 14, 1127-1141 (2020).
  23. Qiu, X., Ma, J., Wang, K., Zhang, H. Chemopreventive effects of 5-aminosalicylic acid on inflammatory bowel disease-associated colorectal cancer and dysplasia: a systematic review with meta-analysis. Oncotarget. 8 (1), 1031-1045 (2017).
  24. Hou, Y., et al. Longzhibu disease and its therapeutic effects by traditional Tibetan medicine: Ershi-wei Chenxiang pills. J Ethnopharmacol. 249, 112426(2020).
  25. Xie, N., et al. Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-κB/NLRP3-mediated inflammation. Phytomedicine. 103, 154240(2022).
  26. Gok, A., et al. Role of reduced Bdnf expression in novel Apc mutant allele-induced intestinal and colonic tumorigenesis in mice. In Vivo. 37 (4), 1562-1575 (2023).
  27. Lin, Y., et al. Pou3f1 mediates the effect of Nfatc3 on ulcerative colitis-associated colorectal cancer by regulating inflammation. Cell Mol Biol Lett. 27 (1), 75(2022).
  28. Xu, W., Zhao, R., Yuan, B. The therapeutic effect of traditional LiuJunZi decoction on ovalbumin-induced asthma in Balb/C mice. Can Respir J. 2021, 6406295(2021).
  29. Kaihara, T., et al. Redifferentiation and ZO-1 reexpression in liver-metastasized colorectal cancer: possible association with epidermal growth factor receptor-induced tyrosine phosphorylation of ZO-1. Cancer Sci. 94 (2), 166-172 (2003).
  30. Lei, H. T., et al. Ki67 testing in the clinical management of patients with non-metastatic colorectal cancer: Detecting the optimal cut-off value based on the restricted cubic spline model. Oncol Lett. 24 (6), 420(2022).
  31. Olén, O., et al. Colorectal cancer in ulcerative colitis: a Scandinavian population-based cohort study. Lancet. 395 (10218), 123-131 (2020).
  32. Arnold, M., et al. Global patterns and trends in colorectal cancer incidence and mortality. Gut. 66 (4), 683-691 (2017).
  33. Biller, L. H., Schrag, D. Diagnosis and treatment of metastatic colorectal cancer: A review. Jama. 325 (7), 669-685 (2021).
  34. Talero, E., et al. Expression patterns of sirtuin 1-AMPK-autophagy pathway in chronic colitis and inflammation-associated colon neoplasia in IL-10-deficient mice. Int Immunopharmacol. 35, 248-256 (2016).
  35. Qian, Z., et al. Mulberry fruit prevents LPS-induced NF-κB/pERK/MAPK signals in macrophages and suppresses acute colitis and colorectal tumorigenesis in mice. Sci Rep. 5, 17348(2015).
  36. Pothuraju, R., et al. Depletion of transmembrane mucin 4 (Muc4) alters intestinal homeostasis in a genetically engineered mouse model of colorectal cancer. Aging. 14 (5), 2025-2046 (2022).
  37. Perše, M., Cerar, A. Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. J Biomed Biotechnol. 2012, 718617(2012).
  38. Zeng, B., et al. Dextran sodium sulfate potentiates NLRP3 inflammasome activation by modulating the KCa3.1 potassium channel in a mouse model of colitis. Cell Mol Immunol. 19 (8), 925-943 (2022).
  39. Parang, B., Barrett, C. W., Williams, C. S. AOM/DSS model of colitis-associated cancer. Methods Mol Biol. 1422, 297-307 (2016).
  40. Tanaka, T., et al. A novel inflammation-related mouse colon carcinogenesis model induced by azoxymethane and dextran sodium sulfate. Cancer Sci. 94 (11), 965-973 (2003).
  41. Suzuki, R., Kohno, H., Sugie, S., Nakagama, H., Tanaka, T. Strain differences in the susceptibility to azoxymethane and dextran sodium sulfate-induced colon carcinogenesis in mice. Carcinogenesis. 27 (1), 162-169 (2006).
  42. De Robertis, M., et al. The AOM/DSS murine model for the study of colon carcinogenesis: From pathways to diagnosis and therapy studies. J Carcinog. 10, 9(2011).
  43. Song, J. L., et al. Dietary mixed cereal grains ameliorate the azoxymethane and dextran sodium sulfate-induced colonic carcinogenesis in C57BL/6J mice. J Med Food. 23 (4), 440-452 (2020).
  44. Zou, Y. F., et al. Effects of Huaier extract on ameliorating colitis-associated colorectal tumorigenesis in mice. Onco Targets Ther. 13, 8691-8704 (2020).
  45. Luo, X., et al. Obacunone reduces inflammatory signalling and tumour occurrence in mice with chronic inflammation-induced colorectal cancer. Pharm Biol. 58 (1), 886-897 (2020).
  46. Dai, Y., et al. Liujunzi Decoction ameliorated cisplatin-induced anorexia by inhibiting theJAK-STAT signaling pathway and coordinating anorexigenic and orexigenic neuropeptides in rats. J Ethnopharmacol. 285, 114840(2022).
  47. Ghosh, D., Dutta, A., Kashyap, A., Upmanyu, N., Datta, S. PLP2 drives collective cell migration via ZO-1-mediated cytoskeletal remodeling at the leading edge in human colorectal cancer cells. J Cell Sci. 134 (18), jcs253468(2021).
  48. Yan, S., et al. Berberine regulates short-chain fatty acid metabolism and alleviates the colitis-associated colorectal tumorigenesis through remodeling intestinal flora. Phytomedicine. 102, 154217(2022).
  49. Ma, Y. L., et al. Immunohistochemical analysis revealed CD34 and Ki67 protein expression as significant prognostic factors in colorectal cancer. Med Oncol. 27 (2), 304-309 (2010).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Model mysi UC CRCodwar Liujunzitradycyjna medycyna chi skarak jelita grubegomodel azoksymetanu i DSSocena terapeutycznakwas 5 aminosalicylowywska nik aktywno ci chorobyizolacja tkanki jelita grubego
Opracowanie modelu raka jelita grubego u myszy i ocena efektu terapeutycznego medycyny chińskiej
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki Korzystania

Zasady

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.