Ta praca opisuje użycie metody flotacji do identyfikacji Toxocara canis i Ancylostoma spp. wykrytych w próbkach kału pobranych od psów w Meksyku w latach 2017 do 2021 w warunkach polowych.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Prosta metoda flotacji kału do diagnozowania nicieni odzwierzęcych w warunkach polowych i laboratoryjnych
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Diagnoza psich pasożytów o potencjale odzwierzęcym, takich jak Toxocara canis i Ancylostoma caninum w warunkach polowych, jest zwykle trudna ze względu na ograniczony dostęp do laboratorium na obszarach wiejskich i podmiejskich w Meksyku. Badanie to miało na celu wykrycie T. canis i Ancylostoma spp. w próbkach kału pobranych od psów w Meksyku w latach 2017-2021 w warunkach polowych. Obliczenie wielkości próby dało docelową rekrutację 534 psów w całym kraju.
Próbki zostały pobrane bezpośrednio z odbytnicy lub ziemi po defekacji. Próbki przechowywano w pojedynczych, szczelnie zamkniętych workach foliowych w temperaturze 4 °C. Nasycony roztwór chlorku sodu (ciężar właściwy [SpG] 1,20) przygotowano zarówno w warunkach polowych, jak i laboratoryjnych. W ciągu 3 dni od pobrania 2-4 g kału przebadano pod kątem pasożytów metodą flotacji poprzez zawieszenie każdej próbki kału w roztworze soli. Kał mieszano z roztworem flotacyjnym i rozdrabniano metalową łyżką.
Po osiągnięciu jednolitej konsystencji, próbka kału została przelana do nowego plastikowego kubka za pomocą sita i pozostawiona na 10-15 minut. Trzy krople z wierzchu mieszaniny zebrano za pomocą wysterylizowanej pętli zaszczepiającej. Preparaty umieszczono pod mikroskopem, a pasożyty zostały zidentyfikowane przez przeszkolonych parazytologów. Próbki kału od 1055 psów poddano badaniom przesiewowym pod mikroskopem. Liczba próbek dodatnich w kierunku Ancylostoma spp. wyniosła 833 (częstość 78,95%) i 222 (21,04%) w kierunku T. canis. Odkrycia te ilustrują znaczenie identyfikacji odzwierzęcych robaków pasożytniczych u psów żyjących na obszarach miejskich i wiejskich w Meksyku przy użyciu techniki koproparazytoskopowej w laboratorium i w warunkach polowych.
Wprowadzenie
Pasożyty przewodu pokarmowego są jednym z najczęstszych problemów zdrowotnych dotykających psy1. Szacunki sugerują, że na całym świecie jest ~700 milionów psów domowych, a około 175 milionów można sklasyfikować jako wolno żyjące2. Ponad 60 gatunków pasożytów jest wspólnych dla psów i ludzi, co sugeruje, że psy mogą być źródłem infekcji dla ludzi tymi pasożytami3. Toxocara canis i Ancylostoma caninum to dwa gatunki pasożytnicze, które zarażają psy i przypadkowo ludzi. Obecnie istnieje kilka badań dotyczących miejsc, w których te robaki są w stanie przetrwać i rozmnażać się w Meksy....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Użytkowanie i opieka nad psami została zatwierdzona przez Narodowy i Autonomiczny Uniwersytet Meksyku.
1. Pobieranie próbek kału
UWAGA: Zajmij się psem z pomocą weterynarza lub właściciela zwierzęcia.
- W przypadku zdziczałych psów (Rysunek 1A) lub zwierząt nerwowych, próbki należy pobrać z ziemi zaraz po wypróżnieniu lub nie później niż 10 minut później.
- Nasmaruj rękawice chirurgiczne lub cienkościenne worki polietylenowe wodą lub wazeliną. Aby pobrać próbki kału z odbytnicy, noś rękawice chirurgiczne lub cienkościenne worki polietylenowe. <....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
W niniejszej pracy opisano procedury pobierania próbek oraz badania koproparazytologiczne służące do identyfikacji T. canis oraz Ancylostoma spp. Uzasadnieniem dla adaptacji prostej metody flotacji kału w celu wykrycia jaj helmintów psów jest fakt, że technika ta jest efektywna kosztowo, ponieważ stosowane roztwory, sprzęt i materiały są tanie. Dzięki temu metoda ta pozwala na przetwarzanie dużej liczby próbek, gdyż wiele z nich można opracować w krótkim czasie. Co więcej, prosta metoda flotacji kału je.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Nicienie, takie jak T. canis i Ancylostoma spp., mogą zamieszkiwać jelito cienkie psów i mogą być przenoszone na ludzi. Objawy kliniczne wywołane przez T. canis są poważne u młodych psów, objawiając się słabym wzrostem, problemami z oddychaniem lub zmianami w przewodzie pokarmowym28. U dorosłych psów infekcja zazwyczaj ma przebieg łagodny. Diagnoza polega na zidentyfikowaniu charakterystycznych jaj w próbce kału. Ten stan jest częstą przyczyną przepisywania psom leczenia.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.
Podziękowania
Autorzy są wdzięczni Dirección General de Asuntos del Personal Académico z Universidad Nacional Autónoma de México za udostępnienie środków finansowych poprzez grant PAPIIT IN218720 oraz dr Claudii Mendozie za udzielenie wnioskowanego przedłużenia. Ta praca jest dedykowana mojej kochanej Nicole, która zmarła w 2019 roku. Zawsze będziesz żył w moim sercu.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 3 akumulatory 1,2 V AA | Energizer | Sprzedawane w sklepach detalicznych | |
| Palnik Bunsena | Viresa | FER-M224 | |
| Jednorazowy szklany kubek o pojemności 12 uncji | Uline | Mexico S-22275 | Sprzedawane w sklepach detalicznych |
| Szkiełka szklane | Velab, Meksyk | VEP-P20 | |
| Pętla inokulacyjna | VelaQuin, Meksyk | CRM-5010PH | |
| Mikroskop świetlny | VelaQuin, Meksyk | VE-B2 | |
| Zapalniczka | Bic | J25 | Sprzedawane w sklepach detalicznych |
| Jeden plastikowy kubek (12 uncji) | Amazon | ASIN B08C2CRHSH | Może to być dowolny plastikowy kubek kuchenny wielokrotnego użytku |
| Plastikowe kubki (wielkość kubka na kostkę do gry lub próbkę moczu) średnica 5,5 cm i wysokość 8,5 cm, dwie filiżanki | Amazon | Layhit-Containers-ZYHD192919 | Może to być dowolny plastikowy kubek kuchenny wielokrotnego użytku |
| Plastikowe sitko 10 cm | Ecko | ASIN B00TUAAVWI | Może to być dowolne plastikowe sitko kuchenne |
| Butelka sodowa | Coca-Cola | 1-litr | Sprzedawane w sklepach detalicznych |
| Łyżka | Amazon Basics | ASIN B00TUAAVWI | Może być dowolny łyżka kuchenna |
| Sól kuchenna | La Fina Sprzedawane | w sklepach detalicznych |
Bibliografia
- Duncan, K. T., Koons, N. R., Litherland, M. A., Little, S. E., Nagamori, Y. Prevalence of intestinal parasites in fecal samples and estimation of parasite contamination from dog parks in central Oklahoma. Veterinary Parasitology Regional Studies and Reports. 19, 100362(2020).
- Kisiel, L. M., et al.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
