Tutaj prezentujemy protokół oparty na komputerowym systemie wizyjnym (CVS) do określenia zachowania podczas topnienia wielofazowych systemów żywnościowych.
Artykuł metodologiczny
Tutaj prezentujemy protokół oparty na komputerowym systemie wizyjnym (CVS) do określenia zachowania podczas topnienia wielofazowych systemów żywnościowych.
Lody to wielofazowy system, w którym fazy ciekłe, stałe i gazowe są ściśle połączone. Ciągła faza ciekła otacza pęcherzyki powietrza i kryształki lodu i zawiera częściowo skrystalizowane tłuszcze, białka koloidalne, sole, cukry (ostatecznie skrystalizowane) i stabilizatory. Skład lodów różni się w zależności od wymagań lokalnego rynku i ewentualnych przepisów. Chociaż technologia przetwarzania wpływa na charakterystykę końcowych lodów, każdy składnik odgrywa ważną rolę w definiowaniu jakości produktu1. Topnienie jest jednym z najważniejszych wskaźników jakościowych lodów, biorąc pod uwagę zjawiska zachodzące zarówno podczas spożycia, jak i w jamie ustnej. Wraz z przenikaniem ciepła do lodów, kryształki lodu topią się, a woda dyfunduje i miesza się z fazą surowicy, która może przepłynąć przez pozostałą strukturę2. Produkt szybkotopliwy jest niepożądany ze względu na wygodę jedzenia, ale także ze względu na gwarancję wyższej odporności na szok termiczny. Jednak produkty wolno topliwe wskazują również na pewne wady formulacji1. Wiadomo, że mikrostruktura lodów jest odpowiedzialna za właściwości topnienia3, ale do tej pory opublikowano kontrastujące wyniki, z których wynika, że wiedza na temat wpływu czynników mikrostrukturalnych na topnienie jest nadal ograniczona4. W związku z tym konieczne są dalsze badania, aby wyjaśnić mechanizm topnienia, co jest kluczowe również przy projektowaniu nowych formulacji3.
Zachowanie topnienia jest zwykle oceniane metodami grawimetrycznymi i wyrażane w kategoriach czasu rozpoczęcia i szybkości topnienia5. Daną porcję lodów umieszcza się na drucianej siatce w komorze o kontrolowanej temperaturze, a wagę stopionego produktu rejestruje się. Na podstawie krzywej waga-czas można wyróżnić trzy fazy: fazę opóźnienia, podczas której następuje przenikanie ciepła, fazę szybkiego topnienia z fazą rozcieńczonego serum przepływającą przez strukturę lodów z maksymalną szybkością oraz fazę stacjonarną, w której większość produktu wyciekała2.
Za pomocą metody grawimetrycznej można rozpoznać produkty wolno i szybko topiące; jednak aspekt lodów podczas topnienia jest również ważny, ponieważ zachowanie kształtu jest związane z dobrym składem i strukturą produktu6. W ten sposób procedura oparta na komputerowym systemie wizyjnym (CVS) może wspierać już istniejącą metodologię grawitacyjną, umożliwiając badanie wyglądu produktu podczas topienia. CVS-y mogą pobierać liczne atrybuty żywności3 (np. rozmiar, waga, kształt, tekstura i kolor) z dokładnymi szczegółami, których ludzkie oko nie może zaobserwować. Takie systemy są zwykle wykonane z aparatów cyfrowych i oprogramowania do przetwarzania obrazu7. Rzeczywiście, protokół oparty na CVS obejmuje dwa główne etapy: 1) akwizycję obrazu i 2) przetwarzanie obrazu. Można zastosować różne poziomy przetwarzania obrazu7, od najprostszych do bardziej złożonych, takich jak metody głębokiego uczenia do rozwoju sztucznej inteligencji8,9. W ostatnim czasie dużą uwagę poświęcono CVS w sektorze spożywczym i opracowano dużą liczbę aplikacji do kontroli bezpieczeństwa żywności, monitorowania przetwarzania żywności, wykrywania ciał obcych i innych dziedzin. Są szybkie, wydajne i nieniszczące, a tym samym stanowią ważne narzędzia do dostarczania konsumentom bezpiecznej żywności wysokiej jakości10.
W dziedzinie lodów zaproponowano metodę analizy obrazu do badania rekrystalizacji lodu za pomocą mikroskopii optycznej11. Niedawno obrazy rentgenowskiej tomografii komputerowej zostały przetworzone w celu analizy mikrostruktury 3D ciał miękkoporowatych, w tym lodów3. Jednak opracowanie prostych cyfrowych obrazów z czujnikiem CCD (Charge Coupled Device) może przynieść kilka korzyści pod względem łatwości pozyskiwania i renderowania aspektu lodów postrzeganego przez konsumentów. Niektórzy autorzy pokazują obrazy lodów podczas topnienia12, ale zgodnie z naszą najlepszą wiedzą, ekstrakcja wskaźników numerycznych z obrazów została po raz pierwszy zgłoszona przez Moriano i Alamprese13.
Dlatego proponowany tutaj protokół, oparty na pracy Moriano i Alamprese13, ilustruje prosty CVS, który może być zastosowany do wsparcia już istniejącej metodologii grawitacyjnej do badania zachowania topnienia lodów. Schemat blokowy proponowanej metody jest zilustrowany na Rysunek 1. Zastosowanie takiego systemu pozwala na obliczenie dwóch wskaźników topnienia związanych z zachowaniem kształtu i szybkością topnienia. W szczególności w artykule po raz pierwszy opisano szczegółową konfigurację eksperymentalną i procedurę pozyskiwania obrazów cyfrowych podczas topnienia lodów oraz etapy przetwarzania obrazu. Poza tym wyniki uzyskane z lodów wyprodukowanych z różnymi substancjami słodzącymi (tj. sacharozą, sacharozą, sachuramaltem i erytrytolem) wskazują na potencjał tej metody.

Rysunek 1: Schemat blokowy proponowanych metodologii. Podsumowanie ogólnych kroków dla proponowanego Komputerowego Systemu Wizyjnego i metody grawimetrycznej do badania zachowania topnienia lodów. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
1. Konfiguracja doświadczalna i procedury prób topienia

Rysunek 2: Konfiguracja testu topnienia. Rysunek pokazuje, jak skonfigurować próbę topnienia w szafie termostatycznej: Umieść szklany cylinder z podziałką na wadze cyfrowej, aby zebrać i zważyć stopione lody. Próbkę lodów umieszcza się na metalowym siatku drucianym na lejku zawieszonym nad cylindrem. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
2. Przetwarzanie obrazu do obliczania wskaźników topnienia
(1)
(2)
(3)>Rysunek uzupełniający 1: Kalibracja przestrzenna obrazu. (A) Przejdź do okna Pomiar > Kalibracja > Przestrzenny oprogramowania do analizy obrazu. Wybierz pozycję Nowy, a następnie oznacz pozycję Obraz, aby otworzyć okno Skalowanie. Wskazana jest długość referencyjna w jednostce do konwersji pikseli (np. milimetrów). (B) Ostrożnie nałóż zielony pasek na część referencyjną odpowiadającą wskazanej długości i kliknij OK. Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik.
Rysunek uzupełniający 2: Przycinanie AOI i przekształcanie go w skalę szarości. (A) Konwersja obszaru zainteresowania (AOI) na skalę szarości i (B) wynikowy obraz. Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik.
Rysunek uzupełniający 3: Wybór parametrów do pomiaru. W oknie Wybierz pomiar można wybrać parametry, które mają być mierzone; Do oceny topnienia lodów należy wybrać obszar, szerokość pudełka i wysokość pudełka. Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik.
Rysunek uzupełniający 4: Segmentacja próbki lodów. W oknie "Segmentacja" można wybrać zakresy histogramu, które mają być brane pod uwagę, aby pokrywały dokładnie obszar kształtu lodów. Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik.
Rysunek uzupełniający 5: Filtrowanie obiektów i funkcja Count. Czerwone linie podświetlają rozpoznane jasne obiekty. Stosując funkcję zliczania i otwierając okno "Widok, Dane pomiarowe", zostaną wyświetlone wyniki wybranych parametrów (A). Aby filtrować tylko kształt lodów, można wybrać minimalny i maksymalny zakres obszaru w oknie "Wybierz pomiar", zliczając w ten sposób tylko parametry jednego obiektu (B). Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik.
Rysunek uzupełniający 6: Wskaźnik zachowania kształtu (R). Pokazana jest wysokość ramki (wys.t, czerwona linia przerywana) i szerokość ramki (szer.t, linia ciągła) używane do obliczania wskaźnika zachowania kształtu (R). Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik.

Rysunek 3: Krzywe zachowania kształtu i obszaru. Przykład krzywych zatrzymywania powierzchni lodów (A) i (B), w których wykreśla się średnie wartości Rt/R0 i At/A0 w czasie; Słupki błędów odpowiadają wartościom odchylenia standardowego uzyskanym w wyniku powtórzeń analizy. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
3. Opracowanie danych grawimetrycznych
(4)
(5)
Rysunek 4: Krzywa grawimetryczna. Przykład krzywej topnienia lodów otrzymanej metodą grawimetryczną. Oryginalna krzywa jest pokazana na czerwono; Wybrane serie danych w części liniowej są pokazane na zielono; Obliczona linia regresji jest pokazana w czarnych kropkach. Pokazane jest również równanie i współczynnik determinacji (R2) linii regresji. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
UWAGA: Aby uzyskać wiarygodne wyniki do analizy statystycznej, powtórz całą procedurę próby topnienia i przetwarzania obrazu co najmniej trzy razy dla każdej próbki.
Jako przykład proponowanych wyników CVS, pokazane są wyniki analiz topnienia dla trzech różnych receptur lodów, porównane z danymi uzyskanymi metodą grawimetryczną. W szczególności badano topnienie lodów wykonanych z różnymi substancjami słodzącymi (tj. sacharozą, sucromaltem i erytrytolem).
Tabela 1 i Rysunek 5A pokazuje wyniki wskaźnika zachowania kształtu (Rt/R0) dla trzech próbek lodów podczas topnienia. Podobne zachowanie kształtu zaobserwowano dla wszystkich próbek do 45 minut; następnie próbka wykonana z sacharozy traciła swój kształt szybciej niż inne produkty, co skutkowało znacznie niższym Rt / R0 zgodnie z jednokierunkową analizą wariancji (ANOVA), a następnie testem najmniejszej znaczącej różnicy (LSD) (p < 0,05). Tylko próbka zawierająca erytrytol zachowała swój kształt do końca badania, dając mierzalne wartości R, t/R0.
pkt. pkt. pkt. pkt. pkt. Rozdział pkt. pkt. pkt. Rozdział pkt. pkt. pkt. Rozdział pkt. pkt.| SACHAROZA | SUCROMALT | ERYTRYTOL | ||||
| Czas (min) | At/A0 | s.d. | At/A0 | s.d. | At/A0 | s.d. |
| 0 | godz. 1.00 | - | godz. 1.00 | - | godz. 1.00 | - |
| 15 | 0,91a | 0,01 | 0,93a | 0,02 | 0,92a | 0,04 |
| Rozdział 30 | 0,76a | 0,04 | 0,82a | 0,02 | 0,84a | 0,04 |
| Rozdział 45 | 0,56a | 0,04 | 0,66ab | 0,02 | 0,74mld | 0,03 |
| 60 | 0,32a | 0,01 | 0,46mld | 0,02 | 0,62stopnia Celsjusza | 0,01 |
| 75 | 0,13a | 0,01 | 0,24mld | 0,02 | 0,52stopnia Celsjusza | 0,02 |
| 90 | b.d. | - | b.d. | - | 0,40 | 0,01 |
| b.d., niewykrywalne | ||||||
Tabela 1: Średnie i wartości odchylenia standardowego wskaźników zachowania kształtu dla trzech próbek lodów wyprodukowanych z różnymi substancjami słodzącymi. Różne małe litery w tym samym wierszu oznaczają znacznie różne wartości średnie (p < 0,05).

Rysunek 5: Krzywe zachowania kształtu i obszaru dla trzech próbek lodów wyprodukowanych z różnymi substancjami słodzącymi. (A) Kształt i (B) krzywe zachowania powierzchni. Różowa linia reprezentuje próbkę sacharozy, traktowaną jako odniesienie; Żółta linia reprezentuje próbkę sucromaltu, a niebieska linia reprezentuje próbkę erytrytolu. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Próbka z erytrytolem również wykazała niższy wskaźnik topnienia, o czym świadczą wskaźniki topnienia At/A0 (Tabela 2 i Rysunek 5B). Po 45 minutach próbka erytrytolu wykazywała istotnie (p < 0,05) najwyższą retencję powierzchniową, a następnie lody zawierające odpowiednio sachakromalt i sacharozę.
pkt. pkt. pkt. pkt. pkt. pkt. pkt. Rozdział pkt. pkt. Rozdział pkt. pkt. pkt. Rozdział pkt.| SACHAROZA | SUCROMALT | ERYTRYTOL | ||||
| Czas (min) | Rt/R0 | s.d. | Rt/R0 | s.d. | Rt/R0 | s.d. |
| 0 | godz. 1.00 | - | godz. 1.00 | - | godz. 1.00 | - |
| 15 | 0,98a | 0,04 | 0,97a | 0,01 | 0,93a | 0,02 |
| Rozdział 30 | 0,94a | 0,05 | 0,94a | 0,02 | 0,89a | 0,02 |
| Rozdział 45 | 0,80a | 0,03 | 0,89a | 0,02 | 0,84a | 0,02 |
| 60 | 0,64a | 0,04 | 0,78mld | 0,01 | 0,76mld | 0,03 |
| 75 | 0,54a | 0,03 | 0,65a | 0,01 | 0,60a | 0,07 |
| 90 | b.d. | - | b.d. | - | 0,45 | 0,06 |
| b.d., niewykrywalne | ||||||
Tabela 2: Średnie i wartości odchylenia standardowego wskaźników retencji powierzchni dla trzech próbek lodów wyprodukowanych z różnymi substancjami słodzącymi. Różne małe litery w tym samym wierszu oznaczają znacznie różne wartości średnie (p < 0,05).
Wyniki zostały również potwierdzone przez analizę grawimetryczną, której dane są podane w Tabeli 3 pod względem czasu rozpoczęcia topnienia (tS) i szybkości topnienia (gramy/minutę). Jednak w tym przypadku nie stwierdzono istotnych różnic przy zastosowaniu ANOVA (p > 0,05).
pkt. pkt.| SACHAROZA | SUCROMALT | ERYTRYTOL | ||||
| znaczyć | s.d. | znaczyć | s.d. | znaczyć | s.d. | |
| ts (min) | 15,3a | 1.4 | 16,4a | 1.4 | 17,2a | 2.6 |
| Szybkość topnienia (g/min) | 2,67a | 0,26 | 2,29a | 0,09 | 1,96a | 0,41 |
Tabela 3: Średnie i wartości odchylenia standardowego wskaźników topnienia obliczone metodami grawimetrycznymi dla trzech próbek lodów wyprodukowanych z różnymi substancjami słodzącymi. ts, czas rozpoczęcia topnienia. Różne małe litery w tym samym wierszu oznaczają znacznie różne wartości średnie (p < 0,05).
Rysunek 6 pokazuje niektóre przetworzone (krok 2.1) zdjęcia uzyskane podczas prób topnienia (krok 1.3) trzech próbek lodów; można zauważyć dobre zachowanie kształtu wszystkich próbek i najniższą szybkość topnienia lodów wykonanych z erytrytolu, które nie zostały całkowicie stopione po 90 minutach.

Rysunek 6: Stopienie trzech próbek lodów. Zdjęcia robione co 15 minut podczas topnienia trzech próbek lodów wyprodukowanych z różnymi substancjami słodzącymi. Przetworzono obrazy trzech próbek lodów podczas topienia. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Proponowany CVS umożliwia obliczanie wskaźników retencji kształtu i powierzchni próbek lodów podczas topienia, a także wizualizację procesu topienia. Można go połączyć z tradycyjną metodą grawimetryczną stosowaną do oceny topnienia lodów5, w celu uzyskania wyników związanych z aspektem lodów. Jest to bardzo ważne, ponieważ konsumenci oceniają ich jakość również na podstawie wyglądu wizualnego produktu, a zdolność do zachowania kształtu podczas topienia jest związana ze składem i strukturą lodów 1,3. Zastosowanie tego systemu w przemyśle spożywczym może usprawnić kontrolę jakości, a także badania i rozwój nowych formulacji.
Przykład wyników uzyskanych dla stopienia trzech próbek lodów, różniących się pod względem użytych substancji słodzących, wykazał, że proponowany CVS jest wrażliwy na różne składy (tabela 1 i tabela 2), nawet bardziej niż metoda grawimetryczna, która nie była w stanie uwidocznić istotnych różnic między próbkami (tabela 3). Wrażliwość wskaźnika zachowania kształtu na formulację lodów została również wykazana w naszych poprzednich pracach 13,14,15,16. Ze względu na wysoką czułość proponowanej metody może ona nawet zastąpić procedurę grawimetryczną.
Oprócz przygotowania próbki lodów, najbardziej krytyczne etapy opracowywanego CVS są związane z dobrym przechwytywaniem obrazu i segmentacją7. Odniesienie danych Rt i At do wartości początkowych obliczonych w czasie 0 zapobiega ewentualnym wprowadzającym w błąd wynikom wynikającym z różnych eksperymentów przeprowadzonych wśród powtórzeń. Jednak błędy paralaksy podczas akwizycji obrazu mogą skutkować przeszacowaniem powierzchni próbki podczas topienia, zwłaszcza jeśli obrazy zebrane w jednej próbie nie są spójne z powodu zmiany położenia kamery z jednej akwizycji na drugą. W związku z tym należy zwrócić dużą uwagę na ustawienie procedury akwizycji obrazu, upewnienie się, że metalowy ekran z siatki drucianej z próbką na górze jest idealnie wyrównany z obiektywem kamery oraz staranne zdefiniowanie i zabezpieczenie pozycji kamery przed szafą termostatyczną. Podobnie, zła segmentacja obrazu może prowadzić do przeszacowania lub niedoszacowania powierzchni lodów, ale także H i W, co skutkuje bezsensownymi wskaźnikami zachowania kształtu. W tym przypadku większym źródłem błędu są ewentualne kolce na krawędzi porcji lodów umieszczonej na drucianej siatce lub pęcherzyki pojawiające się na powierzchni lodów podczas topienia (rysunek 7), które należy usunąć z jasnego kształtu przed pomiarem powierzchni pudełka oraz pudełka W i H. Można to rozwiązać, korzystając z funkcji Split Object w oprogramowaniu do analizy obrazu. Tło o wysokim kontraście jest również przydatne dla lepszej segmentacji obrazu7. Kolor tła należy dobrać na podstawie koloru próbki lodów, a dla lepszego kontrastu pożądane jest wysokie nasycenie kolorów.

Rysunek 7: Możliwe źródła błędów w segmentacji kształtu lodów. Czerwone strzałki wskazują możliwe kolce i bąbelki na kształcie lodów, które mogą prowadzić do błędnego obliczenia powierzchni, wysokości i szerokości. Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tego rysunku.
Jeśli obrazy są dobrze zebrane i przetworzone, CVS jest jeszcze bardziej czuły i precyzyjny niż metodologia grawimetryczna. Rzeczywiście, w pokazanych przykładach współczynniki zmienności dla analiz grawimetrycznych wahały się od 4% do 20%, co sprawia, że wszystkie średnie dane nie różnią się znacząco (ANOVA, p > 0,05). Wręcz przeciwnie, dla wskaźników CVS wartości współczynnika zmienności wahały się od 0,1% do 13%, co ujawniło istotne różnice między trzema próbkami lodów podczas topnienia (tab. 1 i tabela 2). Zmniejszenie szybkości topnienia spowodowane przez erytrytol jest prawdopodobnie związane z tworzeniem się amorficznych kryształków cukru podczas zamrażania lodów oraz niższą rozpuszczalnością tego słodzika w porównaniu z sacharozą i sacharoltem, co odpowiada za większą ilość zamrożonej wody w produkcie końcowym13. Inne udane zastosowania CVS zaproponowane tutaj można znaleźć w naszych poprzednich badaniach 13,14,15,16.
Gdy zostanie osiągnięta dobra standaryzacja procedury przetwarzania obrazu, można ustawić automatyczne przetwarzanie obrazu za pomocą funkcji Macro-Recording w oprogramowaniu do analizy obrazu, co znacznie przyspiesza proces opracowywania. Oczywiście zawsze potrzebna jest dokładna korekta danych przez operatora, aby uniknąć artefaktów i błędnych danych. Ponadto można opracować krzywe zachowania kształtu i powierzchni w celu obliczenia parametrów kinetyki i zastąpienia metody grawimetrycznej.
Protokół może być również stosowany do innych produktów spożywczych, dla których ważna jest szybkość topnienia i wskaźnik zachowania kształtu, takich jak musy i pianki (np. bite mleko, śmietana i białko jaja). Najważniejszą kwestią jest samodzielność produktów, natomiast temperatura podczas prób topienia może być dostosowana do konkretnego produktu.
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Gabinet | Cavallo s.r.l. | FTX700 | Miejsce próby topnienia |
| Aparat cyfrowy | Sony Group Corp | DSC-S650 | |
| Waga cyfrowa | Gibertini Elettronica | EU-C 4002 LCD | |
| ImagePro Plus 7.0 | Media Cybernetics, Inc | N/A | Oprogramowanie do analizy obrazu |
| Microsoft Excel | Microsoft | N/A | Opracowanie danych i grafika |
| Scalecom | Gibertini Elettronica | N/A | Statyw do akwizycji oprogramowania do wagi cyfrowej |
| Manfratto | #055 |
Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE
Poproś o pozwolenie