W tym badaniu prezentujemy protokół do zbadania metody chirurgicznej trąbki Eustachiusza za pomocą podniebienia miękkiego u miniaturowych świń. Procedura chirurgiczna jest prosta, z krótkim czasem operacji, a gojenie się ran jest szybkie; Jest to zatem dobry wybór do zabiegów takich jak rozszerzanie trąbki Eustachiusza balonem.
Artykuł metodologiczny
Endoskopowe poszerzenie balonowe trąbki Eustachiusza za pomocą dostępu do podniebienia miękkiego u miniaturowych świń
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Trąbka Eustachiusza (ET) jest jednym z najbardziej złożonych organów w ludzkim ciele, a jej dysfunkcja może prowadzić do różnych chorób. W ostatnich latach coraz większa liczba naukowców zdecydowała się na prowadzenie badań związanych z istotami pozaziemskimi na dużych zwierzętach doświadczalnych, takich jak miniaturowe świnie lub owce, przynosząc obiecujące wyniki. Zazwyczaj konwencjonalne zabiegi endoskopowe są wykonywane przez nos w przypadku dużych zwierząt doświadczalnych. Jednak ze względu na wydłużoną i wąską jamę nosową u tych zwierząt, operacje przeznosowe są trudne.
Aby rozwiązać ten problem, zbadaliśmy metodę chirurgii ET za pomocą podniebienia miękkiego. Zwierzę umieszczono w pozycji leżącej na wznak. Po intubacji dotchawiczej w znieczuleniu ogólnym użyto otwieracza do ust, aby w pełni odsłonić górne podniebienie. Przeprowadzono miejscową infiltrację rozcieńczonym płynem nadnerczowym w celu znieczulenia tego obszaru. Następnie nożem sierpowatym wykonano podłużne nacięcie podniebienia miękkiego na styku podniebienia miękkiego i twardego. Po hemostazie do jamy nosogardzieli wprowadzono endoskop, co pozwoliło na wizualizację gardła otworu ET na tylnej bocznej ścianie jamy nosowej.
Następnie, wyspecjalizowany popychacz został użyty do włożenia balonu do ET. Balon został napompowany, utrzymywany na poziomie 10 barów przez 2 minuty, a następnie usunięty. Nacięcie w podniebieniu miękkim zostało następnie zszyte, aby zapewnić prawidłowe ustawienie. Podniebienie miękkie dobrze się zagoiło po operacji. To podejście chirurgiczne jest odpowiednie do zabiegów związanych z ET u dużych zwierząt doświadczalnych (np. miniaturowych świń, owiec i psów). Zabieg chirurgiczny jest prosty, trwa krótko, a gojenie się ran jest szybkie. W endoskopii widoczny jest otwór gardłowy ET, dlatego jest to dobry wybór do zabiegów takich jak rozszerzanie ET balonem.
Wprowadzenie
Trąbka Eustachiusza (ET), jeden z najbardziej złożonych organów w ludzkim ciele, jest istotnym elementem ucha środkowego i odgrywa kluczową rolę w utrzymaniu jego funkcji fizjologicznych1. Fizjologiczne funkcje ET są następujące2,3: po pierwsze, równoważy ciśnienie w uchu środkowym. Kiedy w uchu środkowym tworzy się podciśnienie w wyniku wymiany gazowej z błoną śluzową, ET otwiera się z przerwami, aby wyrównać ciśnienie z ciśnieniem atmosferycznym. Jest to niezbędne do utrzymania warunków najniższej impedancji w systemie transmisji dźwięku ucha środkowego, zapewniając najbardziej efektywną transmisję dźwięku do ucha wewnętrznego. Po drugie, ułatwia drenaż śluzu z ucha środkowego do nosogardzieli, zapobiegając gromadzeniu się płynów i rozwojowi wydzielniczego zapalenia ucha środkowego. Po trzecie, pełni rolę ochronną. W normalnych warunkach ET pozostaje zamknięty przez większość czasu, zapobiegając przedostawaniu się wydzielin z nosogardzieli lub patogenów do ucha środkowego. Surfaktant wydzielany przez błonę śluzową ET również hamuje infekcje bakteryjne.
Bluestone i Beery4 uważają, że ET ma również efekt cienkiej szyjki podobny do kolby, który jest również mechanizmem pokazującym ochronne działanie ET. Po czwarte, pełni funkcję ochrony przed dźwiękiem. W stanie zamkniętym ET zapobiega przedostawaniu się dźwięków oddechowych i połykania z dróg oddechowych do ucha środkowego, unikając zakłóceń słuchu. Wymienione powyżej funkcje fizjologiczne są ściśle związane ze złożoną strukturą anatomiczną istot pozaziemskich. Obecnie wiadomo, że całkowita długość ludzkiego ET wynosi około 31-40 mm, przy średniej długości 36 mm. Anatomicznie dzieli się na część kostną, przesmyk i część chrzęstną. U dorosłych ET jest nachylony pod kątem 30-40° w pozycji poziomej i ma kąt około 45° w pozycji strzałkowej. Części kostne i chrzęstne nie tworzą linii prostej, ale mają kąt ~160°. ET służy jako kanał między nosogardzielą a uchem środkowym. Jego struktura obejmuje chrząstkę ET przyczepioną do podstawy czaszki, mięsień tensor veli palatini, mięsień dźwigacza rzepliwego podniebiennego, mięsień salpingogardłowy, gruczoły wokół trąbki Eustachiusza i różne elementy nabłonkowe.
dysfunkcja ET może prowadzić do różnych chorób, takich jak nieprawidłowe otwarcie ET, blokada ET5,6, oraz uszkodzenia spowodowane ciśnieniem ET. Nieprawidłowe otwarcie ET może powodować objawy, takie jak szumy uszne i autofonia. Blokada ET może wpływać na funkcje wentylacji i drenażu ucha środkowego, prowadząc do chorób, takich jak wydzielnicze zapalenie ucha środkowego lub cholesteatoma. Urazy spowodowane ciśnieniem ET mogą powodować zapalenie aerotitis media.
Małe zwierzęta są często wykorzystywane w badaniach nad ET, w tym myszy7,8,9, rats10,11, świnki morskie12,13,14, wiewiórki15,16,17,18, oraz rabbits19,20. Zwierzęta te są opłacalne, szybko się rozmnażają i są łatwe w zarządzaniu. Po wielu latach badań poczyniono znaczne postępy w badaniach nad strukturą istot pozaziemskich, funkcjami fizjologicznymi i modelami patologicznymi z wykorzystaniem tych zwierząt. Oczekuje się, że w przyszłości pozostaną one kluczowym wyborem dla badań nad istotami pozaziemskimi.
Jednak fakt, że ET ma bardzo małą objętość w ciele zwierzęcia i że jest ona jeszcze mniejsza u małych zwierząt doświadczalnych, jest dużą przeszkodą, z którą borykają się badacze. Struktura i niektóre funkcje ET u tych zwierząt są zupełnie inne niż u ludzi, co ogranicza ich zastosowanie w dziedzinie badań nad ET. W ostatnich latach coraz większa liczba naukowców wykorzystuje duże zwierzęta doświadczalne, takie jak miniaturowe świnie lub owce, do badań związanych z klasą ET21,22,23,24,25. Odkryli, że te duże eksperymentalne modele zwierzęce są bardziej odpowiednie do badań nad istotami pozaziemskimi.
Pracy et al.24 odkryli, że ET i struktura ucha środkowego miniaturowych świń są bardzo podobne do ludzkich, z prawie identyczną długością i podobnymi przebiegami. To odkrycie jest zgodne ze wstępnymi wynikami naszej grupy badawczej23. Niektórzy uczeni wykorzystywali również naczelne inne niż ludzie, takie jak monkeys26 i rhesus monkeys27,28,29. Ich trąbki Eustachiusza są anatomicznie, fizjologicznie i genetycznie bliższe ludziom. Nie można jednak zaprzeczyć, że zwierzęta te są drogie, trudne do zdobycia, a w niektórych przypadkach mogą mieć mniejsze rozmiary ciała, co utrudnia zabiegi chirurgiczne. Cechy te przyczyniają się do ograniczonego zastosowania tych zwierząt w badaniach medycznych.
Wykorzystanie dużych zwierząt doświadczalnych do badań nad istotami pozaziemskimi stało się ostatnio gorącym punktem w tej dziedzinie. W przeszłości konwencjonalne endoskopowe podejście przeznosowe było stosowane w badaniach ET, w których trąbka Eustachiusza była odsłaniana po dotarciu do nosogardzieli, a następnie wykonywano niezbędne zabiegi. Proces ten ściśle naśladuje ludzką chirurgię pozaziemską. Jednak cechy anatomiczne jamy nosowej i czaszki u dużych zwierząt różnią się od tych u ludzi. Może to prowadzić do wyzwań, takich jak wydłużony czas trwania operacji, zauważalne uszkodzenia uboczne i zmęczenie chirurga podczas operacji przeznosowej. Kwestie te mogą potencjalnie wpłynąć na badania nad istotami pozaziemskimi. Aby rozwiązać ten problem, nasza grupa badawcza zbadała chirurgię pozaziemską za pomocą podejścia opartego na miękkim podniebieniu i udoskonaliła proces chirurgiczny, który został przedstawiony poniżej.
Protokół
To badanie zostało przeprowadzone zgodnie z wytycznymi dotyczącymi opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych National Institutes of Health i zostało zatwierdzone przez Komitet Etyki Eksperymentów na Zwierzętach Szpitala Ogólnego ChALW.
1. Przygotowanie narzędzi chirurgicznych
- Otwieracz do ust (Rysunek 1)
- Wykonaj urządzenie otwierające z pręta ze stali nierdzewnej o średnicy 2 mm i przyspawaj połączenie.
- Upewnij się, że rama zewnętrzna ma kształt prostokąta o długości 30 cm i szerokości 20 cm. Przyspawaj dwa metalowe pierścienie ze stali nierdzewnej o średnicy 1 cm w środku krótszego boku ramy.
- Połącz dwie równoboczne trójkątne metalowe ramki ze stali nierdzewnej o wysokości 7 cm z metalowymi pierścieniami za pomocą sprężyn o długości ~3 cm. Przełóż górną i dolną szczękę miniaturowej świni przez dwa trójkąty i przymocuj do nich szczęki. Trójkątne metalowe pierścienie, pod działaniem siły sprężyny, oddzielają górną i dolną szczękę miniaturowej świni, odsłaniając obszar operacyjny na podniebieniu miękkim.
- Zwijacz (Rysunek 2)
- Zmodyfikuj zwijacz na podstawie oryginalnego pokazanego w Tabeli materiałów. Dostosuj kąt dwóch krawędzi oryginalnego zwijacza do kąta pokazanego na Rysunek 2, aby ułatwić otwarcie nacięcia.
- Popychacz balonów (Rysunek 3)
- Zmodyfikuj popychacz użyty w tym badaniu na podstawie oryginalnego. Odetnij część górnej części popychacza, utrzymuj ją na wysokości ~3 mm i ustaw koniec pod kątem 140°, aby ułatwić wepchnięcie balonu do trąbki Eustachiusza.
UWAGA: Inne narzędzia chirurgiczne są wymienione w Tabeli materiałów.
- Zmodyfikuj popychacz użyty w tym badaniu na podstawie oryginalnego. Odetnij część górnej części popychacza, utrzymuj ją na wysokości ~3 mm i ustaw koniec pod kątem 140°, aby ułatwić wepchnięcie balonu do trąbki Eustachiusza.
2. Zwierzęta doświadczalne i anestezjologiczne
- Wybrać zdrowe, 10-miesięczne samice świń rasy Bama o wadze 25 kg i pościć je przez 1 dzień przed zabiegiem.
- Tiletaminę i zolazepam należy podawać we wstrzyknięciu domięśniowym w dawce 10-15 mg/kg.
- Ułóż świnię w pozycji leżącej na stole operacyjnym, zaintubuj tchawicę, podłącz świnię do respiratora i utrzymuj znieczulenie izofluranem o natężeniu przepływu 2 l/min. Monitoruj poziom tlenu we krwi (>90%), częstość oddechów (15-20/min) i tętno (60-120 uderzeń/min)30. Sprawdź, czy odruch rogówkowy zniknął, aby potwierdzić skuteczne znieczulenie, i użyj taśmy medycznej, aby utrzymać oczy zamknięte, aby zapobiec wysuszeniu.
3. Zabiegi chirurgiczne (Rysunek 4)
- Użyj otwieracza do ust (Rysunek 1), aby przymocować górną szczękę w dół do dolnej krawędzi otwieracza do ust. Zwiąż język wraz z dolną szczęką, zawieszając go w górę na górnej krawędzi otwieracza do ust. Przymocuj czubek języka sterylną gazą do dolnej szczęki. Całkowicie otwórz pysk świni i odsłoń górne podniebienie do 3 cm za skrzyżowanie podniebienia miękkiego i twardego.
- Jodem należy zdezynfekować jamę ustną i otaczającą ją skórę, zwłaszcza połączenie podniebienia miękkiego i twardego. Umieść sterylną serwetkę i podłącz endoskop 0° o długości 14 cm i średnicy 3 mm do systemu kamer o wysokiej rozdzielczości.
- Pod oświetleniem i wskazówkami endoskopu palcem wskazującym dotrzeć do połączenia podniebienia miękkiego i twardego oraz znaleźć położenie nacięcia w podniebieniu miękkim (1 cm za połączeniem, 2-3 mm do chirurgicznej strony szwu środkowego górnego podniebienia). Użyć 1 ml iniekcji adrenaliny o stężeniu 0,02% do miejscowej infiltracji, pokrywającej całe warstwy naciętego podniebienia miękkiego.
- Za pomocą noża sierpowatego wykonaj pionowe nacięcie w dół w wyżej wymienionym miejscu. Poczucie przełomu wskazuje, że podniebienie miękkie zostało przecięte i dotarło do jamy nosowej. Długość nacięcia wynosi około 5-7 mm.
UWAGA: Nacięcie w dół powinno być pionowe, ponieważ podniebienie miękkie jest grube, a jeśli kierunek zostanie zmieniony, może wciąć się do wewnątrz w błonę podśluzówkową przegrody nosowej lub na zewnątrz w błonę podśluzową bocznej ściany jamy nosowej. Niezależnie od tego, czy odchyla się do wewnątrz, czy na zewnątrz, nawigacja po wejściu do błony podśluzówkowej może być trudna, gdy jest obserwowana pod endoskopem. - Po nacięciu użyj samodzielnie wykonanego retraktora (Rysunek 2), aby go otworzyć, zanurz mały pasek gazy w zastrzyku adrenaliny o stężeniu 0,1% i natychmiast włóż go do nacięcia. Obserwuj nacięcie przez 2-3 minuty. Ogólnie rzecz biorąc, nie ma widocznego krwawienia, ale jeśli krwawienie jest obfite i wpływa na obserwację endoskopową, należy użyć pasków gazy nasączonych adrenaliną, aż krwawienie ustanie.
- Użyj samodzielnie wykonanego retraktora, aby całkowicie otworzyć nacięcie i odsłonić głębokie struktury podniebienia miękkiego.
UWAGA: Jeśli jest całkowicie otwarty, otwór bliższej ściany nosa można zobaczyć za pomocą endoskopii. Jeśli otwór nie jest widoczny, nacięcie może być zbyt płytkie lub wcięło się w błonę podśluzówkową bocznej ściany jamy nosowej lub błonę podśluzową przegrody nosowej, którą można dodatkowo dostosować w zależności od głębokości nacięcia. - Włóż endoskop do nacięcia, aby uwidocznić struktury z tyłu jamy nosowej i nosogardzieli, a następnie zbadano otwór gardłowy ET.
UWAGA: Otwór gardłowy ET znajduje się na ogół w tylnej części bocznej ściany jamy nosowej, wyglądając jak mała szczelina w kształcie lekko półksiężyca. Można również zaobserwować morfologię chrząstki tylnej ściany otworu gardłowego. - Użyj specjalnie zaprojektowanego miniaturowego popychacza do balonów świni (własnej roboty) (Rysunek 3) lub wygiętego urządzenia ssącego do zbadania otworu gardłowego ET, który jest głębszą szczeliną ze ścieżką skierowaną w dół i na zewnątrz.
- Zamontuj cewnik balonowy o zastosowanej długości 35,5 cm, długości balonu 2 cm i średnicy dylatacji 3 mm na popychaczu podczas dokręcania. Po włożeniu specjalnie zaprojektowanego miniaturowego popychacza do balonów świnki do ET, odkręć mocującą, delikatnie wepchnij balon, zwiększ ciśnienie do 10 barów i utrzymuj przez 2 minuty. Następnie zwolnij ciśnienie balonu i powoli wyciągnij balon razem z popychaczem.
- W badaniu endoskopowym ujścia gardła i nosogardzieli należy wykonać kolejne zabiegi, jeśli nie występuje obfite krwawienie. Po zdezynfekowaniu nacięcia podniebienia miękkiego wykonaj szycie, aby przywrócić je do jednej linii z nylonowym szwem 4 #.
UWAGA: Można stosować szwy o pełnej lub częściowej grubości. Generalnie wystarczą 1-2 szwy. Błona śluzowa nacięcia jest dostosowana do prawidłowego ułożenia, aby ułatwić gojenie się ran.
4. Opieka pooperacyjna
- Zdejmij otwieracz do ust i gazę bandażową. Umieść świnię w pozycji bocznej z językiem wyciągniętym z ust, aby zapobiec opadaniu języka do tyłu i blokowaniu dróg oddechowych. Uważnie monitoruj zwierzę, aż w pełni się obudzi, aby zapobiec obrażeniom spowodowanym nieprzytomnymi ruchami.
- Umieść miniaturową świnię z powrotem w osobnej klatce.
- Podaj jedną dawkę antybiotyków po operacji, pościć zwierzę przez 1 dzień i podawać antybiotyki doustne przez 6 dni.
Wyniki
To badanie przeprowadziło dylatację balonu ET za pomocą podejścia miękkiego podniebienia na 53 miniaturowych świniach, które zostały wykorzystane do zbadania wpływu rozszerzenia balonu na błonę śluzową ET. Balony zostały z powodzeniem wprowadzone do światła ET u wszystkich zwierząt doświadczalnych i płynnie się rozszerzyły, a oczekiwane cele chirurgiczne zostały osiągnięte. Wśród zwierząt doświadczalnych 50 świń wyzdrowiało dobrze po operacji, z całkowitym zagojeniem się ran i udaną operacją. Szybkość gojenia się nacięcia wyniosła 94,34%. Tydzień po operacji szwy pozostały nienaruszone, a nacięcie dobrze się zamknęło (Ryc. 5). Cztery tygodnie po operacji, podczas pobierania próbek, stwierdziliśmy, że szwy naturalnie odpadły, a gojenie wróciło do zdrowia. Prawie nie było widać śladów nacięć (Ryc. 6). Nacięcia podniebienia miękkiego pozostałych trzech zwierząt wykazywały różny stopień gojenia się 1 tydzień po operacji, co prowadziło do powstania przetok podniebienia miękkiego (Ryc. 7).
Podejście miękkiego podniebienia do operacji ET okazało się wygodne i uzyskano dobry widok na otwór gardła ET. Skutkowało to minimalnym miejscowym uszkodzeniem tkanek, kontrolowanym krwawieniem, płynnymi zabiegami rozszerzania balonu, krótkim czasem operacji (średnio 15-20 min) i szybkim gojeniem pooperacyjnym. Nie stwierdzono żadnych powikłań.
Rysunek 1: Schemat samodzielnie wykonanego otwieracza do ust typu ramowego. Wymiary przedstawiono na rysunku. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Rysunek 2: Zwijacz. Gdy rozszerzacz zostanie wprowadzony do nacięcia, elastyczność dwóch długich boków rozciągnie tkankę po obu stronach, umożliwiając lepsze odsłonięcie obszaru chirurgicznego poniżej nacięcia. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Rysunek 3: Popychacz balonów. Kiedy metalowy pierścień z tyłu jest popychany, metalowy blok w czerwonym obszarze wypycha balon z rurki popychacza do trąbki Eustachiusza. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Rysunek 4: Chirurgiczny proces rozszerzania trąbki Eustachiusza za pomocą balonu za pomocą podniebienia miękkiego. (A) Obszar chirurgiczny i pozycja nacięcia; Linia przerywana wskazuje położenie nacięcia. (B) Miejscowe wstrzyknięcie adrenaliny przez infiltrację. (C) Nacięcie nożem sierpowatym. (D) Morfologia po nacięciu. (E) Nacięcie jest ciągnięte przez dystraktor, a do hemostazy używa się gazy nasączonej adrenaliną. (F) Obserwacja położenia ujścia gardłowego ET przez nacięcie podniebienia miękkiego; przerywane kontury wskazują na otwór gardłowy ET. (G) Wprowadzenie endoskopu do nosogardzieli i odsłonięcie ujścia gardłowego trąbki Eustachiusza; przerywane kontury wskazują otwór gardłowy ET; (H) popychacz balonów przy ujściu gardła ET; wprowadzenie balonu do światła istot pozaziemskich; biała strzałka wskazuje otwór gardłowy ET. (I) Zwiększenie ciśnienia w balonie w celu rozszerzenia trąbki Eustachiusza; biała strzałka wskazuje dylatację ET. (J) Szew nacięcia i przylegania błony śluzowej. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Rysunek 5: Tydzień po operacji u zwierząt wykazujących gojenie. Szew pozostaje nienaruszony, a nacięcie dobrze się zagoiło. Przerywane kontury wskazują na zagojone nacięcie. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Rysunek 6: Cztery tygodnie po operacji. Podczas pobierania próbki badane jest nacięcie. Szwy naturalnie odpadły, a gojenie jest doskonałe. Przerywane kontury wskazują na zagojone nacięcie. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Rysunek 7: Tydzień po operacji u zwierząt, które nie wykazują gojenia. Nacięcie było otwarte, a na powierzchni utworzyła się nieregularna błona rzekoma i przetoka, z której odpadły niektóre szwy. Przerywane kontury wskazywały na przetokę podniebienia miękkiego. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Rysunek 8: Tomografia komputerowa miniaturowej głowy świni (przekrój strzałkowy). (A) Zakrzywiona jama nosowa. Żółta pionowa linia po prawej stronie obrazu to podziałka skali, a żółta pozioma linia poniżej ma 5 cm, oznaczając długość części podniebienia miękkiego, co wskazuje, że długość podniebienia miękkiego u miniaturowych świń przekracza 5 cm. (B) Schemat wprowadzania endoskopii do jamy nosowej. Tarcie między endoskopią a błoną śluzową nosa podczas wprowadzania do jamy nosowej. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Rysunek 9: Tomografia komputerowa miniaturowej głowy świni (przekrój poprzeczny). (A-C) Normalna miniaturowa tomografia komputerowa głowy świni, brak cieni o dużej gęstości znalezionych w obustronnych jamach ucha środkowego i wyrostka sutkowatego (czerwona strzałka). (D) Lewy hamulus wyrostka skrzydłowego miniaturowej świni A został odcięty, a tomografię komputerową wykonano 3 miesiące po operacji. W jamie wyrostka sutkowatego ucha środkowego nie stwierdzono cienia o dużej gęstości (czerwona strzałka). (E) Miniaturowa świnia B została poddana rozszerzeniu balonika lewej trąbki Eustachiusza przez szlak podniebienia miękkiego. Tomografia komputerowa została wykonana 3 miesiące po operacji i nie zaobserwowano cienia o dużej gęstości w jamie wyrostka sutkowatego ucha środkowego (czerwona strzałka). (F) Miniaturowa świnia C została poddana kauteryzacji lewej trąbki Eustachiusza, a miesiąc po operacji wykonano tomografię komputerową. Cień o zwiększonej gęstości (żółta strzałka) był widoczny w jamie wyrostka sutkowatego ucha środkowego lewego. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
Dyskusja
ET, łączący nosogardziel i ucho środkowe, odgrywa kluczową rolę w regulacji ciśnienia w uchu środkowym i bierze udział w patogenezie zapalenia ucha środkowego25. Aby kompleksowo zbadać funkcję istot pozaziemskich, naukowcy rozszerzyli swoją działalność poza małe modele zwierzęce na inne modele, takie jak gryzonie czy rezusy. Obecnie w wielu badaniach wykorzystano owce lub miniaturowe świnie. Poprzez tomografię komputerową i struktury trójwymiarowe, Miller i in. potwierdzili, że anatomia trąbki Eustachiusza u owcy czarnolicej jest bardzo podobna do tej u ludzi22. Pohl i wsp. zweryfikowali możliwość leczenia dysfunkcji ET poprzez wszczepienie stentu do ET21 owcy.
Miniaturowe świnie, charakteryzujące się niewielkimi rozmiarami, wczesną dojrzałością płciową, szybką reprodukcją i łatwością zarządzania, stają się coraz bardziej popularne jako duże modele zwierzęce w badaniach medycznych24. Wcześniejsze badania naszego zespołu wykazały, że miniaturowe świnie służą jako doskonałe modele do badania ucha środkowego i ucha wewnętrznego 30,31,32, biorąc pod uwagę ich morfologiczne i funkcjonalne podobieństwa do ludzi. Wybitne osiągnięcia osiągnięto w badaniach morfologii, charakterystyki elektrofizjologicznej, rozwoju ucha wewnętrznego33,34, ekspresji genów w układzie słuchowym35, regulacji genów 36,37,38 i transformacji genów39,40. Równolegle prowadzone są pogłębione badania w zakresie funkcji istot pozaziemskich. Dlatego, aby skuteczniej badać strukturę i funkcję ET, zbadaliśmy nowatorskie podejście chirurgiczne z wykorzystaniem miniaturowych świń.
W badaniu podejść chirurgicznych początkowo zastosowaliśmy podejście przeznosowe23, które jest konwencjonalnym podejściem dla wszystkich operacji na dużych zwierzętach z udziałem ET25. Następnie próbowaliśmy podejść do podniebienia twardego i miękkiego, a ostatecznie wybraliśmy podejście do podniebienia miękkiego. Zalety i wady każdego podejścia są następujące:
Dostęp przeznosowy
Podejście przeznosowe jest konwencjonalnym podejściem do badań klinicznych i operacji z udziałem ET. Ze względu na stosunkowo krótką, ale przestronną jamę nosową człowieka i dużą przestrzeń, bawełna nasączona adrenaliną może być używana do zwężania błony śluzowej nosa, ułatwiając przejście endoskopu do nosogardzieli. Duża przestrzeń pozwala na wygodną manipulację, dzięki czemu zabieg jest stosunkowo prosty. Oczywiście podczas wykonywania operacji na dużych zwierzętach doświadczalnych preferowane jest to podejście.
Zaletą tego rutynowego podejścia jest to, że struktura anatomiczna jest stosunkowo prosta, a zastosowanie endoskopii nosa pozwala na wyraźną wizualizację, co czyni ją znanym wyborem dla operatorów. Wadą tego podejścia jest po pierwsze, to, że jama nosowa u miniaturowych świń jest wydłużona i wąska, co można zobaczyć na podstawie wyników tomografii komputerowej naszych poprzednich badań (ryc. 8A)23, co ogranicza ruchomość narzędzi po głębokim wprowadzeniu. Manewrowanie staje się wyzwaniem, szczególnie gdy wymagany jest ruch obrotowy lub kątowy, co jest szczególnie trudne, gdy próbuje sięgnąć na zewnątrz i do góry do otworu gardłowego ET.
Po drugie, może wystąpić krwawienie z błony śluzowej nosa, prowadzące do endoskopowego zanieczyszczenia soczewki i niejasnego obrazu pola operacyjnego (ryc. 8B). Problem ten znacząco wpływa na operację, a wiele czasu poświęca się na proces wprowadzania endoskopu do jamy nosowej, czyszczenia soczewki po zanieczyszczeniu soczewki, a następnie ponownego wprowadzenia endoskopu. Dodatkowo długotrwała operacja prowadzi do przekrwienia i obrzęku błony śluzowej nosogardzieli, pogłębiając zwężenie jamy nosowej i zwiększając utratę krwi. Operacje przeznosowe często trwają 3 godziny lub dłużej; W tym okresie jama nosowa znajduje się w stanie ciągłego krwawienia, co skutkuje niską skutecznością chirurgiczną. Długotrwałe zabiegi mogą prowadzić do zmęczenia operatora i zwiększonego uszkodzenia jamy nosowej, nosogardzieli i otworu gardłowego ET. W eksperymentach ET zmiany w morfologii i funkcji otworu gardła są krytycznymi punktami obserwacji. Nadmierne chirurgiczne uszkodzenie tego obszaru może wpłynąć na wyniki obserwacji, a w konsekwencji wpłynąć na wnioski eksperymentalne, których należy w miarę możliwości unikać podczas operacji.
Podejście z twardym podniebieniem
Zaletą tego podejścia jest to, że nacięcie jest umieszczone bliżej przodu podczas zabiegów chirurgicznych, co pozwala na uzyskanie większej przestrzeni ustnej. Rozmieszczenie instrumentów jest wygodne, dzięki czemu operacja jest stosunkowo prosta. Błona śluzowa podniebienia jest cienka i nie są potrzebne żadne instrumenty.
Wadą tego podejścia jest to, że etapy chirurgiczne są złożone, a do otwarcia kości podniebienia twardego wymagany jest sprzęt, taki jak wiertarka systemowa z napędem. Złożoność ta utrudnia powszechne stosowanie tego podejścia. Co najważniejsze, gojenie pooperacyjne jest często słabe, co prowadzi do powstania twardej przetoki podniebiennej, co może niekorzystnie wpływać na funkcję ET, a nawet na stan odżywienia świń. Z powodu tych komplikacji podejście to zostało odrzucone.
Podejście oparte na miękkim podniebieniu
Do zalet tego podejścia należą wyraźne warstwy anatomiczne z rozpoznawalnymi punktami orientacyjnymi. Nacięcie chirurgiczne jest małe, tylko 5-7 mm i może być w pełni odsłonięte, aby uzyskać wystarczającą hemostazę, aby ograniczona była utrata krwi. Zabiegi chirurgiczne są proste, a po otwarciu podniebienia miękkiego można obserwować jamę nosową od poziomu połączenia podniebienia miękkiego i twardego do poziomu gardła za pomocą endoskopu 0°, otwór gardłowy ET jest bezpośrednio odsłonięty. Zabieg trwa około 20 minut, a wykwalifikowany personel może go wykonać w nieco ponad 10 minut, co zwiększa skuteczność operacji. Rekonwalescencja pooperacyjna jest szybka, a rana goi się w ciągu 1 tygodnia.
Wadą tego podejścia jest to, że pozycja nacięcia podczas operacji jest tylna, co skutkuje mniejszą przestrzenią jamy ustnej i sprawia, że operacja jest trudniejsza. Wyzwaniom tym można jednak sprostać. Podejście to polega na przecięciu części mięśnia dźwigacza górnego podniebienia (LVP) podniebienia miękkiego, co może wpływać na funkcję ET.
Aby wykluczyć wpływ uszkodzenia mięśni na funkcję trąbki Eustachiusza, przeprowadziliśmy podobne badania. Po pierwsze, przecięliśmy hamulus wyrostka skrzydłowego, aby osłabić zdolność skurczową tensora veli palatini (TVP). Pooperacyjna tomografia komputerowa była wykonywana co miesiąc i pod koniec 3 miesięcy nie powstało żadne zapalenie ucha środkowego, co potwierdza, że funkcja trąbki Eustachiusza nie była zaburzona (ryc. 9A i ryc. 9D). Po drugie, przeprowadziliśmy tomografię komputerową miniaturowych świń 3 miesiące po wykonaniu nacięcia na podniebieniu miękkim, a wyniki również wykazały brak tworzenia się zapalenia ucha środkowego, co potwierdza, że funkcja trąbki Eustachiusza nie była zaburzona (ryc. 9B i ryc. 9E). Jednak kauteryzacja trąbki Eustachiusza może uszkodzić funkcję trąbki Eustachiusza, prowadząc do powstania zapalenia ucha środkowego (ryc. 9C i ryc. 9F). Porównanie pooperacyjnej tomografii komputerowej trzech świń wykazało, że ścieżka chirurgiczna podniebienia miękkiego nie prowadziła do powstania zapalenia ucha środkowego u miniaturowych świń, co wskazuje, że ta metoda chirurgiczna nie wpłynęła na funkcję trąbki Eustachiusza. Co więcej, długość nacięcia wynosi tylko 5-7 mm, podczas gdy długość podniebienia miękkiego przekracza 5 cm, co stanowi anatomiczną podstawę do tego, aby nie wpływać na funkcję ET (ryc. 8A). Szybko zszyliśmy również nacięcia, a nacięcie zagoiło się 1 tydzień po operacji. Wyniki te, zarówno ze struktury anatomicznej, jak i pooperacyjnej tomografii komputerowej, potwierdzają, że nacięcie chirurgiczne nie wpłynęło na funkcję ET. Może to wynikać z innego wpływu TVP i LVP świni na istoty pozaziemskie w porównaniu z ludźmi. Dodatkowo, miniaturowe świnie były hodowane przez cztery tygodnie po operacji, aby obserwować rekonwalescencję trąbki Eustachiusza. W tym okresie nie wystąpiły żadne komplikacje, takie jak trudności w jedzeniu lub oddychaniu. Dlatego podejście oparte na miękkim podniebieniu jest bezpieczne i skuteczne.
Kluczowe punkty procedury chirurgicznej z dostępu do podniebienia miękkiego obejmują zapobieganie infekcjom i krytyczne anatomiczne punkty orientacyjne. W zapobieganiu infekcjom głównym celem jest zapobieganie tworzeniu się przetoki miękkiego podniebienia. Gdy już do tego dojdzie, może poważnie wpłynąć na spożycie wody i stan odżywienia świni oraz upośledzić funkcję ET. Konieczne jest przestrzeganie ścisłych procedur aseptycznych, zapewniających dokładną dezynfekcję obszaru operacyjnego, który obejmuje całą błonę śluzową górnego podniebienia, obie strony dziąseł i łuki zębowe, części powierzchni języka oraz skórę otaczającą jamę ustną. Dodatkowo antybiotyki są przepisywane w trakcie i po operacji, z codziennym doustnym przyjmowaniem antybiotyków przez tydzień po operacji.
Krytycznymi anatomicznymi punktami orientacyjnymi są tylna krawędź podniebienia twardego i szew środkowy podniebienia miękkiego. Tylna krawędź podniebienia twardego znajduje się na styku podniebienia miękkiego i twardego i jest wyczuwalna palcem wskazującym. Identyfikacja tego punktu orientacyjnego ma kluczowe znaczenie, aby uniknąć przecięcia do przodu i ryzyka uszkodzenia twardej kości podniebienia, co utrudniłoby nacięcie lub uniemożliwiło dostęp do nosogardzieli po nacięciu. Cięcie do tyłu może powodować nadmierne uszkodzenie podniebienia miękkiego, wpływając na lokalizację otworu gardłowego ET. W przypadku szwu środkowego podniebienia miękkiego nacięcie powinno znajdować się około 2-3 mm do chirurgicznej strony szwu środkowego podniebienia miękkiego. Cięcie zbyt blisko szwu środkowego może przypadkowo dostać się do błony podśluzowej przegrody nosowej, utrudniając dostęp do otworu gardłowego ET. Jeśli nacięcie znajduje się zbyt daleko od szwu pośrodkowego, istnieje ryzyko zbliżenia się do bocznej części nosogardzieli, co może spowodować uszkodzenie otworu gardłowego ET. W skrajnych przypadkach może nawet dostać się do błony podśluzowej ściany bocznej, utrudniając zlokalizowanie otworu gardłowego ET i powodując potencjalne uszkodzenie otaczających tkanek, prowadząc do głębokiego zakażenia tkanek po operacji.
Pięćdziesiąt trzy miniaturowe świnie były zaangażowane w badania poświęcone badaniu funkcji trąbki Eustachiusza. Oprócz szlaku podniebienia miękkiego jako metody chirurgicznej, badaliśmy również wpływ rozszerzania balonu na strukturę i funkcję trąbki Eustachiusza oraz mechanizm uszkodzenia i procesu naprawy błony śluzowej trąbki Eustachiusza. Kolejne badania obejmowały rozszerzanie balonami o różnych średnicach oraz charakterystykę histologiczną błony śluzowej trąbki Eustachiusza w różnych punktach czasowych po rozszerzeniu. Pięćdziesiąt miniaturowych świń zostało pomyślnie zoperowanych w ramach badań eksperymentalnych opisanych powyżej.
Nasze podejście chirurgiczne zawiodło w 3 przypadkach. Wyniki te mogą być spowodowane wieloma czynnikami, w tym niektórymi z poniższych. Po pierwsze, lokalizacja nacięcia nie była wystarczająco dokładna, pochylając się w stronę przegrody nosowej, tak że położenie otworu gardłowego trąbki Eustachiusza nie mogło być skutecznie obserwowane przez pierwotne nacięcie. Aby zakończyć operację, nacięcie zostało rozszerzone, co spowodowało powstanie niezagojonej rany. Po drugie, tętnica została uszkodzona podczas przecinania podniebienia miękkiego, czas operacji został wydłużony z powodu powtarzającej się hemostazy, a resztkowe plamy krwi przylgnęły do jamy nosowej, służąc jako pożywka do hodowli przyspieszającej wzrost bakterii, co prowadziło do infekcji rany i wpływało na gojenie. Po trzecie, głębokość zszycia była niewystarczająca, a tarcie pokarmowe podczas jedzenia powodowało, że szew odpadał w sposób przedwczesny, co skutkowało tym, że rana nie goiła się. Chociaż w poszczególnych przypadkach występowało brak gojenia, wskaźnik powodzenia operacji był nadal na wysokim poziomie.
Ograniczeniem tego badania jest to, że nie przeprowadziliśmy analizy statystycznej utraty krwi i czasu operacji między drogą przeznosową a miękką podniebienną. Początkowo stosowaliśmy podejście przeznosowe, ale okazało się, że operacja jest dość trudna. Endoskop musiał być wielokrotnie usuwany w celu oczyszczenia krwi, co jeszcze bardziej pogłębiało uszkodzenie błony śluzowej nosa i utrudniało operację. Trwało to ponad 3 godziny, zanim dylatacja balonu została zakończona. Pomimo tego, że byliśmy w stanie ukończyć procedurę, nie kontynuowaliśmy stosowania tej metody chirurgicznej ze względu na etykę eksperymentów na zwierzętach. Ze względu na ograniczoną liczbę wczesnych zabiegów przeznosowych, dokonaliśmy jedynie wstępnych obliczeń czasu operacji. Jednak to właśnie wady związane z długim czasem operacji i nadmiernym krwawieniem zainspirowały nas do rozważenia innych ścieżek, aby uniknąć tych problemów i osiągnąć cel, jakim jest rozszerzenie balonu z trąbką Eustachiusza.
Podsumowując, podejście chirurgiczne opisane w tym badaniu jest wysoce odpowiednie do wykonywania procedur ET u dużych zwierząt, takich jak miniaturowe świnie, owce i psy. Technika charakteryzuje się prostotą, łatwą nauką, krótkim czasem operacji, wysoką skutecznością, minimalnym uszkodzeniem tkanek i szybkim gojeniem. Bezpośrednia wizualizacja ujścia gardła ET jest możliwa podczas operacji, a zabieg nie ma negatywnego wpływu na normalne funkcjonowanie ET. Podejście to ułatwia różne interwencje przy ujściu gardła, w tym rozszerzenie balonu, o którym mowa w tym badaniu, i ma również zastosowanie do innych procedur, takich jak umieszczanie stentów ET w innej literaturze.
Oświadczenia
Autorzy nie mają do zadeklarowania konfliktu interesów.
Podziękowania
To badanie zostało sfinansowane z grantów z Narodowego Programu Kluczowych Badań i Rozwoju Chin (2023YFC2508400), Beijing Municipal Natural Science Foundation (7212096) oraz Beijing Nova Program (Z201100006820133)
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Amoksycylina rozpuszczalny w proszku | Hefei smok bóg Animal Pharmaceutical Co., Ltd. | Licencja na lek weterynaryjny nr 120.51199 | Proszek rozpuszczalny w amoksycylinie jest antybiotykiem stosowanym w medycynie weterynaryjnej. Jest skuteczny w zwalczaniu wielu infekcji bakteryjnych u zwierząt, zwłaszcza infekcji dróg oddechowych i przewodu pokarmowego. Łatwo rozpuszcza się w wodzie, jest wygodny do podawania doustnego zwierzętom gospodarskim i drobiowi. Aby zapobiec infekcjom pooperacyjnym po operacji rozszerzenia balonu z użyciem trąbki Eustachiusza. |
| Obwód anestezjologiczny | INSPIRED MEDICAL | YZB/Guangdong 0016-2009 | Obwód anestezjologiczny to system rurek i elementów w aparacie anestezjologicznym, który dostarcza pacjentowi gazy znieczulające i usuwa wydychane gazy. Zapewnia ciągły przepływ gazów, umożliwiając precyzyjną kontrolę poziomu znieczulenia podczas zabiegów chirurgicznych. |
| Aparat anestezjologiczny | Drä ger | ARHB-0015 | Aparat do znieczulenia to wyrób medyczny służący do podawania i utrzymywania znieczulenia podczas zabiegów chirurgicznych. Precyzyjnie miesza gazy i pary, dostarczając pacjentowi kontrolowany przepływ znieczulenia, jednocześnie monitorując parametry życiowe w celu zapewnienia bezpieczeństwa |
| Cewnik do dylatacji balonowej | BIOVAS | ETB30200 | Cewnik dylatacyjny balonowy z trąbką Eustachiusza to specjalistyczne urządzenie medyczne przeznaczone do leczenia dysfunkcji trąbki Eustachiusza. Na jego końcu znajduje się mały balonik, który po napompowaniu delikatnie otwiera i poszerza trąbkę Eustachiusza, pomagając w przywróceniu normalnego funkcjonowania i złagodzeniu objawów. |
| Popychacz balonów | BIOVAS | DYQ42 | Używany w połączeniu z cewnikiem dylatacyjnym balonowym, urządzenie to jest stosowane podczas operacji rozszerzania balonu z trąbką Eustachiusza. Wprowadza się go przez jamę nosową do otworu trąbki Eustachiusza, tworząc kanał roboczy. To prowadzi cewnik balonowy do kanału, aby zakończyć rozszerzanie balonu. Po zabiegu usuwa się go z kanału wraz z cewnikiem dylatacyjnym balonowym. W tym eksperymencie wprowadza się go przez podniebienie miękkie do otworu trąbki Eustachiusza." |
| Cefuroksym sodowy do wstrzykiwań | SHANDONG RUNZE PHARMACEUTICAL CO., LTD | National Medicine Approval Number H20066112 | Sól sodowa cefuroksymu do wstrzykiwań jest antybiotykiem o szerokim spektrum działania stosowanym w leczeniu różnych infekcji bakteryjnych. Jest skuteczny w przypadku infekcji układu oddechowego, moczowego, skóry i tkanek miękkich, działając poprzez zakłócanie syntezy ściany komórkowej bakterii, eliminując w ten sposób bakterie wywołujące infekcje. Aby zapobiec infekcjom pooperacyjnym po operacji rozszerzenia balonu z użyciem trąbki Eustachiusza. |
| Jednorazowa pompa ciśnieniowa do balonów | FERVID | FXB-20-30 | W operacji rozszerzania balonów z trąbką Eustachiusza stosuje się jednorazową pompę ciśnieniową do balonów. Urządzenie to precyzyjnie kontroluje rozszerzanie się balonu, zapewniając bezpieczne i optymalne ciśnienie podczas zabiegu. Ma to kluczowe znaczenie dla osiągnięcia skutecznego rozszerzenia przy jednoczesnym zminimalizowaniu ryzyka uszkodzenia tkanek. |
| Endoskop | Karl Storz | 7220AA | W chirurgii rozszerzania balonu z trąbką Eustachiusza endoskop służy do bezpośredniej wizualizacji trąbki Eustachiusza. Pozwala to na precyzyjne prowadzenie cewnika balonowego, zapewniając dokładne umieszczenie i rozszerzenie, co ma kluczowe znaczenie dla powodzenia zabiegu i zmniejszenia ryzyka powikłań. Używany w połączeniu z systemem obrazowania endoskopowego. |
| System obrazowania endoskopowego | DELON | HD3808 | W chirurgii rozszerzania balonów z trąbką Eustachiusza system obrazowania endoskopowego zapewnia wysokiej rozdzielczości obrazy obszarów nosa i trąbki Eustachiusza. Ułatwia to precyzyjne umieszczanie i rozszerzanie balonu, zapewniając skuteczność zabiegu przy jednoczesnym zminimalizowaniu ryzyka uszkodzenia tkanek i powikłań. |
| Chlorowodorek epinefryny do wstrzykiwań | HENGTONG | Licencja na leki weterynaryjne nr. (2013) 220381220 | Wstrzyknięcie chlorowodorku epinefryny jest szeroko stosowane ze względu na swoje właściwości zwężające naczynia krwionośne, skutecznie zwężając naczynia krwionośne w celu zmniejszenia krwawienia. To sprawia, że jest kluczowym środkiem w tamowaniu krwotoku, szczególnie podczas zabiegów chirurgicznych i niektórych zaburzeń krzepnięcia. |
| Chlorowodorek tyletyminy i chlorowodorek Zolazepamu do wstrzykiwań | Virbac | Zoletil 50 | Chlorowodorek tylidyny i chlorowodorek naloksonu do wstrzykiwań to lek łączący opioidowy środek przeciwbólowy i antagonistę opioidów. Jest stosowany w leczeniu silnego bólu, gdzie tilidyna zapewnia ulgę w bólu, podczas gdy nalokson zmniejsza ryzyko skutków ubocznych wywołanych opioidami, zwłaszcza depresji oddechowej. Służy do znieczulania zwierząt doświadczalnych. |
| Urządzenie ssące do ciągłego drenażu urazowego | Shanghai S.MANF | YZB/Shanghai 5094-54-2014 | Aspirator do ciągłego drenażu urazowego to urządzenie medyczne służące do długotrwałego odsysania płynów z ran chirurgicznych lub urazowych. Pomaga usunąć wysięk i krew, zmniejszając ryzyko infekcji i przyspieszając gojenie poprzez utrzymanie czystego i suchego środowiska rany. |
| Chlorowodorek ksylazyny do wstrzykiwań Chang | shabest biological technology institute CO., LTD. | Numer licencji na lek weterynaryjny180121777 | Chlorowodorek cetyryzyny do wstrzykiwań jest stosowany w eksperymentalnym znieczuleniu zwierząt ze względu na swoje właściwości uspokajające. Pomaga w indukcji łagodnej sedacji, zmniejszając stres i dyskomfort u zwierząt podczas zabiegów. Jego zastosowanie ma kluczowe znaczenie dla zapewnienia dobrostanu i zminimalizowania stresu w różnych badaniach na zwierzętach. |
Bibliografia
- Smith, M. E., Scoffings, D. J., Tysome, J. R. Imaging of the eustachian tube and its function: A systematic review. Neuroradiology. 58 (6), 543-556 (2016).
- Di Martino, E. F. eustachian tube function tests: An update. Hno. 61 (6), 467-476 (2013).
- Bluestone, C. D. Impact of evolution on the eustachian tube. Laryngoscope. 118 (3), 522-527 (2008).
- Bluestone, C. D., Beery, Q. C. Concepts on the pathogenesis of middle ear effusions. Ann Otol Rhinol Laryngol. 85, 2 Suppl 25 Pt 2 182-186 (1976).
- Derkay, C. S., Bluestone, C. D., Thompson, A. E., Kardatske, D. Otitis media in the pediatric intensive care unit: A prospective study. Otolaryngol Head Neck Surg. 100 (4), 292-299 (1989).
- Bluestone, C. D., Doyle, W. J. Anatomy and physiology of eustachian tube and middle ear related to otitis media. J Allergy Clin Immunol. 81 (5), Pt 2 997-1003 (1988).
- Li, G., et al. Surfactant protein a can affect the surface tension of the eustachian tube and macrophage migration. Laryngoscope. 133 (7), 1726-1733 (2023).
- Kouhi, A., Xia, A., Khomtchouk, K., Santa Maria, P. L. Minimally invasive trans-tympanic eustachian tube occlusion animal model. Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 156, 111070(2022).
- Nicholas, B. D., et al. Changes in eustachian tube mucosa in mice after short-term tobacco and e-cigarette smoke exposure. Laryngoscope. 132 (3), 648-654 (2022).
- Kim, Y., et al. Serial histological changes in the cartilaginous eustachian tube in the rat following balloon dilation. PLoS One. 17 (5), e0268763(2022).
- Yang, J., Zhao, C., Chen, P., Zhao, S. Morphological and pathological changes of eustachian tube mucosa in an animal model of eosinophilic otitis media. Braz J Otorhinolaryngol. 88 (5), 701-707 (2022).
- Yu, C., et al. Effect of glucocorticoids on aquaporin-1 in guinea pigs with otitis media with effusion. Exp Ther Med. 5 (6), 1589-1592 (2013).
- Choi, H. S., et al. Functional study of mucus secretion of the eustachian tube in guinea pigs. Otol Neurotol. 31 (5), 817-822 (2010).
- Jang, C. H., Park, H., Choi, C. H., Cho, Y. B., Park, I. Y. Efficacy of transnasal nebulized surfactant on experimental otitis media with effusion in guinea pig. Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 74 (1), 71-74 (2010).
- Murrah, K. A., et al. Replication of type 5 adenovirus promotes middle ear infection by streptococcus pneumoniae in the chinchilla model of otitis media. Pathog Dis. 73 (2), 1-8 (2015).
- Novotny, L. A., Mason, K. M., Bakaletz, L. O. Development of a chinchilla model to allow direct, continuous, biophotonic imaging of bioluminescent nontypeable haemophilus influenzae during experimental otitis media. Infect Immun. 73 (1), 609-611 (2005).
- Tong, H. H., Grants, I., Liu, X., Demaria, T. F. Comparison of alteration of cell surface carbohydrates of the chinchilla tubotympanum and colonial opacity phenotype of streptococcus pneumoniae during experimental pneumococcal otitis media with or without an antecedent influenza a virus infection. Infect Immun. 70 (8), 4292-4301 (2002).
- Giebink, G. S. Otitis media: The chinchilla model. Microb Drug Resist. 5 (1), 57-72 (1999).
- Wang, B., Xu, X., Lin, J., Jin, Z. Dynamic rabbit model of ear barotrauma. Aerosp Med Hum Perform. 90 (8), 696-702 (2019).
- Koten, M., et al. Nebulized surfactant as a treatment choice for otitis media with effusion: An experimental study in the rabbit. J Laryngol Otol. 115 (5), 363-368 (2001).
- Pohl, F., et al. Stenting the eustachian tube to treat chronic otitis media - a feasibility study in sheep. Head Face Med. 14 (1), 8(2018).
- Miller, F., et al. Treatment of middle ear ventilation disorders: Sheep as animal model for stenting the human eustachian tube--a cadaver study. PLoS One. 9 (11), e113906(2014).
- An, F. W., et al. Establishment of a large animal model for eustachian tube functional study in miniature pigs. Anat Rec (Hoboken). 302 (6), 1024-1038 (2019).
- Pracy, J. P., White, A., Mustafa, Y., Smith, D., Perry, M. E. The comparative anatomy of the pig middle ear cavity: A model for middle ear inflammation in the human. J Anat. 192, Pt 3 359-368 (1998).
- Oppel, N., et al. Development of an in vivo model for eustachian tube dysfunction). Bioengineering (Basel). 9 (7), (2022).
- Alper, C. M., Swarts, J. D., Doyle, W. J. Prevention of otitis media with effusion by repeated air inflation in a monkey model). Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 126 (5), 609-614 (2000).
- Van Cauwenberge, P. animal experiment concerning the relationship between tubal function and nasal resistance. Acta Otorhinolaryngol Belg. 43 (5), 499-513 (1989).
- Casselbrant, M. L., Cantekin, E. I., Dirkmaat, D. C., Doyle, W. J., Bluestone, C. D. Experimental paralysis of tensor veli palatini muscle. Acta Otolaryngol. 106 (3-4), 178-185 (1988).
- Doyle, W. J., Ingraham, A. S., Fireman, P. The effects of intranasal histamine challenge on eustachian tube function. J Allergy Clin Immunol. 76 (4), 551-556 (1985).
- Ji, X., et al. The miniature pig: A large animal model for cochlear implant research. J Vis Exp. (185), e64174(2022).
- Yi, H. J., et al. The temporal bone microdissection of miniature pigs as a useful large animal model for otologic research. Acta Otolaryngol. 134 (1), 26-33 (2014).
- Yi, H., et al. Miniature pigs: A large animal model of cochlear implantation. Am J Transl Res. 8 (12), 5494-5502 (2016).
- Guo, W., et al. The morphology and electrophysiology of the cochlea of the miniature pig. Anat Rec (Hoboken). 298 (3), 494-500 (2015).
- Guo, W., et al. The morphological and functional development of the stria vascularis in miniature pigs. Reprod Fertil Dev. 29 (3), 585-593 (2017).
- Wang, Q., et al. Transcription analysis of cochlear development in minipigs. Acta Otolaryngol. 137 (11), 1166-1173 (2017).
- Chen, L., et al. A de novo silencer causes elimination of mitf-m expression and profound hearing loss in pigs. BMC Biol. 14, 52(2016).
- Hai, T., et al. Pilot study of large-scale production of mutant pigs by enu mutagenesis. Elife. 6, (2017).
- Hai, T., et al. Creation of miniature pig model of human waardenburg syndrome type 2a by enu mutagenesis. Hum Genet. 136 (11-12), 1463-1475 (2017).
- Ma, Y., et al. Transplantation of human umbilical cord mesenchymal stem cells in cochlea to repair sensorineural hearing. Am J Transl Res. 8 (12), 5235-5245 (2016).
- Shi, X., et al. Adeno-associated virus transformation into the normal miniature pig and the normal guinea pigs cochlea via scala tympani. Acta Otolaryngol. 137 (9), 910-916 (2017).
Przedruki i uprawnienia
Ten artykuł został opublikowany
Film wkrótce dostępny