Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Wytwarzanie antybakteryjnych nanokompozytów tlenek grafenu i miedź

1.7K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/66762

⸱

4 października 2024

 ,  ,  ,  ,  , 
1School of Integrative Engineering, Chung-Ang University, 2Feynman Institute of Technology, Nanomedicine Corporation, 3Department of Chemical Science and Engineering, Tokyo Institute of Technology, 4Department of Chemical Engineering, Kumoh National Institute of Technology

W tym artykule

Podsumowanie

Tutaj wprowadzamy nanokompozyty tlenek grafenu i miedź (GO/Cu) jako nanomateriał antybakteryjny. Skuteczność przeciwbakteryjną nanokompozytów GO/Cu oceniano zarówno wobec bakterii Gram-dodatnich, jak i opornych na antybiotyki.

Streszczenie

Antybiotyki są obecnie najczęściej stosowanym sposobem leczenia przeciwbakteryjnego do zabijania bakterii. Jednak bakterie rozwijają oporność, gdy są stale nadmiernie narażone na antybiotyki. Opracowanie środków przeciwdrobnoustrojowych, które mogą zastąpić istniejące antybiotyki, jest niezbędne, ponieważ bakterie oporne na antybiotyki mają mechanizmy oporności na wszystkie obecnie stosowane antybiotyki i mogą sprzyjać zakażeniom szpitalnym. Aby sprostać temu wyzwaniu, w niniejszym badaniu proponujemy nanokompozyty tlenek grafenu i miedź (GO/Cu) jako materiały przeciwbakteryjne, które mogą zastąpić istniejące antybiotyki. Nanokompozyty GO/Cu charakteryzują się transmisyjną mikroskopią elektronową oraz skaningową mikroskopią elektronową. Pokazują one, że nanocząstki miedzi (Cu) są dobrze rozwinięte na arkuszach tlenku grafenu. Dodatkowo stosuje się metodę bulionu mikrorozcieńczonego w celu potwierdzenia skuteczności substancji przeciwdrobnoustrojowej przeciwko opornemu na metycylinę Staphylococcus aureus (MRSA) i Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), które często są związane z zakażeniami szpitalnymi. W szczególności 99,8% MRSA i 84,7% P. aeruginosa jest eliminowane przez 500 μg/ml nanokompozytów GO/Cu. Nanokompozyty metalowe mogą eliminować bakterie oporne na antybiotyki poprzez uwalnianie jonów, tworzenie reaktywnych form tlenu i fizyczne uszkadzanie bakterii. Badanie to pokazuje potencjał przeciwbakteryjnych nanokompozytów GO/Cu w zwalczaniu bakterii opornych na antybiotyki.

Wprowadzenie

Infekcje bakteryjne mają znaczący wpływ na zdrowie publiczne. W szczególności bakterie chorobotwórcze mogą omijać mechanizmy ochronne organizmu i powodować choroby1. Antybiotyki są szeroko stosowane w leczeniu infekcji bakteryjnych. Jednak niewłaściwe stosowanie antybiotyków przyspieszyło pojawienie się bakterii opornych na antybiotyki. Obecnie zakażenia szpitalne związane z bakteriami opornymi na antybiotyki powodują znaczące powikłania w placówkach opieki zdrowotnej2. Niestety, bakterie mają mechanizmy oporności na wszystkie obecne antybiotyki3. W związku z tym niezbędne jest opracowanie nowych antybiotyków, choć istnieje również duże prawdopodobieństwo, że pojawią się mechanizmy oporności.

Nanocząstki metali okazały się obiecującymi środkami do zwalczania bakterii opornych na antybiotyki ze względu na ich skuteczne właściwości przeciwbakteryjne4,5,6. Bakteriom trudno jest rozwinąć mechanizmy odporności na nanocząstki metali, ponieważ nie wiążą się one z żadnymi specyficznymi receptorami bakteryjnymi7. W szczególności nanocząstki srebra, miedzi i tlenku są przedmiotem szeroko zakrojonych badań ze względu na ich niezwykłą skuteczność przeciwbakteryjną8,9,10,11,12,13. Toksyczność nanocząstek metali w stosunku do bakterii przypisuje się trzem podstawowym mechanizmom: 1) uwalnianiu jonów metali, 2) wytwarzaniu reaktywnych form tlenu (ROS), takich jak •OH i •O2−, oraz 3) fizycznej interakcji i przyłączeniu4,14.

W tym badaniu, nanokompozyty tlenek grafenu i miedź (GO/Cu) zostały opracowane jako środek przeciwdrobnoustrojowy. Miedź (Cu) skutecznie zabija patogeny, które napotykają jej powierzchnię i zakłóca replikację genów bakteryjnych. Jest to jednak niezbędny mikroelement w ludzkim ciele i jest mniej toksyczny dla komórek ssaków, ponieważ posiada mechanizmy homeostatyczne, które regulują stężenie Cu wewnątrz komórek4. Kiedy nanocząstki Cu są utleniane, generują jony Cu, które mają stosunkowo wysokie powinowactwo do ujemnie naładowanych bakterii15,16. Jony Cu wiążą się ze strukturami komórkowymi (np. białkami, błonami i DNA), zaburzając funkcje komórki17. Poprzez syntezę nanocząstek Cu na powierzchni tlenku grafenu (GO), można kontrolować szybkość uwalniania jonów metali18,19,20. GO wykazuje również działanie przeciwbakteryjne, zapobiegając przyleganiu bakterii do szorstkiej powierzchni w wyniku stresu oksydacyjnego lub tworząc ROS21,22. Co więcej, nanokompozyty GO/Cu uwalniają więcej ROS niż GO poprzez chemiczne działanie Cu2+, które uszkadza białka bakteryjne i DNA, prowadząc do śmierci bakterii23,24.

Ten artykuł przedstawia protokół syntezy nanokompozytów GO/Cu i przedstawia podejście do testowania przeciwbakteryjnego przeciwko klinicznym bakteriom MRSA i P. aeruginosa, najpowszechniejszym wielolekoopornym szczepom bakterii, które powodują infekcje szpitalne25. Protokół ten ma na celu wprowadzenie łatwej metody redukcji chemicznej do syntezy nanokompozytów GO/Cu, które mogą hamować rozwój bakterii opornych na antybiotyki. Używamy chlorku miedzi(II) (CuCl2) i borowodorku sodu (NaBH4) odpowiednio jako prekursora i środka redukującego. W protokole opisano również specyfikę stosowania tych nanokompozytów do bakterii metodą bulionu mikrorozcieńczalnego. Aby wykluczyć błędy wynikające z interferencji absorpcyjnej nanocząstek metalu i dokonać dokładnej oceny, zdolność przeciwbakteryjną ocenia się za pomocą metody zliczania kolonii.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

1. Przygotowanie nanokompozytów GO/Cu

UWAGA: Rozmiar i morfologia nanocząstek Cu, które wzrostą na nanoarkuszach GO, są określone przez stopień utlenienia GO, stężenie prekursora Cu oraz stężenie reduktora26.

  1. Przygotować 10 mL zawiesiny GO o stężeniu 1 mg/mL w szklanej butelce. Poddać zawiesinę GO działaniu ultradźwięków przez 1 h, aż GO zostanie dobrze rozproszone w wodzie destylowanej (DI).
  2. Przygotować 20 mM roztwór CuCl2 w szklanej fiolce. Poddać roztwór CuCl2 działaniu ultradźwięków, aż CuCl2 zostanie dobrze rozproszony w wodzie DI.
  3. Dodać 10 mL 20 mM roztworu CuCl2 do roztworu GO i poddać mieszaninę działaniu ultradźwięków w temperaturze 70 °C przez 1 h.
  4. Przygotować 20 mM roztwór NaBH4.
    OSTROGNIENIE: Procedurę tę należy przeprowadzić w dygestorium chemicznym. Po wprowadzeniu reduktora NaBH4 do wody następuje reakcja redoks. Roztwór NaBH4 należy przygotować bezpośrednio przed eksperymentem.
  5. Przygotowanie mieszaniny NaBH4, GO i CuCl2
    1. Dodać 20 mL 20 mM roztworu NaBH4 do mieszaniny GO i CuCl2, mieszając za pomocą mieszadła magnetycznego z prędkością 200 rpm. Po dodaniu roztworu NaBH4 mieszać nieprzerwanie przez 30 min.
      OSTROGNIENIE: Procedurę tę należy przeprowadzić w dygestorium chemicznym.
  6. Wirowanie mieszaniny
    1. Przenieść mieszaninę z kroku 1.5.1 do probówki do wirowania. Wirować roztwór przy 23 000 × g przez 10 min w temperaturze pokojowej. Odlać supernatant.
      OSTROGNIENIE: Podczas obsługi wirówki zawsze należy zachować równowagę, umieszczając probówki o tej samej masie.
  7. Resuspendować mieszaninę nanokompozytu GO/Cu w 10 mL wody DI i poddać działaniu ultradźwięków, aby umożliwić równomierne rozproszenie osadu w całym roztworze.
  8. Wirować roztwór przy 23 000 × g przez 10 min w temperaturze pokojowej, a następnie usunąć supernatant.
  9. Powtórzyć kroki 1.7-1.8 jeszcze raz, aby usunąć niezereagowane substancje chemiczne.
  10. Dodać 1 mL wody destylowanej do nanokompozytów GO/Cu i poddać mieszaninę działaniu ultradźwięków, aby równomiernie rozproszyć osad w fazie ciekłej.
    UWAGA: Wszystkie roztwory nanokompozytu GO/Cu należy zebrać w jednej probówce stożkowej.
  11. Liofilizować roztwór w temperaturze −60 °C pod próżnią przez noc, aż nanokompozyty GO/Cu zostaną całkowicie wysuszone, i uzyskać proszek nanokompozytu GO/Cu.
  12. Przechowywać proszek nanokompozytu GO/Cu w temperaturze −20 °C do czasu użycia.

2. Przygotowanie bakterii do testu przeciwbakteryjnego

OSTROŻNIE: Procedurę tę należy przeprowadzać w komorze bezpieczeństwa biologicznego z użyciem lampy alkoholowej. Odpady bakteryjne muszą zostać poddane autoklawowaniu przed utylizacją. Podczas pracy z bakteriami opornymi na antybiotyki należy stosować rękawiczki, fartuchy i maski, a po zakończeniu eksperymentu należy umyć ręce mydłem lub użyć środka do dezynfekcji rąk. Zawsze należy przeprowadzać dokładną dezynfekcję; w przypadku skażenia obszaru eksperymentalnego należy go niezwłocznie zdezynfekować 70% etanolem.

  1. Przygotowanie pożywek dla kultur bakteryjnych
    1. W kolbie wymieszać 20 g agaru sojowo-tryptonowego i 500 mL wody destylowanej. Mieszaninę wysterylizować w autoklawie w temperaturze 121 °C przez 15 min.
    2. Przygotować płytkę agarową, wlewając 15 mL roztworu agaru do szalki Petriego, zanim agar stężeje. Płytkę agarową przechowywać w temperaturze 4 °C do momentu użycia.
      UWAGA: Czynność tę należy wykonać szybko, zanim roztwór agaru stężeje. Aby zapobiec kontaminacji, podczas stężenia wysterylizować płytkę agarową światłem UV przez 15 min.
    3. W kolbie wymieszać 15 g bulionu sojowo-tryptonowego (TSB) i 500 mL wody destylowanej. Mieszaninę wysterylizować w autoklawie w temperaturze 121 °C przez 15 min.
    4. Rozdzielić bulion do probówek stożkowych o pojemności 50 mL, wlewając do każdej 40-50 mL roztworu. Bulion przechowywać w temperaturze 4 °C do momentu użycia.
      UWAGA: Aby zapobiec kontaminacji, wysterylizować rozdzielone porcje bulionu światłem UV przez 15 min.
  2. Kultura bakteryjna
    1. Za pomocą pętli zaszczepić roztwór stokowy MSRA lub P. aeruginosa na płytce agarowej. Płytkę inkubować w temperaturze 37 °C w inkubatorze wytrząsającym przez 24 h.
    2. Za pomocą pętli przenieść jedną kolonię bakterii do 10 mL bulionu. Bulion inkubować w temperaturze 37 °C w inkubatorze wytrząsającym przy 200 rpm przez 24 h.
    3. Powtórzyć kroki 2.2.1-2.2.2 jeszcze raz, aby uzyskać bakterie o tych samych charakterystykach.
    4. Po 24 h przeprowadzić dziesięciokrotne rozcieńczenia seryjne roztworu bakteryjnego przy użyciu sterylnej wody destylowanej. 100 µL rozcieńczonej zawiesiny bakteryjnej nanieść na płytkę agarową i rozprowadzić za pomocą rozprowadzacza. Płytkę inkubować w temperaturze 37 °C w inkubatorze wytrząsającym przez 24 h.
      UWAGA: Stopień rozcieńczenia zależy od rodzaju bakterii. Należy dążyć do uzyskania mniej niż 100 kolonii na płytce agarowej.
    5. Po 24 h inkubacji policzyć kolonie bakteryjne, aby wyznaczyć liczbę jednostek tworzących kolonie (CFU), korzystając z równania (1).
      Wzór obliczania CFU bakterii, przedstawiający czynnik rozcieńczenia i liczenie kolonii w analizie mikrobiologicznej. (1)
    6. Powtórzyć kroki 2.2.4-2.2.5 co najmniej 3 razy, aby potwierdzić, czy CFU bakterii pozostaje względnie stałe.

3. Test przeciwbakteryjny z wykorzystaniem metody mikrorozcieńczeń w pożywce płynnej

  1. Dzień 1) Za pomocą pętli szczepionkowej przenieś jedną kolonię bakterii z płytki agarowej do 10 mL pożywki płynnej. Inkubuj pożywkę w temperaturze 37 °C w inkubatorze wytrząsowym przy 200 rpm przez 24 h.
  2. Dzień 2) Przygotuj mieszaninę nanokompozytu GO/Cu w co najmniej trzech stężeniach, wykorzystując fosforowy bufor soli DPBS (Dulbecco's phosphate-buffered saline). Poddaj zawiesinę nanokompozytu GO/Cu sonikacji, aż nanokompozyty GO/Cu zostaną dobrze rozproszone w DPBS.
    UWAGA: W niniejszym protokole testowano stężenia mieszaniny nanokompozytu GO/Cu wynoszące 500, 250, 125 i 62,5 µg/mL.
  3. Przygotuj roztwory kontrolne. Kontrolą negatywną jest DPBS, a kontrolą pozytywną 1% roztwór penicyliny/streptomycyny w DPBS, który wyeliminuje bakterie.
  4. Dodaj 100 µL zawiesiny nanokompozytu GO/Cu oraz roztwory kontrolne do płytek 96-dołkowych. Wszystkie próbki nanieś w trzech powtórzeniach.
    UWAGA: Przed naniesieniem na bakterie wysterylizuj próbki promieniowaniem UV przez 15 min.
  5. Na podstawie liczby CFU po 24 h inkubacji rozcieńcz zawiesinę bakteryjną za pomocą pożywki TSB do stężenia 1 × 106 CFU/mL.
    UWAGA: Początkowe stężenia zawiesiny kultur MRSA i P. aeruginosa w naszym badaniu, zgodnie z krokiem 2.2.5, wynosiły odpowiednio 4,5 × 109 CFU/mL oraz 3 × 109 CFU/mL. Stężenia bakterii 1 × 106 CFU/mL uzyskano poprzez odpowiednio 4500-krotne i 3000-krotne rozcieńczenie kultur.
  6. Zaszczep 100 µL rozcieńczonej zawiesiny bakteryjnej o stężeniu 1 × 106 CFU/mL do dołków z próbkami na płytkach 96-dołkowych. Inkubuj płytki 96-dołkowe w temperaturze 37 °C w inkubatorze wytrząsowym przy 200 rpm przez 24 h.
    UWAGA: Końcowe stężenie bakterii po zmieszaniu ze 100 µL próbki wynosi 5 × 105 CFU/mL.
  7. Dzień 3) Energicznie wymieszaj próbki i zawiesiny bakteryjne za pomocą końcówki mikropipety 200 µL. Wykonaj dziesięciokrotne rozcieńczenia seryjne mieszaniny próbki i bakterii w sterylnej wodzie destylowanej.
    UWAGA: Stopień rozcieńczenia zależy od rodzaju bakterii. Należy dążyć do uzyskania mniej niż 100 kolonii na płytce agarowej.
  8. Nanieś 100 µL rozcieńczonej zawiesiny bakteryjnej na płytkę agarową i rozprowadź ją za pomocą rozwieracza. Inkubuj płytkę agarową w temperaturze 37 °C w inkubatorze wytrząsowym przez 24 h.
  9. Dzień 4) Policz kolonie bakteryjne i wyznacz wartości CFU, aby potwierdzić działanie przeciwbakteryjne nanokompozytów GO/Cu, korzystając z równania (2).
    Procent żywych bakterii, wzór na stosunek CFU, równanie matematyczne dla analizy mikrobiologicznej. (2)

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

W celu potwierdzenia powstania nanokompozytów GO/Cu przeprowadzono analizy za pomocą transmisyjnej mikroskopii elektronowej (TEM), skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM) oraz spektroskopii rentgenowskiej z dyspersją energii (EDS). Rysunek 1A,B pokazuje, że na arkuszach GO wyrosły heterogeniczne nanocząstki Cu. Jak pokazano na Rysunku 1C, mapowanie EDS potwierdziło, że cząstki na arkuszu GO były nanocząstkami Cu.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

W niniejszym artykule przedstawiamy tanią i prostą metodę przygotowania nanoarkuszy GO osadzonych nanocząstkami Cu, która byłaby potencjalnie skuteczną metodą zwalczania bakterii opornych na antybiotyki. Krytycznym etapem syntezy nanokompozytów GO/Cu jest dokładne zdyspergowanie GO i CuCl2 w roztworze i utrzymanie podwyższonej temperatury podczas ich mieszania. Ponadto etap redoks musi być przeprowadzony szybko, ponieważ czynnik redukujący powoduje reakcję redukcji, gdy tylko wejdzie w kontakt z wodą. Ogólnie ...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Dr Jonghoon Choi jest dyrektorem generalnym/założycielem, a dr Yonghyun Choi jest dyrektorem technicznym Feynman Institute of Technology w Nanomedicine Corporation.

Podziękowania

Te badania były wspierane przez grant badawczy Uniwersytetu Chung-Ang w 2022 roku (podczas urlopu naukowego profesora Jonghoon Choi). Badania te były również wspierane przez Program Badań Podstawowych za pośrednictwem Narodowej Fundacji Badawczej Korei (NRF), finansowany przez Ministerstwo Edukacji (No. RS-2023-00275006) oraz grant Koreańskiego Instytutu Przemysłu i Technologii Środowiska (KEITI) finansowany przez Ministerstwo Środowiska Korei (MOE) (nr 2022002980003). Kliniczne MRSA i P. aeruginosa uzyskano ze Szpitala Uniwersyteckiego Chung-Ang.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Antybiotykowo-przeciwgrzybiczoGibco15240062
Kliniczne szczepy bakteryjne MDR Szpital Uniwersytecki Chung-Ang (Seul, Korea Południowa)
Dwuwodny chlorek miedzi(II)Duksan10125-13-0
Skaningowy mikroskop elektronowy z emisją w polu (FE-SEM)Carl ZeissSIGMA
Tlenek grafenuSigma796034
Bowodorek soduSigma71320
Transmisyjna mikroskopia elektronowa Panie przewodniczący, panie i panowie!JEOLJEM-2100
Tryptyczny agar sojowyBD difco236950
Tryptyczny bulion sojowyBD difco211825

Bibliografia

  1. Doron, S., Gorbach, S. L. Bacterial infections: Overview. International Encyclopedia of Public Health. , 273-282 (2008).
  2. Van Duin, D., Paterson, D. L. Multidrug-resistant bacteria in the community: An update. Infect Dis Clin North Am. 34 (4), 709-722 (2020).
  3. Blair, J. M. A., Webber, M. A., Baylay, A. J., Ogbolu, D. O., Piddock, L. J. V. Molecular mechanisms of antibiotic resistance. Nat Rev Microbiol. 13 (1), 42-51 (2015).
  4. Sánchez-López, E., et al. Metal-based nanoparticles as antimicrobial agents: An overview. Nanomaterials (Basel). 10 (2), 292(2020).
  5. Makabenta, J. M. V., et al. Nanomaterial-based therapeutics for antibiotic-resistant bacterial infections. Nat Rev Microbiol. 19 (1), 23-36 (2021).
  6. Liang, X., Govindaraju, S., Yun, K. Dual applicability of polyaniline coated gold nanorods: A study of antibacterial and redox activity. BioChip J. 12 (2), 137-145 (2018).
  7. Niño-Martínez, N., Salas Orozco, M. F., Martínez-Castañón, G. A., Torres Méndez, F., Ruiz, F. Molecular mechanisms of bacterial resistance to metal and metal oxide nanoparticles. Int J Mol Sci. 20 (11), 2808(2019).
  8. Kim, J., Choi, Y., Park, J., Choi, J. Gelatin-gallic acid microcomplexes release go/cu nanomaterials to eradicate antibiotic-resistant microbes and their biofilm. ACS Infect Dis. 9 (2), 296-307 (2023).
  9. Jang, J., et al. Development of antibiofilm nanocomposites: Ag/cu bimetallic nanoparticles synthesized on the surface of graphene oxide nanosheets. ACS Appl Mater Interfaces. 12 (32), 35826-35834 (2020).
  10. Jang, J., Choi, Y., Tanaka, M., Choi, J. Development of silver/graphene oxide nanocomposites for antibacterial and antibiofilm applications. J Ind Eng Chem. 83, 46-52 (2020).
  11. Bankier, C., et al. Synergistic antibacterial effects of metallic nanoparticle combinations. Sci Rep. 9 (1), 16074(2019).
  12. Mendes, C. R., et al. Antibacterial action and target mechanisms of zinc oxide nanoparticles against bacterial pathogens. Sci Rep. 12 (1), 2658(2022).
  13. Yoon, S., et al. Biologically benign multi-functional mesoporous silica encapsulated gold/silver nanorods for anti-bacterial applications by on-demand release of silver ions. BioChip J. 13 (4), 362-369 (2019).
  14. Slavin, Y. N., Asnis, J., Häfeli, U. O., Bach, H. Metal nanoparticles: Understanding the mechanisms behind antibacterial activity. J Nanobiotechnology. 15 (1), 65(2017).
  15. Ismail, N. A., et al. Sonochemical synthesis of a copper reduced graphene oxide nanocomposite using honey and evaluation of its antibacterial and cytotoxic activities. Front Mol Biosci. 9, 995853(2022).
  16. Tu, Y., et al. Remarkable antibacterial activity of reduced graphene oxide functionalized by copper ions. Adv Funct Mater. 31 (13), 2008018(2021).
  17. Li, M., et al. Toward a molecular understanding of the antibacterial mechanism of copper-bearing titanium alloys against staphylococcus aureus. Adv Healthc Mater. 5 (5), 557-566 (2016).
  18. Yang, Z., et al. Long-term antibacterial stable reduced graphene oxide nanocomposites loaded with cuprous oxide nanoparticles. J Colloid Interface Sci. 533, 13-23 (2019).
  19. Yang, Y., et al. Graphene oxide/copper nanoderivatives-modified chitosan/hyaluronic acid dressings for facilitating wound healing in infected full-thickness skin defects. Int J Nanomedicine. 15, 8231-8247 (2020).
  20. Mao, M., et al. Graphene oxide-copper nanocomposites suppress cariogenic streptococcus mutans biofilm formation. Int J Nanomedicine. 16, 7727-7739 (2021).
  21. Ravikumar, V., Mijakovic, I., Pandit, S. Antimicrobial activity of graphene oxide contributes to alteration of key stress-related and membrane bound proteins. Int J Nanomedicine. 17, 6707-6721 (2022).
  22. Afreen, G., Shoeb, M., Upadhyayula, S. Effectiveness of reactive oxygen species generated from rgo/cds qd heterostructure for photodegradation and disinfection of pollutants in waste water. Mater Sci Eng C. 108, 110372(2020).
  23. Yang, F., et al. Fabrication of graphene oxide/copper synergistic antibacterial coating for medical titanium substrate. J Colloid Interface Sci. 638, 1-13 (2023).
  24. Rajapaksha, P., et al. Antibacterial properties of graphene oxide-copper oxide nanoparticle nanocomposites. ACS Appl Bio Mater. 2 (12), 5687-5696 (2019).
  25. Sachdeva, C., Satyamoorthy, K., Murali, T. S. Microbial interplay in skin and chronic wounds. Curr Clin Microbiol Rep. 9 (3), 21-31 (2022).
  26. Ramos, M. K., Zarbin, A. J. G. Graphene/copper oxide nanoparticles thin films as precursor for graphene/copper hexacyanoferrate nanocomposites. Appl Surf Sci. 515, 146000(2020).
  27. Fivenson, E. M., et al. A role for the gram-negative outer membrane in bacterial shape determination. PNAS. 120 (35), e2301987120(2023).
  28. Wu, C., et al. Copper-containing mesoporous bioactive glass scaffolds with multifunctional properties of angiogenesis capacity, osteostimulation and antibacterial activity. Biomater. 34 (2), 422-433 (2013).
  29. Zhang, W., et al. Graphene oxide-copper nanocomposite-coated porous cap scaffold for vascularized bone regeneration via activation of hif-1α. Adv Healthc Mater. 5 (11), 1299-1309 (2016).
  30. Labauve, A. E., Wargo, M. J. Growth and laboratory maintenance of pseudomonas aeruginosa. Curr Protoc Microbiol. 25 (1), 6E.1.1-6E.1.8 (2012).
  31. Lin, J., et al. The icmf3 locus is involved in multiple adaptation- and virulence-related characteristics in pseudomonas aeruginosa pao1. Front Cell Infect Microbiol. 5, 70(2015).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Nanokompozyty przeciwbakteryjneoporność na antybiotykinanokompozyty metalicznetransmisyjna mikroskopia elektronowaskaningowa mikroskopia elektronowagronkowiec złocisty oporny na metycylinęPseudomonas aeruginosametoda mikrorozcieńczeń w pożywce płynnej
Wytwarzanie antybakteryjnych nanokompozytów tlenek grafenu i miedź
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.