Technika ta pozwala na realizację nieustabilizowanych złamań żuchwy w modelu mysim przy minimalnym otwartym podejściu w krótkim czasie zabiegu (około 10 minut lub mniej). Ta krótkotrwała procedura ogranicza ryzyko zachorowalności i śmierci zwierząt, zwłaszcza u małych zwierząt, takich jak myszy. W celu uzyskania porównywalnych wyników w analizie procesu naprawy kości śródchrzęstnej należy zwrócić szczególną uwagę na wykonywanie złamań żuchwy w tym samym kierunku bez nieprawidłowego podziału kąta żuchwy, ponieważ to niepożądane działanie może nieprawidłowo zwiększyć objętość kalusa kostnego i opóźnić okres konsolidacji. Ten protokół złamania żuchwy nie wpływa na wzrost siekaczy żuchwy po operacji. Aby poprawić skuteczność tego protokołu, radzimy eksperymentatorowi, aby najpierw ćwiczył na uśpionych zwierzętach w podobnym wieku i przeprowadził sekcję zwłok natychmiast po złamaniu żuchwy, aby w razie potrzeby bezpośrednio uwidocznić kierunek złamania.
Mezenchymalne komórki progenitorowe migrujące z sąsiednich mięśni do kalusa przyczyniają się do naprawy kości6. Wykazano, że uszkodzenia okostnej i mięśni wpływają na konsolidację kości 5,6. Ponadto rozległe odcinki mięśniowe prowadzą do zwiększonego ryzyka krwawienia i mogą prowadzić do infekcji pooperacyjnej. Piezochirurgia została w dużej mierze rozwinięta w dziedzinie chirurgii kości twarzoczaszki; Doniesiono, że ma niższe wskaźniki uszkodzeń tkanek miękkich i bólu pooperacyjnego w porównaniu z konwencjonalnymi osteotomiami 7,9. Aby zminimalizować uszkodzenie mięśnia żwacza i okostnej, zastosowaliśmy piezochirurgię, aby zainicjować złamanie na dolnej granicy żuchwy i zakończyliśmy złamanie nożyczkami na górnym poziomie ramusa, aby uniknąć rozległego odcinka mięśnia żwacza. Oznacza to kontrolowanie położenia tylnej granicy żuchwy i wcięcia dziobiastego przed złamaniem górnej części ramusa nożycami. Nie napotkaliśmy żadnych trudności w dokończeniu złamania za pomocą małych prostych nożyczek po rozpoczęciu go piezochirurgią na dolnej krawędzi żuchwy. Doświadczyliśmy tej procedury u dorosłych myszy o różnym pochodzeniu genetycznym (C57BL/6J, CD1 (wyniki nie pokazane)), o różnej gęstości kości i rozmiarach żuchwy (prognatyzm, mikrognacja). Zalecamy jednak sprawdzenie, czy długość nożyczek jest odpowiednia do złamania górnego ramienia tylko raz, aby uniknąć nieprawidłowych pęknięć.
Ryzyko krwawienia jest zminimalizowane w tej procedurze dzięki temu minimalnemu otwartemu podejściu. W przypadku nadmiernego krwawienia, które może wystąpić podczas uniesienia mięśni, krótkie uciskanie pola operacyjnego gazą zatrzymuje krwawienie. Potencjalne ryzyko zakażenia miejsca operacyjnego może wystąpić w przypadku złamania zęba trzonowego, gdy złamanie żuchwy jest umieszczone zbyt z przodu; Ten niekorzystny efekt można wykryć na pooperacyjnych bocznych zdjęciach rentgenowskich. W takim przypadku zwierzę musi zostać wykluczone z badania. Pooperacyjne zakażenie miejsca operacji może być również spowodowane krwiakiem; Można temu zapobiec, wykonując oddzielone szwy skórne, umożliwiające spontaniczną ewakuację, gdy przed operacją wystąpi nieprawidłowe krwawienie. Znieczulenie ogólne izofluranem w porównaniu z wstrzyknięciem dootrzewnowym pozwala uniknąć nadmiernej śmiertelności związanej z niekorzystnymi skutkami urazowymi wstrzyknięć dootrzewnowych. Z naszego doświadczenia wynika, że nie zaobserwowaliśmy żadnej śmierci zwierząt bezpośrednio związanej ze znieczuleniem ogólnym izofluranem.
Myszy mogą wykazywać pooperacyjne zmniejszenie spożycia pokarmu. W przypadku niewystarczającego spożycia pokarmu lub niewystarczającego przyrostu masy ciała do żelu można dodać przesianą karmę w proszku. Aby poprawić pooperacyjne pobieranie pokarmu, zalecamy podawanie suplementu diety w żelu z krokietami co najmniej 1 tydzień przed zabiegiem w celu zakwaterowania. Zalecamy wykonanie dodatkowych zdjęć rentgenowskich podczas obserwacji (co tydzień, podczas obserwacji) oraz w momencie ofiarowania w celu oceny potencjalnego przemieszczenia złamania. W stanach niepatologicznych konsolidacja kości następuje całkowicie 4 tygodnie po złamaniu.
Kilku autorów opisało różne protokoły dla nieustabilizowanych złamań żuchwy u myszy 3,10,11. Instrumenty używane do wykonywania osteotomii mogą być różne, a mianowicie wiertła, pęsety chirurgiczne itp. Jednak stosowanie wierteł może prowadzić do większych zaników kości i urazów tkanek miękkich. Zgodnie z naszą najlepszą wiedzą, ta procedura nieustabilizowanych złamań żuchwy jest pierwszą, która łączy piezochirurgię i nożyczki w celu zakończenia osteotomii. Technika ta ma tę zaletę, że zachowuje tkanki miękkie, umożliwiając jednocześnie precyzyjną osteotomię przy minimalnym utracie kości.
Jeśli chodzi o wszystkie techniki, ta metoda ma pewne ograniczenia. Woleliśmy wykonać złamanie nożyczkami po zainicjowaniu go za pomocą wkładki piezoelektrycznej chirurgicznej, aby uniknąć przedłużonego odcinka mięśnia żwacza i uszkodzenia okostnej, które mogą nasilić potencjalne opóźnienie konsolidacji i/lub powstanie choroby zwyrodnieniowej stawów. Jednak technika ta zakłada kontrolowanie położenia wcięcia dziobiastego bez całkowitej wizualizacji ramusa żuchwy w celu wykonania złamania w tym samym kierunku. W związku z tym oczekuje się krzywej uczenia się, w zależności od doświadczenia chirurgicznego. Ponadto kierunek złamania żuchwy na zdjęciach rentgenowskich może być trudny do uwidocznienia w zależności od urządzenia rentgenowskiego. Nie użyliśmy mikrotomografii komputerowej in vivo , aby potwierdzić kierunek złamania, ponieważ mogłoby to zagrozić rekonwalescencji myszy ze względu na wydłużony czas trwania znieczulenia ogólnego.
Badanie procesu naprawy kości śródchrzęstnej wiąże się z realizacją nieustabilizowanych złamań, co pozwala na lepsze zrozumienie procesu naprawy kości. Ten krok jest konieczny, jeśli chcemy rozważyć badania przedkliniczne na modelach mysich z wadami naprawy kości w celu opracowania nowych zastosowań klinicznych w leczeniu wadliwej naprawy kości i choroby sudrogowej u pacjentów w kontekście chorób genetycznych lub w przypadku następstw pourazowych lub ponowotworowych.