Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Strategie oceny zachowań podobnych do autystycznych u myszy

3.1K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/66846

⸱

20 września 2024

 ,  ,  ,  , 
1Rosalind and Morris Goodman Cancer Institute, Department of Biochemistry, McGill University

W tym artykule

Podsumowanie

Modele gryzoni są cennymi narzędziami do badania podstawowych zachowań związanych z zaburzeniami ze spektrum autyzmu (ASD). W tym artykule wyjaśniamy dwa testy behawioralne do modelowania podstawowych cech ASD u myszy: samopielęgnację, który ocenia powtarzające się zachowanie, oraz trzykomorowy test interakcji społecznych, który dokumentuje upośledzenia społeczne.

Streszczenie

Zaburzenie ze spektrum autyzmu (ASD) jest neurobiologicznie złożonym schorzeniem o niejednorodnej etiologii genetycznej. Klinicznie ASD diagnozuje się na podstawie zaburzeń komunikacji społecznej oraz restrykcyjnych lub powtarzających się zachowań, takich jak machanie rękami lub ustawianie przedmiotów. Te wzorce zachowań można wiarygodnie zaobserwować w modelach mysich z mutacjami genetycznymi związanymi z ASD, co czyni je bardzo przydatnymi narzędziami do badania mechanizmów komórkowych i molekularnych leżących u podstaw ASD. Zrozumienie, w jaki sposób zmiany genetyczne wpływają na neurobiologię i zachowania obserwowane w ASD, ułatwi opracowanie nowych ukierunkowanych związków terapeutycznych w celu złagodzenia podstawowych zaburzeń behawioralnych. Nasze laboratorium zastosowało kilka protokołów obejmujących dobrze opisane procedury szkoleniowe i testowe, które odzwierciedlają szeroki zakres deficytów behawioralnych związanych z ASD. W tym miejscu szczegółowo opisujemy dwa testy do badania podstawowych cech ASD w modelach mysich: samouwodzenie (miara powtarzających się zachowań) i trzykomorowy test interakcji społecznej (miara podejścia do interakcji społecznych i preferencji dla nowości społecznych).

Wprowadzenie

Zaburzenie ze spektrum autyzmu (ASD) to rozwojowe zaburzenie mózgu, które objawia się upośledzeniem komunikacji społecznej lub interakcji oraz ograniczonymi, powtarzającymi się wzorcami zachowań lub zainteresowań1,2. W 2022 roku na całym świecie u około 1 na 100 dzieci zdiagnozowano ASD3. Według Centers for Disease Control and Prevention (CDC, USA) częstość występowania ASD wzrosła o 30% od 2008 roku i jest ponad 2-krotna od 2000 roku4,5. Osoby z ASD mogą również wykazywać choroby współistniejące, takie jak niepełnosprawność intelektualna (ID) (35,2%, IQ ≤ 70), zespół nadpobudliwości psychoruchowej z deficytem uwagi (ADHD) (50%-70%) i inne zespoły genetyczne2,4,6.

Wykorzystanie modeli zwierzęcych w badaniach nad ASD, zwłaszcza gryzoni, dostarczyło istotnych informacji na temat wpływu różnych czynników środowiskowych, w tym diety, leków, ćwiczeń i wzbogacania7,8,9,10, a także mutacje genetyczne, takie jak Shank, Fmr1, Mecp2, Pten i Tsc mutant11,12,13, o objawach ASD. Modele mysie są powszechnie używane do badania ASD ze względu na ich społeczny charakter i wspólne cechy genetyczne, biochemiczne i elektrofizjologiczne z ludźmi. Na przykład, poprzez delecję określonego genu (takiego jak Shank3, Fmr1, Cntnap2 i Pten), nieprawidłowe zachowania społeczne i powtarzalne mogą zostać podsumowane, zapewniając silną trafność badania14,15,16. W tym miejscu udostępniamy protokoły do badania podobieństw między zwierzęcymi modelami genetycznymi a ludzkimi objawami ASD17. Opisujemy samodzielny test samopielęgnacji i trzykomorowy test interakcji społecznych, które odzwierciedlają dwa podstawowe objawy u pacjentów z ASD, a mianowicie odpowiednio ograniczone, powtarzające się wzorce zachowań i zaburzenia interakcji społecznych (komunikacji).

Na podstawie DSM-V (Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders of the American Psychiatric Association 5th Edition) i ICD-11 (International Classification of Diseases 11th Revision), pacjenci z ASD angażują się w ograniczone, powtarzające się i stereotypowe wzorce zachowań, w szczególności niefunkcjonalne powtarzalne zachowania skoncentrowane na ciele (BFRB), takie jak kołysanie, stimming, obgryzanie paznokci, wyrywanie włosów, skubanie skóry lub chodzenie na palcach18, 19. U zwierząt powtarzające się zachowanie objawia się długotrwałym i powtarzającym się samodzielnym pielęgnacją. Pielęgnacja jest jedną z najczęstszych wrodzonych czynności wśród gryzoni, przy czym około 40% czasu czuwania spędzają na pielęgnacji20,21. Myszy instynktownie liżą skórę lub futro w celu usunięcia obcych zabrudzeń z powierzchni ciała, co służy utrzymaniu czystości ciała, zapobieganiu urazom, usuwaniu pasożytów i regulowaniu temperatury. Uwodzenie dzieli się na dwa rodzaje: uwodzenie społeczne (allo-grooming), polegające na uwodzeniu przez inną mysz i samodzielne uwodzenie. Samouwodzenie pokazuje stereotypowy i konserwatywny wzorzec sekwencjonowania składający się z czterech etapów (głównie dyskretnych i niesekwencyjnych)22,23. W etapie I (udar eliptyczny) myszy rozpoczynają pielęgnację, najpierw liżąc obie łapy, a następnie pielęgnując łapami okolice nosa. W etapie II (udar jednostronny) myszy używają łap do asymetrycznego wycierania twarzy. W stadium III (udar obustronny) myszy symetrycznie wycierają głowę i uszy. W stadium IV (lizanie ciała) myszy przechodzą do lizania ciała, przesuwając głowę do tyłu i mogą rozszerzyć pielęgnację na ogon i narządy płciowe. Kiedy myszy są indywidualnie umieszczane w przezroczystej klatce, zachowania związane z samoopieką można łatwo rozpoznać i zaobserwować. Myszy zwiększają zachowania związane z samoopieką w obliczu stresu, bólu lub zakłóceń społecznych, co sprawia, że test samopielęgnacji ma kluczowe znaczenie podczas badań nad zaburzeniami neurologicznymi22. Różne mysie modele ASD, w tym te z mutacjami genetycznymi (takimi jak Fmr1−/y, Shank3B−/-, NL1−/−), interwencje farmakologiczne (takie jak DO34, PolyI:C) i specyficzne szczepy wsobne (takie jak BTBR i C58/J), wykazały nadmierne, powtarzające się zachowania związane z samoopieką24,25,26,27.

Zmiany w zachowaniu społecznym służą jako jedno z kryteriów oceny ASD. Zgodnie z DSM-V i ICD-11, pacjenci z ASD wykazują trwałe zaburzenia komunikacji społecznej i interakcji społecznych18,19. Mogą one objawiać się deficytami komunikacji werbalnej i niewerbalnej (tj. nieprawidłowym kontaktem wzrokowym, gestami i wyrazem twarzy), brakiem dzielenia się zainteresowaniami i emocjami z innymi, nieświadomością sygnałów kontekstu społecznego lub trudnościami w nawiązywaniu relacji. Zgodnie z objawami upośledzenia społecznego zaprojektowano i zoptymalizowano różne zadania behawioralne do oceny interakcji społecznych u myszy, takie jak test bezpośredniej interakcji społecznej, trzykomorowe podejście społeczne i test preferencji dla nowości społecznych oraz analiza wokalizacji ultradźwiękowych (USV)16,28. Trzykomorowy test interakcji społecznych jest szeroko stosowanym eksperymentem do oceny zachowań związanych z ASD17,29,30,31. Aparatura składa się z trzech połączonych ze sobą komór; Lewa i prawa komora zawierają drucianą klatkę, która może być pusta lub zajęta przez mysz, umożliwiając mysz testową swobodną interakcję z obiema klatkami. Dwa pomiary pomagają ocenić różne aspekty zachowań społecznych u myszy testowej podczas eksperymentu trójkomorowego. Po pierwsze, mysz testowa jest oceniana za czas spędzony na interakcji z pustą klatką (nowym obiektem) w porównaniu z klatką, która zawiera nową mysz. Ta część zadania zapewnia wgląd w towarzyskość myszy. Następnie nieznaną mysz umieszcza się w pustej wcześniej drucianej klatce. Różnica czasu w interakcji myszy testowej między myszą nieznaną a znaną mierzy preferencję dla nowości społecznych. W tej części zadania mysz kontrolna woli wchodzić w interakcję z nieznaną myszą niż z wcześniej napotkaną, która była już obecna w części testu dotyczącej towarzyskości. Deficyty w interakcjach społecznych i zmniejszona motywacja do interakcji z nowymi myszami są na ogół spotykane w mysim modelu ASD. Test trójkomorowy okazał się solidny od czasu jego wynalezienia. Został wykorzystany do badania fenotypów społecznych w różnych mysich modelach ASD, w tym Fmr1−/−, Shank3B−/-, Cntnap2−/− i szczepu wsobnego BTBR32,33,34,35,36.

Oba testy wykorzystują naturalnie występujące, spontaniczne zachowanie myszy jako wartościowe narzędzia do badania zachowań podobnych do ASD. Ponieważ są one uważane za testy o niskim poziomie stresu, możliwe jest przeprowadzenie obu testów w tej samej grupie myszy w celu zmierzenia zachowania podobnego do ASD, przy czym najpierw przeprowadza się test samodzielnej pielęgnacji, a w kolejnych dniach trzykomorowy test interakcji społecznych. Dostarczane przez nas protokoły stanowią niezbędne narzędzie do oceny zachowań podobnych do ASD i opracowywania nowych metod terapeutycznych29,30,31. W ostatecznym rozrachunku przyczyniłyby się one do poprawy wyników leczenia osób dotkniętych ASD.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie procedury i eksperymenty z udziałem zwierząt zostały zatwierdzone przez przepisy Komitetu ds. Opieki nad Zwierzętami (FACC), które są zgodne z wytycznymi ustanowionymi przez Kanadyjską Radę ds. Opieki nad Zwierzętami, Komitet Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu McGill oraz Biuro ds. Dobrostanu Zwierząt Laboratoryjnych NIH (OLAW). Numer ubezpieczenia Public Health Service (PHS) dla Uniwersytetu McGill to F-16-00005(A5006-01).

1. Przygotowanie zwierząt

  1. Myszy testowe: Wybierz 2-3 miesięczne (8 do 13 tygodni) samce i/lub samice myszy. Wszystkie myszy użyte w eksperymentach pochodzą z C57BL/6J. W przypadku zachowań samopielęgnacyjnych i trzykomorowych testów interakcji społecznych, ogólnie dopuszczalny zakres myszy na grupę sugerowany to n = 10-15, przy minimum n = 8.
    1. W przypadku myszy modyfikowanych genetycznie zawsze dodawaj rodzeństwo z miotu typu dzikiego jako kontrolę. Dopasuj grupę kontrolną do grupy eksperymentalnej pod względem pochodzenia genetycznego, wieku, płci i warunków mieszkaniowych. Homozygotyczne myszy transgeniczne użyte w tym badaniu mają normalną wielkość i nie wykazują żadnych poważnych nieprawidłowości fizycznych.
      UWAGA: W niektórych bardziej złożonych przypadkach badacze mogą być zainteresowani oceną więcej niż dwóch genotypów (tj. typu dzikiego, heterozygotycznego, homozygotycznego), badaniem skutków leków (tj. leczeniem, leczeniem nośnikiem, nieleczeniem) lub porównywaniem samców i kobiet. Podczas pracy z samicami myszy należy wziąć pod uwagę ich cykle rujowe. Podczas gdy cykle rujowe u samic nie wpływają znacząco na zachowania związane z samoopieką, badania wykazały, że cykle te mogą wpływać na podejście społeczne i preferencje dotyczące nowości społecznych37,38.
  2. Obce myszy: Użyj co najmniej 8 myszy typu dzikiego do testu trzykomorowego. Użyj 2 klatek, 4 myszy w klatce, pasujących do wieku, płci i tego samego tła genetycznego (C57BL / 6J) myszy testowych. Upewnij się, że obce myszy nie miały wcześniejszej interakcji z myszami testowymi.
  3. Obudowa: Grupuj 3-5 myszy w klatce domowej (plastikowe klatki myszy 71/2" szer. x 111/2" dł. x 5" wys.) i utrzymuj 12-godzinny cykl światła/ciemności. Zapewnij myszom dostęp do pożywienia i wody w klatce ad libitum.
    UWAGA: W pomieszczeniach mieszkalnych w tym badaniu światła włączają się o godzinie 7:00 rano.
  4. Przenieś myszy do ośrodka badań behawioralnych na zwierzętach na co najmniej 1 tydzień przed eksperymentami39,40.
  5. Obsługa i testowanie behawioralne: Przeprowadź test o stałej porze dnia. Dostosuj czas rozpoczęcia w zależności od cyklu oświetlenia w pomieszczeniach z obudową myszy. Najpierw przenieś myszy do pokoju testowego i pozwól im przyzwyczaić się do pokoju testowego przez co najmniej 30 minut przy przyciemnionym oświetleniu przed rozpoczęciem testów behawioralnych.
    UWAGA: W tym badaniu eksperymenty na myszach były rutynowo przeprowadzane w godzinach 7:00-15:00 (w stosunku do 7:00 rano światła włączonego i 19:00 wyłączonego). Stąd faktyczne rozpoczęcie testu zachowania następuje około godziny 8 rano.

2. Przygotowanie pomieszczenia i sprzętu

  1. Przygotuj mały pokój o całkowitej powierzchni podłogi od 16 do 36 stóp (5-12 m2; 6 m2 pomieszczenia w tym badaniu). Utrzymuj stałą temperaturę, oświetlenie (regulowane przyciemnione oświetlenie) i poziom hałasu (najlepiej dźwiękoszczelny) dla wszystkich eksperymentów.
    1. W przypadku stosowania lamp stojących (żarówki 23 W, 120 V) należy je umieścić w symetrycznych miejscach i z każdej strony, w odległości co najmniej 1 m od aparatu trzykomorowego, tak aby obie boczne komory były równomiernie oświetlone.
  2. Umieść urządzenie na przenośnym białym stole. Do eksperymentu z samodzielną pielęgnacją użyj czystych, przezroczystych klatek (plastikowe klatki myszy 71/2" szer. x 111/2" dł. x 5" wys.); Użyj jednej klatki na mysz testową. Wypełnij klatki około 1 cm świeżej ściółki bez materiału do gniazdowania. Użyj tego samego rodzaju ściółki, co w klatce domowej (tutaj świeża ściółka z kolb kukurydzy ([1/4" ściółka z kolb kukurydzy]).
    UWAGA: Klatki powinny być tego samego rozmiaru co klatki domowe, z pokrywą filtra umieszczoną na górze, ale bez metalowej siatki (która jest zwykle używana do przechowywania butelek i dostarczania żywności).
  3. Do eksperymentu społecznego użyj trzykomorowego aparatu set41. Każda komora ma wymiary 20 cm x 40 cm x 22 (h) cm i jest otoczona ścianami z pleksiglasu. Każda komora boczna jest dostępna od środka przez przezroczyste drzwi przesuwne, które można zdjąć (5 x 8 cm). Użyj dwóch drucianych klatek (średnica: 7 cm, wysokość: 15 cm; z pokrywkami (pustymi lub trzymającymi obce myszy). Klatka jest podniesiona i zamknięta gładkimi prętami drucianymi ze stali nierdzewnej (średnica pręta: 3 mm, rozstaw prętów: 7 mm). Nie wliczaj siedzenia na klatkach jako czasu interakcji.
    1. Jeśli w eksperymencie biorą udział zarówno samce, jak i samice myszy, oznacz każdą drucianą klatkę pod kątem jej dedykowanej funkcji, aby zminimalizować zanieczyszczenie krzyżowe.
  4. Ustaw kamery górne lub przednie na statywach do nagrywania wideo. Upewnij się, że kamery są w pełni naładowane i mają wystarczającą ilość miejsca.
  5. Pomiędzy każdym eksperymentem na myszce testowej dokładnie wyczyść trzykomorowy zestaw i druciane klatki bezwonnym środkiem czyszczącym (tutaj, Versa-Clean). Rozcieńczyć środek czyszczący w wodzie z kranu w stosunku 1:40, nałożyć na zabrudzoną powierzchnię i osuszyć powierzchnie ręcznikiem papierowym przed kolejnym testem, aby zminimalizować pozostałości zapachu po poprzedniej myszy.
    UWAGA: Alkohol etylowy (70%) lub inne środki dezynfekujące o nieprzyjemnym zapachu nie powinny być używane do czyszczenia aparatury podczas testów interakcji społecznych, ponieważ mogą wpływać na zachowania społeczne gryzoni.
  6. Używaj żaluzji zapewniających prywatność, takich jak białe plastikowe tablice, które można umieścić wokół urządzenia, aby wyeliminować zewnętrzne sygnały pomieszczenia.
  7. Przygotuj małą tablicę suchościeralną i marker. Zapisz podstawowe informacje na tablicy, w tym numer myszy, tytuł eksperymentu, datę i godzinę eksperymentu.
    UWAGA: Tablica jest prezentowana do kamery na końcu nagrania, aby osoba oceniająca nie znała liczby myszy przed oceną jej zachowania. Badanie zapewniło, że indywidualne zachowania związane z punktacją pozostały ślepe na grupy eksperymentalne, aby zminimalizować potencjalne odchylenia.

3. Obsługa

  1. Wykonuj procedury obchodzenia się z nimi przez trzy kolejne dni przed rozpoczęciem eksperymentów behawioralnych.
  2. Przeprowadzaj sesje manipulacyjne w tym samym pomieszczeniu testowym o stałej porze, najlepiej rano, kiedy myszy są bardziej aktywne.
  3. W każdym z 3 dni przynieś myszy do pokoju testowego i pozostaw je w spokoju na 30 minut w słabym świetle, aby się zaaklimatyzowały.
  4. Po 30 minutowym okresie aklimatyzacji otwórz klatkę i wprowadź do niej rękę w rękawiczce. Pozwól myszom badać dłoń przez 1 minutę.
  5. Delikatnie nabierz myszy na dłoń (lub użyj małej tekturowej rurki, aby je podnieść), trzymając je luźno. Pozwól myszom badać dłoń i nadgarstek przez 1-2 minuty. W przypadkach, gdy mysz jest nerwowa lub agresywna, umieść ją na siatce i pozwól jej się skomponować.
  6. Kontynuuj obsługę, aż mysz stanie się wygodna, pozostając na dłoni. Zawsze zmieniaj rękawice przed włożeniem rąk do następnej klatki.
  7. Po kontakcie z każdą klatką myszy delikatnie umieść je w klatce domowej, a następnie powtórz procedurę.
  8. Załóż nowe rękawice i zajmij się obcymi myszami, gdy wszystkie myszy eksperymentalne i kontrolne zostaną już obsłużone, aby uniknąć wpływu na myszy testowe z zapachowymi wiadomościami.
  9. W ten sam sposób obchodź się z obcymi myszami.
  10. Opcjonalnie: Przyzwyczaj obce myszy do drucianej klatki i trzykomorowego aparatu przez 10-15 min.
    UWAGA: Ta sesja habituacji pomaga zmniejszyć pobudzenie i nieprawidłowe zachowania u obcych myszy podczas testu trójkomorowego. Jednak w przypadku testu trójkomorowego badanie to uwzględnia tylko zachowanie podejścia społecznego (wąchanie) klatki zainicjowane przez mysz testową, niezależnie od tego, czy obca mysz jest obecna, czy nie. Wzajemne wąchanie przez obcą mysz nie jest wiarygodnie obserwowalne w tym teście i dlatego nie jest liczone. Ze względu na to ograniczenie testu trójkomorowego i w celu zminimalizowania zanieczyszczenia krzyżowego sygnałów chemicznych (takich jak zapachy), w tym przypadku obce myszy nie miały wcześniejszego doświadczenia z drucianą klatką i aparaturą przed rozpoczęciem eksperymentu.

4. Metoda 1: Samopielęgnacja powtarzających się zachowań (Rysunek 1A)

  1. Wykonuj wszystkie eksperymenty behawioralne w godzinach 7:00-15:00.
  2. Włącz przyciemnione światła, jak opisano powyżej. Posprzątaj stół i przygotuj pomieszczenie.
  3. Przygotować każdą klatkę testową z cienką warstwą świeżej ściółki (jak opisano w kroku 2.2).
  4. Połóż na stole 1-2 klatki, oddzielone od siebie i otoczenia pomieszczenia białymi plastikowymi klapkami na oczach.
  5. Umieść kamerę przed każdą klatką, aby uchwycić mysz testową.
  6. Przenieś wszystkie myszy do pokoju i przykryj klatki prześcieradłem z tkaniny podczas procesu przenoszenia, aby uniknąć stresu.
  7. Usuń prześcieradło po umieszczeniu myszy w pomieszczeniu testowym, pozostawiając je w pomieszczeniu na co najmniej 30 minut przy przyciemnionym świetle przed rozpoczęciem eksperymentu.
  8. Na początku testu zapisz numer identyfikacyjny myszy i informacje testowe na tablicy (zgodnie z opisem w kroku 2.7).
  9. Rozpocznij nagrywanie i umieść mysz testową w klatce testowej.
  10. Opuść pomieszczenie podczas 20 minutowej sesji nagraniowej.
  11. W przypadku każdego testu należy wziąć pod uwagę pierwsze 10 minut jako przyzwyczajenie. Przez następne 10 minut można obserwować i oceniać zachowania związane z uwodzeniem (patrz punkt 6).
  12. Po 20 minutach powrót do pokoju. Przyłóż tablicę do kamery i zatrzymaj nagrywanie.
  13. Delikatnie umieść mysz testową z powrotem w klatce domowej i powtórz eksperyment.
    UWAGA: Zrównoważ kolejność testów między grupą eksperymentalną i kontrolną, aby zredukować różne wpływy zewnętrzne.
  14. Po zakończeniu eksperymentów wróć myszy do ich pomieszczenia mieszkalnego.

5. Metoda 2: Trzykomorowy test interakcji społecznej (Rysunek 2A)

  1. Wszystkie eksperymenty wykonuj w godzinach 7:00-15:00.
  2. Wyczyść stół i włącz światła (przyciemnione światła).
  3. Umieść trzykomorowy instrument z pleksi na stole otoczonym żaluzjami zapewniającymi prywatność.
  4. Umieść jedną kamerę nad głową, upewniając się, że wszystkie trzy komory znajdują się w ramce nagrywania kamery.
  5. Przenieś test i obce myszy do pokoju. Przykryj klatki prześcieradłem z tkaniny podczas procesu przenoszenia i wyjmij prześcieradło po wejściu do pomieszczenia.
  6. Pozostaw myszy w pokoju na co najmniej 30 minut przy przyciemnionym oświetleniu przed rozpoczęciem eksperymentu.
  7. Przyzwyczajenia
    1. Utrzymuj trzy komory puste w fazie przyzwyczajenia.
    2. Aby rozpocząć, wybierz mysz testową i wpisz numer identyfikacyjny na tablicy.
    3. Następnie delikatnie umieść mysz testową w środkowej komorze, gdy drzwi przesuwne są nadal zamknięte.
    4. Rozpocznij nagrywanie i otwórz drzwi, aby mysz testowa mogła zbadać trzy puste komory.
    5. Wyjdź z pomieszczenia i pozwól myszce testowej przyzwyczaić się do aparatury przez 10 minut.
    6. Po 10 minutach przyzwyczajenia wróć do pokoju. Delikatnie poprowadź mysz testową do środkowej komory i zamknij drzwi przesuwne.
    7. Wyświetl tablicę i zatrzymaj kamerę.
  8. Podejście społeczne (nowatorski obiekt z drucianą klatką kontra nowatorska obca mysz 1)
    1. Umieść dwie klatki druciane w lewej i prawej komorze. Umieść te klatki po przekątnej naprzeciwko siebie w rogach każdej komory, zapewniając 5 cm odstępu od ściany, umożliwiając myszowi testowemu bieganie po klatkach. Dodatkowo upewnij się, że klatki nie są skierowane bezpośrednio w stronę drzwi komory.
    2. Wybierz jedną obcą mysz i wprowadź ją do jednej z drucianych klatek, podczas gdy w drugiej drucianej klatce nie ma żadnej myszy.
    3. Aby rozpocząć test, naciśnij przycisk nagrywania i zdejmij oba drzwi przesuwne. Wyjdź z pokoju.
    4. Pozwól myszowi testowemu zbadać pustą drucianą klatkę w jednej komorze i klatkę zawierającą obcą mysz (nową obcą mysz 1 lub S1) w drugiej komorze przez 10 minut.
    5. Po 10 minutach wróć do pokoju. Wyświetl tablicę w kamerze i zakończ nagrywanie.
    6. Ponownie włóż mysz do środkowej komory i zamknij drzwi łączące.
      UWAGA: Nie wyjmuj drucianych klatek z zestawu po zakończeniu testu podejścia społecznego, aby pozostały w tej samej pozycji podczas całego zadania.
  9. Preferencja dla nowinki społecznej (powieść obca mysz 2 kontra powieść mysz 1)
    1. Umieść nową, nigdy nie napotkaną mysz w poprzednio pustej drucianej klatce (nowatorska obca mysz 2 lub S2).
      UWAGA: S2 musi pochodzić z innej klatki domowej niż S1.
    2. Rozpocznij nagrywanie i otwórz połączone ze sobą drzwi, aby mysz testowa mogła eksplorować aparaturę przez 10 minut.
    3. Wyjdź z pokoju. Mysz testowa będzie eksplorować dwie druciane klatki: jedną z wcześniej napotkaną myszką S1 z etapu podejścia społecznościowego, a drugą z nowo wprowadzoną myszką S2.
    4. Po 10 minutach wróć do pokoju. Wyświetl tablicę w kamerze i zakończ nagrywanie.
    5. Zwróć wszystkie myszy (myszy testowe i nowe nieznajome) do ich domowych klatek.
    6. Dokładnie wyczyść komory i klatki druciane bezzapachowym środkiem dezynfekującym. Upewnij się, że aparat jest wysuszony przed użyciem go do następnego eksperymentu.
    7. Powtórz eksperyment dla wszystkich pozostałych myszy testowych.
      UWAGA: Naprzemiennie umieszczaj klatki z myszami S1 i S2 między lewą i prawą komorą dla różnych myszy testowych. Przeciwwaga zapobiega stronniczej preferencji w stosunku do określonej komory aparatu.
    8. Po przeprowadzeniu testów zwróć myszy do pomieszczenia inwentarskiego.
    9. Pomiędzy każdą częścią testu zatrzymaj i uruchom ponownie kamerę, co spowoduje 3 razy 10 minut filmów na mysz testową.

6. Punktacja i analiza statystyczna

  1. Niezbędny sprzęt
    1. Używaj dwóch stoperów i komputera lub laptopa z następującym oprogramowaniem: Microsoft Excel, GraphPad Prism i innymi programami statystycznymi, takimi jak SPSS, do oceniania, kreślenia wykresów i analizy statystycznej.
  2. Punktacja samodzielna
    UWAGA: Gdy mysz zostanie umieszczona w komfortowym środowisku, można zaobserwować spontaniczne zachowanie związane z samoopieką o niskim poziomie stresu. Zazwyczaj myszy rozpoczynają pielęgnację, liżąc łapy wokół nosa i wąsów (etap I). Po tym mogą nastąpić etapy II i III, w których mysz przystępuje do wycierania łapami całej twarzy i głowy. W etapie IV mysz kontynuuje pielęgnację swojego ciała i lizanie ogona14. Biorąc pod uwagę rzadkość pielęgnacji uszu (etap III) i ogona (etap IV) w ciągu 10-minutowego okresu testowego oraz dążenie do zwiększenia przejrzystości analizy manualnej, zachowania związane z samodzielną pielęgnacją podzielono na dwa podstawowe typy: pielęgnacja rostalna i pielęgnacja ogonowa. Pielęgnacja rostralna obejmuje takie czynności, jak lizanie łap, pielęgnacja nosa oraz dokładne mycie twarzy, uszu i głowy. Pielęgnacja ogonowa obejmuje lizanie części ciała obejmującej takie obszary, jak brzuch, plecy, kończyny tylne i okolice narządów płciowych, a także ogon.
    1. Uważnie obserwuj zachowanie związane z pielęgnacją i nagrywaj ataki. Indywidualna sesja pielęgnacji ma miejsce, gdy mysz angażuje się w pojedynczy przypadek samodzielnej pielęgnacji. Rozważ sesję pielęgnacyjną od momentu jej rozpoczęcia do końca, niezależnie od konkretnych zachowań pielęgnacyjnych.
    2. Jeśli mysz testowa przerwie pielęgnację na kilka sekund bez zmiany pozycji, policz to jako część tego samego ataku. Jeśli jednak mysz przestanie się pielęgnować i zacznie eksplorować, uznaj, że atak pielęgnacyjny dobiegł końca.
    3. Dodatkowo nagrywaj pełną sesję pielęgnacyjną tylko wtedy, gdy mysz pielęgnuje się w sposób ciągły od przodu do tyłu (od etapu I do etapu IV).
    4. Udokumentuj całkowity czas pielęgnacji, liczbę napadów pielęgnacji oraz liczbę pełnych napadów pielęgnacji zaobserwowanych podczas 10-minutowego okresu testowego, zaznaczając obserwacje w odstępach 2-minutowych, 5-minutowych i 10-minutowych.
  3. Trzykomorowy test interakcji społecznych
    Analiza określa czas i częstotliwość interakcji węchowej z każdą myszą (novel S1 i pusta klatka dla podejścia społecznego oraz S1 i novel S2 dla preferencji dla nowości społecznych).
    1. Użyj dwóch timerów, aby zarejestrować czas interakcji z myszą w każdej klatce i całkowity czas spędzony w każdej komorze. Dla każdej części testu (podejście społeczne i preferencja dla nowości społecznej) zapisz, ile razy mysz testowa weszła do każdej komory (łączna liczba wejść).
    2. Określić czas przebywania w przedziale (przedziałach) na podstawie obecności ciała badanej myszy w jednej z komór (muszą wejść cztery łapy).
    3. Rejestruj czas interakcji (s), gdy mysz testowa obwąchuje nową obcą mysz (bezpośredni kontakt twarzą lub wąchanie ogona obcej myszy) lub wącha pustą klatkę. Nie traktuj siedzenia na górze klatki jako interakcji.
    4. Nagrywanie w 2 minuty, 5 minuty i 10 minut. Przeprowadź analizę zależną od czasu.
    5. Porównaj wskaźnik dyskryminacji towarzyskiej (DI) w grupach.
      UWAGA: DI oblicza się jako: DI = (czas interakcji z myszą S1 - czas interakcji z pustą klatką)/całkowity czas interakcji x 100. Podczas części dotyczącej nowości społecznych myszy kontrolne będą częściej wchodzić w interakcje z S2 (nieznaną myszą) niż z S1 (znaną myszą). Nowość społeczna (pamięć społeczna) DI jest obliczana: DI = (czas interakcji z myszą S2 - czas interakcji ze znaną myszą (S1))/ całkowity czas interakcji x 100.
  4. analiza statystyczna
    1. Użyj dwustronnego testu T-studenta bez par, aby obliczyć wartości p ze znaczącym poziomem ustawionym na p < 0,05 dla czasu samodzielnej pielęgnacji, napadów i pełnych ataków, w których są tylko dwie grupy.
    2. W przypadku testu trzykomorowego użyj testu T-studenta, aby obliczyć istotność statystyczną wszystkich wpisów między dwiema grupami. Gdy nie jest spełnione założenie równej wariancji danych między grupami (test Levene'a p < 0,05), wykonaj test T Welcha, aby dostosować odchylenie i porównać średnie grup niezależnych.
      UWAGA: Pomiar całkowitej liczby wpisów ocenia ogólną aktywność myszy. Potencjalne obawy mogą pojawić się (związane z upośledzeniem motorycznym i wysokim poziomem lęku u myszy), jeśli grupa eksperymentalna bada aparaturę trójkomorową znacznie mniej niż grupa kontrolna. Aby temu zaradzić, rozważ ocenę funkcji motorycznych i zachowań podobnych do lęku za pomocą depresyjnych testów behawioralnych, ponieważ zmniejszone badanie można przypisać tym warunkom42.
    3. Użyj mieszanej ANOVA, aby porównać czas w każdej komorze i czas interakcji dla każdego testu. W zależności od liczby grup i czynników, należy zastosować mieszaną dwukierunkową ANOVA (2 czynniki: genotyp i strona komory lub oddziaływanie z pustą klatką i S1 lub S1 i S2) lub mieszaną trójdrożną ANOVA (3 czynniki: genotyp, leczenie i strona komory lub interakcja z pustą i S1 lub S1 i S2). Analiza ta jest szczególnie przydatna do ujawnienia statystycznie istotnych interakcji społecznych myszy między różnymi czynnikami.
      UWAGA: Czynniki te obejmują główny wpływ genotypu (wpływ różnych środowisk genetycznych na zachowania społeczne), główny efekt interakcji z klatką (wąchanie i preferowanie nowej obcej myszy w porównaniu z pustą klatką lub wcześniej napotkaną myszą), główny efekt leczenia (wpływ różnych terapii farmakologicznych na zachowania społeczne myszy) oraz interakcja genotyp x leczenie (ujawnienie, jak zastosowane leczenie wpływa na genotyp).
    4. Następnie użyj testu post hoc Bonferroniego (poziom α ustawiony na 0,05), aby dokładniej ocenić porównanie między różnymi grupami.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Mammalie target of rapamycin (mTOR) odgrywa kluczową rolę w ośrodkowym układzie nerwowym (OUN), regulując de novo synteza białek i hamowanie autofagii43Dysregulacja szlaku mTOR oraz syntezy białek synaptycznych była wiązana z ASD.28Badania całogenomowe przeprowadzone u pacjentów z ASD zidentyfikowały różne mutacje genów związane z ASD, w tym te wpływające na białka zaangażowane w sygnalizację kompleksu 1 kinazy mTOR (mTORC1), takie jak homolog fosfatazy i tensyny n...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Większość przyczyn etiologicznych, zmian patologicznych i markerów biologicznych ASD nie jest znana lub dostępna. Rozpoznanie ASD opiera się przede wszystkim na dwóch ustalonych zestawach objawów klinicznych: utrzymujących się deficytach w komunikacji społecznej i nadmiernych powtarzających się zachowaniach 18,19,55. Biorąc pod uwagę, że ASD jest zaburzeniem ze spektrum obejmującym szeroki zakres objawów, trudno jest w pełni odt...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Dziękujemy Dr. Karimowi Naderowi (Wydział Psychologii, Uniwersytet McGill) za udostępnienie obiektu do badania zachowań zwierząt.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Ściółka z kolb kukurydzy 1/4'' Teklad Harlan, TEKLAD7092-7097Surowiec do produkcji ściółki z kolb kukurydzy to 100% kolba kukurydzy. Nie stosuje się żadnych innych składników ani dodatków. 
Kamera do nagrywania wideo HDPrzejtradycyjna kamera wideoSonyHDRCX40550 Mb/s XAVC S1 1920 x 1080 przy 60P, kodeki AVCHD i MP4. 30-krotny zoom optyczny / 60-krotny wyraźny zoom obrazu, aby zbliżyć się do akcji. Szerokokątny obiektyw ZEISS 26,8 mm.
Nitrylowe bezpudrowe rękawice badawczeAurelia, TransformASTM D6319-00Przetestowane pod kątem stosowania z lekami chemioterapeutycznymi zgodnie z ASTM D6978
Plastikowe dna klatek dla gryzoniAncareAN75PLFAN75 Mouse 7½ ” szer. x 11½ ” dł. x 5" H
TÅ Lampa podłogowa i żarówki GARP IEKA604.640.49Żarówki mają moc 23 W 120 V.
Aparat towarzyskości Ugo BasileStoelting 60450(3-komorowy test społeczny) jest cennym narzędziem do badania zachowań społecznych u myszy.
Versa-Clean FisherbrandPVCLN04Środek czyszczący Tablica
suchościeralna i  Marker suchościeralny o niskim zapachuEXPONAMarkery suchościeralne w odważnej czerni
Aparat towarzyskości

Bibliografia

  1. Esler, A., Ruble, L. DSM-5 diagnostic criteria for autism spectrum disorder with implications for school psychologists. Int J Sch Educ Psychol. 3 (1), 1-15 (2015).
  2. Lord, C., et al. Autism spectrum disorder. Nat Rev Dis Primers. 6 (1), 5(2020).
  3. Zeidan, J., et al. Global prevalence of autism: A systematic review update. Autism Res. 15 (5), 778-790 (2022).
  4. Maenner, M. J., et al. Prevalence and characteristics of autism spectrum disorder among children aged 8 years - autism and developmental disabilities monitoring network, 11 sites, United States, 2018. MMWR Surveill Summ. 70 (11), 1-16 (2021).
  5. Maenner, M. J., et al. Prevalence and characteristics of autism spectrum disorder among children aged 8 years- Autism and developmental disabilities monitoring network, 11 Sites, United States, 2020. MMWR Surveill Summ. 72 (2), 1-14 (2023).
  6. Hours, C., Recasens, C., Baleyte, J. M. ASD and ADHD co-morbidity: What are we talking about. Front Psychiatry. 13, 837424(2022).
  7. Denmark, A., et al. The effects of chronic social defeat stress on mouse self-grooming behavior and its patterning. Behav Brain Res. 208 (2), 553-559 (2010).
  8. Sheng, Z., et al. Fentanyl induces autism-like behaviours in mice by hypermethylation of the glutamate receptor gene grin2b. Br J Anaesth. 129 (4), 544-554 (2022).
  9. Ruskin, D. N., et al. Ketogenic diet improves core symptoms of autism in BTBR mice. PLoS One. 8 (6), e65021(2013).
  10. Queen, N. J., et al. Environmental enrichment improves metabolic and behavioral health in the btbr mouse model of autism. Psychoneuroendocrinology. 111, 104476(2020).
  11. Provenzano, G., Zunino, G., Genovesi, S., Sgadó, P., Bozzi, Y. Mutant mouse models of autism spectrum disorders. Dis Markers. 33 (5), 225-239 (2012).
  12. Ey, E., Leblond, C. S., Bourgeron, T. Behavioral profiles of mouse models for autism spectrum disorders. Autism Res. 4 (1), 5-16 (2011).
  13. Jiang, Y. -H., Ehlers, M. D. Modeling autism by shank gene mutations in mice. Neuron. 78 (1), 8-27 (2013).
  14. Arakawa, H. From multisensory assessment to functional interpretation of social behavioral phenotype in transgenic mouse models for autism spectrum disorders. Front Psychiatry. 11, 592408(2020).
  15. Kazdoba, T. M., Leach, P. T., Crawley, J. N. Behavioral phenotypes of genetic mouse models of autism. Genes Brain Behav. 15 (1), 7-26 (2016).
  16. Silverman, J. L., Yang, M., Lord, C., Crawley, J. N. Behavioural phenotyping assays for mouse models of autism. Nat Rev Neurosci. 11 (7), 490-502 (2010).
  17. Crawley, J. N. Designing mouse behavioral tasks relevant to autistic-like behaviors. Ment Retard Dev Disabil Res Rev. 10 (4), 248-258 (2004).
  18. APA PsycNet. Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders: DSM-5th Edition. , American Psychiatric Association. Washington, DC. (2022).
  19. World Health Organization. ICD-11 for Mortality and Morbidity Statistics. 2024, World Health Organization. (2023).
  20. Spruijt, B. M., Van Hooff, J. A., Gispen, W. H. Ethology and neurobiology of grooming behavior. Physiol Rev. 72 (3), 825-852 (1992).
  21. Bolles, R. C. Grooming behavior in the rat. J Comp Physiol Psychol. 53, 306-310 (1960).
  22. Kalueff, A. V., et al. Neurobiology of rodent self-grooming and its value for translational neuroscience. Nat Rev Neurosci. 17 (1), 45-59 (2016).
  23. Kalueff, A. V., Aldridge, J. W., Laporte, J. L., Murphy, D. L., Tuohimaa, P. Analyzing grooming microstructure in neurobehavioral experiments. Nat Protoc. 2 (10), 2538-2544 (2007).
  24. Gandhi, T., Lee, C. C. Neural mechanisms underlying repetitive behaviors in rodent models of autism spectrum disorders. Front Cell Neurosci. 14, 592710(2020).
  25. Fyke, W., Alarcon, J. M., Velinov, M., Chadman, K. K. Pharmacological inhibition of the primary endocannabinoid producing enzyme, dgl-α, induces autism spectrum disorder-like and co-morbid phenotypes in adult C57bl/J mice. Autism Res. 14 (7), 1375-1389 (2021).
  26. Kazlauskas, N., Robinson-Agramonte, M. D. L. A., Depino, A. M. Neuroinflammation in Animal Models of Autism. Translational Approaches to Autism Spectrum Disorder. , Springer. Cham. (2015).
  27. Ryan, B. C., Young, N. B., Crawley, J. N., Bodfish, J. W., Moy, S. S. Social deficits, stereotypy and early emergence of repetitive behavior in the C58/J inbred mouse strain. Behav Brain Res. 208 (1), 178-188 (2010).
  28. Crawley, J. N. Mouse behavioral assays relevant to the symptoms of autism. Brain Pathol. 17 (4), 448-459 (2007).
  29. Stoppel, D. C., Mccamphill, P. K., Senter, R. K., Heynen, A. J., Bear, M. F. Mglur5 negative modulators for fragile x: Treatment resistance and persistence. Front Psychiatry. 12, 718953(2021).
  30. Kazdoba, T. M., et al. Translational mouse models of autism: Advancing toward pharmacological therapeutics. Curr Top Behav Neurosci. 28, 1-52 (2016).
  31. Gantois, I., et al. Metformin ameliorates core deficits in a mouse model of fragile x syndrome. Nat Med. 23 (6), 674-677 (2017).
  32. Meyza, K. Z., Blanchard, D. C. The BTBR mouse model of idiopathic autism - current view on mechanisms. Neurosci Biobehav Rev. 76 (Pt A), 99-110 (2017).
  33. Peça, J., et al. Shank3 mutant mice display autistic-like behaviours and striatal dysfunction. Nature. 472 (7344), 437-442 (2011).
  34. Crawley, J. N. Twenty years of discoveries emerging from mouse models of autism. Neurosci Biobehav Rev. 146, 105053(2023).
  35. Wang, Z., et al. Effects of fmr1 gene mutations on sex differences in autism-like behavior and dendritic spine development in mice and transcriptomic studies. Neuroscience. 534, 16-28 (2023).
  36. Peñagarikano, O., et al. Absence of cntnap2 leads to epilepsy, neuronal migration abnormalities, and core autism-related deficits. Cell. 147 (1), 235-246 (2011).
  37. Chari, T., Griswold, S., Andrews, N. A., Fagiolini, M. The stage of the estrus cycle is critical for interpretation of female mouse social interaction behavior. Front Behav Neurosci. 14, 113(2020).
  38. Zeng, P. Y., Tsai, Y. H., Lee, C. L., Ma, Y. K., Kuo, T. H. Minimal influence of estrous cycle on studies of female mouse behaviors. Front Mol Neurosci. 16, 1146109(2023).
  39. Gray, S., Hurst, J. L. The effects of cage cleaning on aggression within groups of male laboratory mice. Anim Behav. 49 (3), 821-826 (1995).
  40. Rasmussen, S., Miller, M. M., Filipski, S. B., Tolwani, R. J. Cage change influences serum corticosterone and anxiety-like behaviors in the mouse. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (4), 479-483 (2011).
  41. Stoelting. Ugo basile sociability apparatus. , https://stoeltingco.com/Neuroscience/Ugo-Basile-Sociability-Apparatus~9840 (2024).
  42. Heinz, D. E., et al. Exploratory drive, fear, and anxiety are dissociable and independent components in foraging mice. Translational Psychiatry. 11 (1), 318(2021).
  43. Takei, N., Nawa, H. mTOR signaling and its roles in normal and abnormal brain development. Front Mol Neurosci. 7, 28(2014).
  44. Jeste, S. S., Sahin, M., Bolton, P., Ploubidis, G. B., Humphrey, A. Characterization of autism in young children with tuberous sclerosis complex. J Child Neurol. 23 (5), 520-525 (2008).
  45. Kwon, C. H., et al. Pten regulates neuronal arborization and social interaction in mice. Neuron. 50 (3), 377-388 (2006).
  46. Napoli, I., et al. The fragile x syndrome protein represses activity-dependent translation through cyfip1, a new 4e-bp. Cell. 134 (6), 1042-1054 (2008).
  47. Auerbach, B. D., Osterweil, E. K., Bear, M. F. Mutations causing syndromic autism define an axis of synaptic pathophysiology. Nature. 480 (7375), 63-68 (2011).
  48. Winden, K. D., Ebrahimi-Fakhari, D., Sahin, M. Abnormal mTOR activation in autism. Annu Rev Neurosci. 41, 1-23 (2018).
  49. Sharma, A., et al. Dysregulation of mTOR signaling in fragile X syndrome. J Neurosci. 30 (2), 694-702 (2010).
  50. Amorim, I. S., Lach, G., Gkogkas, C. G. The role of the eukaryotic translation initiation factor 4E (eIF4E) in neuropsychiatric disorders. Front Genet. 9, 561(2018).
  51. Pause, A., et al. Insulin-dependent stimulation of protein synthesis by phosphorylation of a regulator of 5'-cap function. Nature. 371 (6500), 762-767 (1994).
  52. Banko, J. L., et al. The translation repressor 4e-bp2 is critical for eIF4F complex formation, synaptic plasticity, and memory in the hippocampus. J Neurosci. 25 (42), 9581-9590 (2005).
  53. Gkogkas, C. G., et al. Autism-related deficits via dysregulated eIF4E-dependent translational control. Nature. 493 (7432), 371-377 (2013).
  54. Wiebe, S., et al. Inhibitory interneurons mediate autism-associated behaviors via 4E-BP2. Proc Natl Acad Sci U S A. 116 (36), 18060-18067 (2019).
  55. Lord, C., Elsabbagh, M., Baird, G., Veenstra-Vanderweele, J. Autism spectrum disorder. Lancet. 392 (10146), 508-520 (2018).
  56. Willner, P. Validation criteria for animal models of human mental disorders: Learned helplessness as a paradigm case. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 10 (6), 677-690 (1986).
  57. Jabarin, R., Netser, S., Wagner, S. Beyond the three-chamber test: Toward a multimodal and objective assessment of social behavior in rodents. Mol Autism. 13 (1), 41(2022).
  58. Shoji, H., Takao, K., Hattori, S., Miyakawa, T. Age-related changes in behavior in c57bl/6j mice from young adulthood to middle age. Mol Brain. 9 (1), 11(2016).
  59. Arakawa, H. Revisiting sociability: Factors facilitating approach and avoidance during the three-chamber test. Physiol Behav. 272, 114373(2023).
  60. Rein, B., Ma, K., Yan, Z. A standardized social preference protocol for measuring social deficits in mouse models of autism. Nat Protoc. 15 (10), 3464-3477 (2020).
  61. Monteiro, P., Feng, G. Shank proteins: Roles at the synapse and in autism spectrum disorder. Nat Rev Neurosci. 18 (3), 147-157 (2017).
  62. Sala, C., Vicidomini, C., Bigi, I., Mossa, A., Verpelli, C. Shank synaptic scaffold proteins: Keys to understanding the pathogenesis of autism and other synaptic disorders. J Neurochem. 135 (5), 849-858 (2015).
  63. Enginar, N., Hatipoğlu, İ, Fırtına, M. Evaluation of the acute effects of amitriptyline and fluoxetine on anxiety using grooming analysis algorithm in rats. Pharmacol Biochem Behav. 89 (3), 450-455 (2008).
  64. Silverman, J. L., Tolu, S. S., Barkan, C. L., Crawley, J. N. Repetitive self-grooming behavior in the BTBR mouse model of autism is blocked by the mGluR5 antagonist MPEP. Neuropsychopharmacology. 35 (4), 976-989 (2010).
  65. Chadman, K. K. Fluoxetine but not risperidone increases sociability in the btbr mouse model of autism. Pharmacol Biochem Behav. 97 (3), 586-594 (2011).
  66. Kalueff, A. V., Tuohimaa, P. The grooming analysis algorithm discriminates between different levels of anxiety in rats: Potential utility for neurobehavioural stress research. J Neurosci Methods. 143 (2), 169-177 (2005).
  67. Tartaglione, A. M., et al. Aberrant self-grooming as early marker of motor dysfunction in a rat model of Huntington's disease. Behav Brain Res. 313, 53-57 (2016).
  68. Wilson, C. A., Koenig, J. I. Social interaction and social withdrawal in rodents as readouts for investigating the negative symptoms of schizophrenia. Eur Neuropsychopharmacol. 24 (5), 759-773 (2014).
  69. Samsom, J. N., Wong, A. H. Schizophrenia and depression co-morbidity: What we have learned from animal models. Front Psychiatry. 6, 13(2015).
  70. Planchez, B., Surget, A., Belzung, C. Animal models of major depression: Drawbacks and challenges. J Neural Transm (Vienna). 126 (11), 1383-1408 (2019).
  71. Ang, M. J., Lee, S., Kim, J. C., Kim, S. H., Moon, C. Behavioral tasks evaluating schizophrenia-like symptoms in animal models: A recent update. Curr Neuropharmacol. 19 (5), 641-664 (2021).
  72. Samson, A. L., et al. Mousemove: An open source program for semi-automated analysis of movement and cognitive testing in rodents. Sci Rep. 5 (1), 16171(2015).
  73. Barbera, G., et al. An open-source capacitive touch sensing device for three chamber social behavior test. MethodsX. 7, 101024(2020).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Modele mysiezaburzenia ze spektrum autyzmutest pielęgnacji ciałatest trzech komórinterakcje społecznezachowania powtarzalnemutacje genetyczneocena behawioralnaknockout Eif4ebp2
Strategie oceny zachowań podobnych do autystycznych u myszy
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.