Artykuł metodologiczny

Jednostronna analiza objętości płuc za pomocą mikrotomografii komputerowej w celu lepszej oceny zwłóknienia płuc w modelach przedklinicznych

DOI:

10.3791/67837

⸱

20 czerwca 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Respiratory Diseases, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Guangzhou Institute of Respiratory Health, the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 2Guangzhou National Laboratory, 3Second Department of Elderly Respiratory, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University, Guangdong Provincial Geriatric Institute

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W tym miejscu przedstawiamy protokół wykorzystania mikrotomografii komputerowej (mikro-CT) do ilościowego oznaczania wentylowanych regionów w jednostronnym modelu zwłóknienia płuc wywołanego bleomycyną poprzez wkroplenie dotchawicze po stronie zmiany.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zwłóknienie płuc (PF) jest postępującą i nieodwracalną śródmiąższową chorobą płuc charakteryzującą się złym rokowaniem i ograniczonymi możliwościami leczenia. Tradycyjny mysi model zwłóknienia płuc wywołanego przez dotchawicze wkroplenie bleomycyny może powodować nierównomierne rozprowadzanie leków i wysoką śmiertelność. Udoskonalona metoda jednostronnego wkraplania dotchawiczego do podawania bleomycyny myszom umożliwia stworzenie bardziej jednolitego i kontrolowanego modelu zwłóknienia płuc, zapewniając lepszą symulację choroby u ludzi. W tym miejscu przedstawiamy protokół wykorzystania mikrotomografii komputerowej (mikro-CT) do ilościowego oznaczania wentylowanych obszarów w jednostronnym modelu zwłóknienia płuc wywołanego bleomycyną poprzez wkroplenie dotchawicze po stronie zmiany chorobowej. Podejście to pozwala na ilościowe określenie całkowitej objętości płuc i wentylowanych obszarów płuc, zapewniając czuły i dokładny pomiar postępu choroby i odpowiedzi na leczenie. Badanie to obejmuje znieczulenie, precyzyjne podawanie leków, skanowanie mikro-CT i obróbkę końcową przy użyciu oprogramowania 3D Slicer do analizy obrazu. Jednostronna analiza objętości płuc po leczeniu bleomycyną wykazała znaczne zmniejszenie objętości płuc w porównaniu z grupą kontrolną. Barwienie trichromem Massona potwierdziło obecność i zwiększone odkładanie się kolagenu u myszy leczonych BLM. W niniejszym artykule oceniliśmy zwłóknienie płuc w modelach przedklinicznych, wykonując jednostronną analizę wolumetryczną płuc za pomocą mikrotomografii komputerowej, zapewniając badaczom precyzyjną i dokładną metodę oceny interwencji terapeutycznych w badaniach PF.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zwłóknienie płuc (PF) jest wyniszczającą i nieodwracalną chorobą płuc, której metody leczenia są ograniczone. Globalna częstość występowania PF waha się od 1 do 13 na 100 000 osób, przy czym znaczny wzrost częstości występowania obserwuje się wraz z wiekiem1 roku. Pomimo znacznych wysiłków w ciągu ostatnich dziesięcioleci, krajobraz terapeutyczny dla PF pozostaje ograniczony, a obecnie tylko dwa leki przeciwfibrotyczne, nintedanib i pirfenidon, są obecnie zatwierdzone do leczenia PF2. Patogeneza leżąca u podstaw zwłóknienia płuc jest bardzo złożona i obejmuje różne aspekty fizjologii molekularnej i komórkowej3. Eksperymentalne modele zwierzęce in vivo , indukowane przez różne czynniki, są obecnie niezbędnymi narzędziami do badania mechanizmów patogennych i fenotypów chorób.

Mysi model zwłóknienia płuc wywołany bleomycyną, podawany przez wkraplanie dotchawicze, jest szeroko uznawany za przyczynę wyjaśnienia podstawowych mechanizmów komórkowych i molekularnych oraz identyfikacji potencjalnych celów terapeutycznych4. Jednak asymetryczna i nieselektywna dystrybucja bleomycyny wkraplanej dotchawiczo może prowadzić do wysokiej śmiertelności, głównie z powodu niejednorodnego zwłóknienia i obustronnego uszkodzenia płuc 5,6. Aby rozwiązać ten problem, zaproponowaliśmy jednostronne podejście do podawania dotchawiczego, aby zapewnić równomierne dostarczanie środków eksperymentalnych do lewego płuca i lepiej naśladować proces patologiczny obserwowany u pacjentów z PF 7,8,9. Poza tym technika jednostronnego podawania może być również wykorzystana do oceny leków wymagających miejscowej dystrybucji lub do innych eksperymentalnych interwencji ukierunkowanych na określone płuca.

W modelach przedklinicznych mikrotomografia komputerowa (mikro-CT) staje się coraz bardziej cenna w badaniu patologii płuc i okazała się potężnym narzędziem do badań podłużnych, zdolnym do dostarczania danych jakościowych i ilościowych w celu monitorowania postępu choroby, a także odpowiedzi na interwencje terapeutyczne10. Mikrotomografia komputerowa została wykorzystana do oceny objętości całkowitej, obszarów wentylowanych i niewentylowanych, morfologii oskrzeli i gęstości tkanek. Na podstawie naszych wcześniejszych badań opracowaliśmy nowatorską metodę obrazowania, w której zastosowano mikro-CT do analizy jednostronnej objętości płuc i oceny poziomu zwłóknienia w mysim modelu zwłóknienia płuc 7,8,9. Metoda ta pozwala na ilościowe określenie napowietrzonych obszarów płuc, zapewniając dokładniejszą i bardziej czułą miarę postępu choroby i odpowiedzi na leczenie.

W badaniu tym przedstawiono metodę jednostronnej wentylowanej analizy objętości płuc pochodzącą z mikrotomografii komputerowej u myszy leczonych bleomycyną. Ta innowacyjna metoda oferuje bardziej precyzyjną i kompleksową ocenę zwłóknienia płuc, potencjalnie zmieniając sposób, w jaki oceniamy skuteczność interwencji terapeutycznych w badaniach przedklinicznych. Badanie to przyczynia się do doskonałego udoskonalenia analizy przedklinicznych modeli zwłóknienia płuc, zapewniając potężną metodę analizy ilościowej do oceny efektów leczenia wraz z postępem choroby.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Wykorzystania Uniwersytetu Medycznego w Kantonie. Eksperymenty przeprowadzono na 6-8-tygodniowych samcach myszy C57BL/6 o wadze 25-30 g. Myszy trzymano w 12-godzinnym cyklu światło/ciemność (światło: 25 luksów) z dostępem ad libitum do pożywienia i wody i losowo przydzielono do grup kontrolnych i BLM.

1. Jednostronne wkraplanie dotchawicze płuc

  1. Znieczulenie C57BL/6 samców myszy (6-8 tygodni, 25-30 g) za pomocą dootrzewnowego wstrzyknięcia 1% pentobarbitalu sodu (50 mg/kg).
  2. Monitoruj poziom znieczulenia, obserwując częstość oddechów i odruch wycofania kończyn.
  3. Zabezpiecz mysz w pozycji leżącej na plastikowej desce ustawionej pod kątem 70°-90°, przytrzymując siekacze i kończyny.
  4. Użyj sterylnych kleszczy z końcami, aby delikatnie cofnąć język.
  5. Włóż niestandardową igłę 22 G do tchawicy za pomocą laryngoskopu dla małych zwierząt, aby uwidocznić strukturę nagłośni i jamy ustnej gardła. Obróć deskę w kierunku przeciwnym do ruchu wskazówek zegara do -70°, aby wyrównać lewe oskrzela główne równolegle do oskrzela głównego. Przesuwać igłę, aż poczujesz opór.
    UWAGA: Wstępnie zmierz długość cewnika za pomocą myszy ćwiczebnej o podobnym rozmiarze, aby zapewnić optymalną długość wprowadzenia.
  6. Obróć szybko pod kątem 30° i wlej 40 μl roztworu bleomycyny (0,02 mg). Wyjąć igłę.
  7. Przytrzymaj mysz w tej pozycji przez co najmniej 30 sekund, aby zapewnić prawidłową dystrybucję leku.
  8. Pozwól myszy dojść do siebie w pozycji leżącej na rozgrzewającym kocu.

2. Skanowanie mikrotomografią komputerową (mikro-CT)

UWAGA: Myszy zostały zeskanowane za pomocą systemu micro-CT zgodnie z instrukcjami producenta.

  1. Wykonaj mikrotomografię komputerową na myszach przez 3 tygodnie po wkropleniu bleomycyny.
  2. Dodaj odpowiednią ilość izofluranu do parownika urządzenia do znieczulania gazem dla małych zwierząt, włącz parownik, dostosuj stężenie indukcji do 3% i umieść myszy w pudełku indukcyjnym, aż stracą odruch przerzutnika i będą wykazywać powolny, głęboki oddech.
  3. Wyjmij myszy z pudełka indukcyjnego i umieść je na wznak na stole do skanowania, tak aby myszy miały wyprostowane kończyny i ciała wyrównane wzdłuż linii środkowej.
  4. Ustawić stężenie podtrzymujące izofluranu w tabeli skanowania na 1%.
  5. Ustaw tryb skanowania Micro-CT: poprzeczne pole widzenia 43 mm, rozdzielczość 2K x 2K, rozmiar piksela 0,042 mm, grubość warstwy 0,042 mm.
  6. Po zeskanowaniu umieść myszy na ocieplającym kocu, aż się obudzą.

3. Przetwarzanie końcowe mikro-CT: Jednostronna selektywna segmentacja płuc i analiza objętości

UWAGA: Przetwarzanie obrazu i analiza ilościowa zostały wykonane za pomocą darmowego, otwartego oprogramowania 3D Slicer (http://www.slicer.org), zgodnie z instrukcjami producenta. Zakresy kliniczne Hounsfield Unit (HU) dla okna płuc zastosowano w celu normalizacji obrazów HU, segmentując miąższ płuc na regiony normonapowietrzone ([-1000, -350] HU), jak wcześniej informowano 8,9,11. Procedura przetwarzania obrazu jest opisana w następujący sposób:

  1. Otwórz fragmentator 3D. Interfejs operacyjny przedstawiono na rysunku 1.
  2. Kliknij przycisk Załaduj , aby zaimportować dane obrazowania w formacie DICOM. Obrazy osiowe, czołowe i strzałkowe będą wyświetlane w głównym interfejsie (rysunek 2).
  3. Dostosuj parametry związane z widokiem strzałkowym, jak pokazano na rysunku 3 (opcjonalnie). (1: pokaż ukryte opcje; 2: wybierz Zmień nazwę bieżącego woluminu; 3: Wprowadź nową nazwę).
  4. W module Edytor segmentów kliknij przycisk Dodaj , aby utworzyć segmentację do selektywnej analizy płuc (prawe płuco) (Rysunek 4) (1: Objętości; 2: Edytor segmentów; 3: Dodaj segment; 4: Ustaw próg; 5: Dostosuj zakres progu; 6: Użyj do maskowania; 7: Ustaw pędzel sferyczny).
  5. Dostosuj zakres progowy do [-1000, -350] HU i włącz opcję Użyj do maskowania .
  6. Użyj narzędzia Malowanie z pędzlem sferycznym, aby podzielić żądane obszary płuc na segmenty.
  7. Wybierz narzędzie Wyspa i wybierz opcję Zachowaj wybraną wyspę. Podświetl prawe płuco, a następnie kliknij Pokaż 3D , aby wyświetlić model 3D w panelu wizualizacji (Rysunek 5) (1: Edytuj wyspy (połączone komponenty); 2: Wybierz opcję "Zachowaj wybraną wyspę"; 3: Pokaż model 3D).
  8. W panelu Terminologia zmień kolor modelu 3D na niebieski (opcjonalnie).
  9. Powtórz kroki 3.4-3.6 dla lewego płuca. Przetwarzaj osiowe obrazy CT klatki piersiowej warstwa po warstwie, aby obliczyć wentylowaną objętość lewego płuca i utworzyć model 3D (ryc. 6).
  10. Zmień kolor modelu 3D lewego płuca na żółty (opcjonalnie).
  11. Ustaw nieprzezroczystość segmentacji prawego płuca na 0,2.
  12. Wyeksportuj model 3D zgodnie z wymaganiami (Rysunek 7).
  13. Zrób zrzuty ekranu z widoku 3D lub pokrój obrazy na plasterki i zapisz je (Rysunek 8) (1: Zrzut ekranu z adnotacją; 2: Wybierz format obrazu; 3: Zmodyfikuj ścieżkę zapisywania).
  14. Moduł Statystyka segmentu służy do obliczania objętości płuc (mm3) dla każdego segmentu i przeprowadzania analizy ilościowej regionów napowietrzonych normo (ryc. 9).

figure-protocol-1
Rysunek 1: Interfejs oprogramowania 3D Slicer. Rysunek przedstawia główny interfejs operacyjny oprogramowania 3D Slicer. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-protocol-2
Rycina 2: Obrazy CT zwłóknienia płuc wywołanego jednostronnym wkraplaniem dotchawiczym u myszy. Widok osiowy, czołowy i strzałkowy wraz z rekonstrukcją 3D płuc po wkropleniu bleomycyny. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-protocol-3
Rysunek 3: Regulacja parametrów widoku strzałkowego. Rysunek ilustruje regulację parametrów, umożliwiając precyzyjną wizualizację i analizę. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-protocol-4
Rysunek 4: Edycja segmentacji i korekty parametrów. Rysunek przedstawia proces edycji segmentacji i odpowiednich korekt parametrów. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-protocol-5
Rycina 5: Segmentacja 3D prawego płuca. Proces składa się z trzech sekwencyjnych kroków: edycji połączonych komponentów do segmentacji płuc (krok 1), wybrania opcji Zachowaj wybraną wyspę , aby wyizolować prawe płuco (krok 2) i kliknięcia Pokaż 3D , aby wyrenderować model w panelu wizualizacji (krok 3). Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-protocol-6
Rycina 6: Rekonstrukcja 3D lewego płuca na podstawie analizy mikrotomografii komputerowej. Obrazy osiowej tomografii komputerowej klatki piersiowej zostały przetworzone warstwa po warstwie w celu segmentacji napowietrzonych obszarów, ilościowego określenia objętości wentylowanej i zrekonstruowania modelu 3D. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-protocol-7
Rycina 7: Rekonstrukcja 3D płuc na podstawie analizy mikrotomografii komputerowej wentylowanej objętości płuc w modelu jednostronnego zwłóknienia płuc. Zrekonstruowane modele zostały wyeksportowane w określonych formatach do predefiniowanych katalogów. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-protocol-8
Rysunek 8: Przewodnik po zapisywaniu obrazów. Rysunek przedstawia sekwencyjne kroki zapisywania obrazów, począwszy od zainicjowania funkcji zapisywania za pomocą menu Adnotacja Zrzut ekranu do wyboru formatów i zdefiniowania ścieżek przechowywania. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-protocol-9
Rycina 9: Analiza statystyczna oparta na mikrotomografii komputerowej w modelu jednostronnego zwłóknienia płuc. Przeanalizowano dane ilościowe pochodzące z regionów normo-napowietrzonych. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

4. Barwienie trichomów Massona

  1. Utrwalić próbkę płuc za pomocą 4% paraformaldehydu w temperaturze pokojowej (RT) przez noc, odwodnić za pomocą sortowanej serii etanoli i zatopić w parafinie. Przygotuj plastry o grubości 5 μm za pomocą obrotowego mikrotomu.
  2. Wykonaj barwienie trichromowe Massona na sekcjach w następujący sposób.
    1. Przepłukać odparafinowane i ponownie uwodnione skrawki w wodzie destylowanej, a następnie poddać działaniu zaprawy w podgrzanym płynie Bouin w temperaturze 56-60 °C przez 1 godzinę lub przez noc w temperaturze pokojowej.
    2. Po umyciu wybarwić skrawki roztworem żelaza hematoksyliny Weigerta na 10 min, spłukać pod bieżącą ciepłą wodą z kranu przez 10 min i zanurzyć w roztworze szkarłatnej fuksyny Biebricha na 10-15 min.
    3. Osiągnij różnicowanie za pomocą roztworu kwasu fosfomolibdenowo-fosfatungstycznego przez 10-15 minut i monitoruj, aż obszary bogate w kolagen zmienią kolor z czerwonego na przezroczysty.
    4. Następnie bezpośrednio przenieś szkiełka do roztworu błękitu anilinowego na 5-10 minut, spłucz w wodzie destylowanej i rozróżnicuj w 1% roztworze kwasu octowego przez 2-5 minut.
    5. Po odwodnieniu za pomocą sortowanego etanolu (95% do alkoholu bezwzględnego) i oczyszczeniu z ksylenu, zamontuj sekcje za pomocą żywicznego medium.

5. Analiza uczenia maszynowego barwienia trychromowego Massona

  1. Histopatologiczna ocena analizy składu kolagenu w płucach kontrolnych i leczonych bleomycyną przy użyciu barwienia trichromowego Massona.
  2. Aby zmniejszyć odchylenia zależne od obserwatora, uzyskaj cyfrowe obrazy o wysokiej rozdzielczości barwionych odcinków płuc za pomocą skanera obrazów całych slajdów.
  3. Następnie przeanalizuj ilościowo obszary kolagenu za pomocą zautomatyzowanej analizy obrazu orbity za pomocą oprogramowania 8,9,12. Proces szkolenia został pokrótce opisany poniżej.
    1. Ręcznie narysuj kilka reprezentatywnych adnotacji dla każdej kategorii tkanki (np. kolagen, normalna tkanka i tkanka zwłóknieniowa). Użyj wyodrębnionych funkcji pikselowych z regionów treningowych z adnotacjami, aby skonstruować zestaw treningowy dla maszyny wektorów nośnych (SVM).
    2. W przypadku skrawków barwionych Massonem zdefiniuj klasyfikację tkanek na trzy kategorie: kolagen, normalna tkanka i tło.
      UWAGA: Model uczenia maszynowego jest poddawany iteracyjnemu trenowaniu na całych obrazach slajdów (WSI) poprzez wielokrotne adnotacje i udoskonalenia, aż oceny zatwierdzone przez patologa potwierdzą dokładną kategoryzację tkanek. Po osiągnięciu zadowalającej dokładności klasyfikacji, proces staje się w pełni zautomatyzowany: cechy są wyodrębniane z każdego piksela w prawidłowych obszarach zainteresowania (ROI), a następnie SVM z dużą precyzją przewiduje odpowiednią kategorię tkanki.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rycina 10A-D przedstawia wyniki zmian objętości płuc i analizę barwienia.

Aby ocenić wpływ bleomycyny (BLM) na tkankę płucną, przeprowadziliśmy analizę porównawczą objętości płuc między grupami leczonymi solą fizjologiczną (Ctrl) a grupami leczonymi BLM przy użyciu technik obrazowania 3D. Objętość lewego płuca jest znacznie zmniejszona w grupie BLM w porównaniu z Ctrl. Kwantyfikacja objętości lewego płuca (mm3) wykazuje...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zwłóknienie płuc jest wyniszczającą chorobą charakteryzującą się postępującym bliznowaceniem tkanki płucnej, prowadzącym do pogorszenia czynności płuc i ostatecznie niewydolności oddechowej1. Mysi model zwłóknienia płuc, indukowany przez różne środki farmakologiczne i metody podawania, jest niezbędnym narzędziem do zrozumienia progresji choroby i oceny skuteczności potencjalnych terapii, szczególnie w przypadku wkraplania dotchawniczego bleomycyny13. Jednak model wkraplania...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Prace te były wspierane przez granty z Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (82300092) i Niezależnego Laboratorium Badawczego Państwowego Kluczowego Laboratorium Chorób Układu Oddechowego (SKLRD-Z-202302) oraz Finansowanie Projektu Budowania Potencjału Innowacyjnego Prowincjonalnych Instytutów Badawczych Guangdong (KD032024001).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
0,9% sól fizjologicznaŻyciorys nadzieiHBPP008-100
igła 22GBD383922
Krajalnica 3D  Platforma przetwarzania obrazuKrajalnica 3D https://www.slicer.org/
BleomycynaMCE (Certyfikat MCE)HY-17565
IzofluranRWDPrzekaźnik R510-22
Zestaw bejc MassonYeasen powiedział:Numer katalogowy: 60532ES58
Mikrotomografia komputerowaSzeń-szeńZobacz materiał SNC-100
OrbitaAnaliza obrazu orbityhttps://www.orbit.bio/
Pentobarbital sodowySigmaZobacz materiał P3761 powiedział:
Laryngoskop dla małych zwierzątInstrumenty YuyanCG-02M
SPSSIBMWersja 19.0 
Ciepły kocTechnologia Lab AnimLAT-16-0323

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Podolanczuk, A. J., et al. Idiopathic pulmonary fibrosis: state of the art for 2023. Eur Respir J. 61 (4), 2200957(2023).
  2. Raghu, G., Selman, M. Nintedanib and pirfenidone: new antifibrotic treatments indicated for idiopathic pulmonary fibrosis offer hopes and raises questions. Am J Respir Crit Care Med. 191 (3), 252-254 (2015).
  3. Moss, B. J., Ryter, S. W., Rosas, I. O. Pathogenic mechanisms underlying idiopathic pulmonary fibrosis. Annu Rev Pathol. 17, 515-546 (2022).
  4. Kolb, P., et al. The importance of interventional timing in the bleomycin model of pulmonary fibrosis. Eur Respir J. 55 (6), 1901105(2020).
  5. Jenkins, R. G., et al. An official American Thoracic Society workshop report: use of animal models for the preclinical assessment of potential therapies for pulmonary fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol. 56 (5), 667-679 (2017).
  6. Wu, Z., et al. Integrating network pharmacology, experimental validation and molecular docking to reveal the alleviation of Yinhuang granule on idiopathic pulmonary fibrosis. Phytomedicine. 128, 155368(2024).
  7. Liao, S., et al. Direct intrabronchial administration to improve the selective agent deposition within the mouse lung. J Vis Exp. (147), e59450(2019).
  8. Fu, Z., et al. Therapeutic effects of fatty acid binding protein 1 in mice with pulmonary fibrosis by regulating alveolar epithelial regeneration. BMJ Open Respir Res. 10 (1), e001568(2023).
  9. Song, S., et al. Intracellular hydroxyproline imprinting following resolution of bleomycin-induced pulmonary fibrosis. Eur Respir J. 59 (5), 2100864(2022).
  10. Pennati, F., et al. Micro-CT-derived ventilation biomarkers for the longitudinal assessment of pathology and response to therapy in a mouse model of lung fibrosis. Sci Rep. 13 (1), 4462(2023).
  11. Choi, E. J., et al. Serial micro-CT assessment of the therapeutic effects of rosiglitazone in a bleomycin-induced lung fibrosis mouse model. Korean J Radiol. 15 (4), 448-455 (2014).
  12. Yang, P., et al. Comprehensive analysis of fibroblast activation protein expression in interstitial lung diseases. Am J Respir Crit Care Med. 207 (2), 160-172 (2023).
  13. Liu, T., De Los, S. F., Phan, S. H. The bleomycin model of pulmonary fibrosis. Methods Mol Biol. 1627, 27-42 (2017).
  14. Ruscitti, F., et al. Longitudinal assessment of bleomycin-induced lung fibrosis by micro-CT correlates with histological evaluation in mice. Multidiscip Respir Med. 12, 8(2017).
  15. Vande, V. G., et al. Longitudinal micro-CT provides biomarkers of lung disease that can be used to assess the effect of therapy in preclinical mouse models, and reveal compensatory changes in lung volume. Dis Model Mech. 9 (1), 91-98 (2016).
  16. Buccardi, M., et al. A fully automated microCT deep learning approach for precision preclinical investigation of lung fibrosis progression and response to therapy. Respir Res. 24 (1), 126(2023).
  17. Ferrini, E., et al. A new anesthesia protocol enabling longitudinal lungfunction measurements in neonatal rabbits by microCT. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 321 (6), L1206-L1214 (2021).
  18. Jensen, M., et al. 3D whole body preclinical microCT database of subcutaneous tumors in mice with annotations from 3 annotators. Sci Data. 11 (1), 1021(2024).
  19. Lai, R., et al. The longitudinal and regional analysis of bleomycininduced pulmonary fibrosis in mice by microcomputed tomography. Heliyon. 9 (5), e15681(2023).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Obrazowanie mikro tomografi komputerow mikro CTjednostronna bleomycyna3D Slicersegmentacja p ucodk adanie kolagenutrichrom Massonawentylowane obszary p uc

Powiązane artykuły