Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Monitorowanie w czasie rzeczywistym dynamiki indukowanej akupunkturą w podskórnej tkance łącznej za pomocą laserowego obrazowania konfokalnego in vivo

559 wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/69173

⸱

10 października 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Institute of Acupuncture and Moxibustion, Jianghan University, 2School of Medicine, Jianghan University, 3Institute of Acupuncture and Moxibustion, China Academy of Chinese Medical Sciences

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Badanie to ustanawia konfokalne obrazowanie konfokalne in vivo jako metodę śledzenia w czasie rzeczywistym dynamiki morfologicznej wywołanej akupunkturą, takiej jak rozszerzenie naczyń krwionośnych i przebudowa kolagenu, u żywych szczurów. Wykorzystując znakowanie fluoresceiną sodu, podejście to pozwala uchwycić zarówno natychmiastowe, jak i opóźnione reakcje tkanek, oferując nowe narzędzie do ilościowej oceny terapii fizycznych, w tym akupunktury i moksowania.

Streszczenie

Dynamiczne monitorowanie efektów akupunktury w czasie rzeczywistym ma kluczowe znaczenie dla wyjaśnienia jej mechanizmów biologicznych, jednak tradycyjne metody histologiczne nie są w stanie uchwycić przejściowych reakcji w żywym mikrośrodowisku. W tym przypadku opracowaliśmy ramy metodologiczne oparte na laserowym obrazowaniu konfokalnym in vivo , umożliwiające obserwację w czasie rzeczywistym zmian morfologicznych w lokalnych tkankach po interwencji akupunktury. Po dożylnym wstrzyknięciu fluoresceiny sodu u szczurów, podczas akupunktury śledzono dynamiczne zmiany w mikrokrążeniu i macierzy zewnątrzkomórkowej (np. ułożeniu włókien kolagenowych). Wyniki wykazały, że metoda ta wyraźnie rozróżnia natychmiastowe (np. rozszerzenie naczyń krwionośnych) i opóźnione (np. odpowiedź zapalna) reakcje tkankowe wywołane akupunkturą, z rozdzielczością przestrzenną 0,5 μm i rozdzielczością czasową 3,5 kl./s. Późniejsza analiza ilościowa umożliwiła obiektywny pomiar parametrów morfologicznych. Protokół ten, opisany w tym badaniu, stanowi narzędzie do wizualizacji dla badań in vivo mechanizmów akupunktury i służy jako techniczne odniesienie do oceny skutków innych bodźców fizycznych (np. Moxibustion).

Wprowadzenie

Akupunktura, jako kamień węgielny medycyny tradycyjnej, wywiera efekty terapeutyczne poprzez złożone reakcje na poziomie tkanek 1,2,3,4. Jednak wgląd mechanistyczny pozostaje ograniczony przez konwencjonalną histologię, która rejestruje statyczne migawki, ale nie rozwiązuje w czasie rzeczywistym dynamiki adaptacji morfologicznych (np. wazomodulacji, przebudowy macierzy zewnątrzkomórkowej) w żywej tkance5. Podczas gdy mikroskopia przyżyciowa oferuje dynamiczny potencjał obrazowania, jej zastosowanie w badaniach nad akupunkturą jest rzadkie, szczególnie w przypadku ilościowego określania czasoprzestrzennych reakcji na bodźce fizyczne 6,7. W przeciwieństwie do tego, to podejście do obrazowania konfokalnego umożliwia ilościową ekstrakcję parametrów strukturalnych i dynamicznych - takich jak szybkość zmian prędkości ruchu czerwonych krwinek i rozmieszczenie kolagenu - w tkankach głębokich (np. warstwach mięśniowych i punktach akupunkturowych ST 36 / GB 34), pokonując ograniczenia konwencjonalnej mikroskopii przyżyciowej w rozdzielczości przestrzennej, obrazowaniu wolumetrycznym i śledzeniu długoterminowym8.

Laserowe obrazowanie konfokalne stało się potężnym narzędziem do wizualizacji in vivo w rozdzielczości komórkowej 9,10,11,12,13. Jednak istniejące badania koncentrują się przede wszystkim na tkankach powierzchownych (np. skórze lub rogówce), a niewiele z nich dotyczy celów głębokiej akupunktury lub integruje ilościową analizę morfologiczną. Co najważniejsze, według naszej wiedzy, nie istnieje żadna ustandaryzowana metodologia, która korelowałaby manipulację akupunkturą ze zmianami kinetycznymi w żywych tkankach.

Tutaj wypełniamy tę lukę, tworząc opartą na obrazowaniu konfokalnym platformę metodologiczną do śledzenia w czasie rzeczywistym zdarzeń morfologicznych wywołanych akupunkturą. Używając fluoresceiny sodu (podawanej dożylnie w stężeniu 1%, 0,1 ml/100 g masy ciała) jako środka kontrastowego, uzyskujemy monitorowanie w wysokiej rozdzielczości (0,5 μm przestrzennie/3,5 fps rozdzielczość czasowa) zmian mikrokrążenia i matrycy w polu widzenia 450 μm × 450 μm na głębokości do 400 μm - od natychmiastowego rozszerzenia naczyń krwionośnych do opóźnionych kaskad zapalnych - podczas stymulacji akupunkturowej. Takie podejście umożliwia ponadto rekonstrukcję 3D i kwantyfikację parametrów wyrównania włókien kolagenowych, pokonując ograniczenia histologii punktu końcowego.

Praktyczne względy związane z implementacją tego protokołu to: (i) zalecany sprzęt obejmuje system konfokalny o rozdzielczości ≥0,5 μm i szybkości akwizycji ≥3 kl./s, (ii) typowe ograniczenia obejmują fotowybielanie powyżej 90 s ciągłego obrazowania i wrażliwość na ruchy oddechowe lub tkanki oraz (iii) penetracja głębokości może być zmniejszona w bardzo gęstych lub rozpraszających się tkankach. Według naszej wiedzy, praca ta nie tylko dostarcza pierwszego dynamicznego atlasu reorganizacji tkanek wywołanej akupunkturą, ale także ustanawia precedens do oceny terapii fizycznych (np. Moxibustion) w żywych systemach. Przekształcając przejściowe reakcje fizjologiczne w wymierne wskaźniki, oferujemy nowy paradygmat dla mechanistycznych badań terapii neuromodulacyjnych.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie procedury zostały zatwierdzone przez Komisję Etyki Zwierząt Instytutu Akupunktury i Moxibustion, Chińskiej Akademii Chińskich Nauk Medycznych (nr D2023-01-29-01). Osiem samców szczurów Sprague Dawley (SD) (8 tygodni, 200-220 g) uzyskano od Biotechnology Co., Ltd. (nr licencji. SCXK (Jing) 2020-0001). Zwierzęta trzymano w wysterylizowanych pomieszczeniach izolacyjnych w kontrolowanych warunkach: 12-godzinny cykl jasny-ciemny, temperatura 21 ±± 2 °C, z dostępem ad libitum do standardowych granulek i wody. Wszystkie eksperymenty były zgodne z wytycznymi instytucjonalnymi oraz Przewodnikiem dotyczącym opieki nad zwierzętami laboratoryjnymi i ich wykorzystywania.

UWAGA: Schemat blokowy przedstawiający główne procedury pokazano na rysunku 1.

1. Przygotowanie zwierzęcia i znacznika: fluoresceina sodowa (FS)

  1. Aby przygotować 1% roztwór barwiący fluoresceinę sodową (FS), należy rozpuścić 0,1 g FS w 10 ml sterylnego roztworu soli fizjologicznej (0,9% NaCl). Roztwór należy przechowywać w temperaturze pokojowej (RT) do późniejszego użycia.
  2. Znieczulenie szczurów SD za pomocą indukcji izofluranu (indukcja: 5% izofluranu, leczenie: 2,5% izofluranu). Usuń włosy z okolicy czaszki (z wyłączeniem głowy) za pomocą elektrycznej maszynki do strzyżenia, a następnie nałóż krem do depilacji na 5 minut. Wyeliminuj resztki śmietany i włosów, spłukując ciepłą wodą.
    UWAGA: Podczas pracy utrzymuj ostrze maszynki równolegle do powierzchni skóry, aby zapobiec urazom skóry, które mogą zagrozić ilościowej analizie obrazowej. Ciepła woda musi być ściśle używana do płukania, aby uniknąć wpływu hipotermii zwierząt na wyniki eksperymentów.

2. Wstrzykiwanie FS

  1. Zabezpiecz szczura.
    1. Znieczulenie szczurów pozbawionych sierści poprzez dootrzewnowe wstrzyknięcie 10% uretanu (1 g/10 ml, w soli fizjologicznej) w dawce 1,0 g/kg.
    2. Po osiągnięciu pełnego znieczulenia należy zabezpieczyć zwierzęta w pozycji leżącej na platformie operacyjnej. Przyłóż delikatne szczypnięcie palca do tylnej łapy za pomocą kleszczy i obserwuj brak odruchu wycofania. Sprawdź utratę odruchu rogówkowego, delikatnie dotykając rogówki wilgotną bawełnianą końcówką.
    3. Potwierdź utrzymujący się brak reakcji i stabilną częstość oddechów przed przystąpieniem do zabiegu. Podczas znieczulenia utrzymuj temperaturę ciała zwierzęcia za pomocą poduszki grzewczej o temperaturze 37 °C.
      UWAGA: Należy potwierdzić pełne znieczulenie, aby zapobiec mimowolnym ruchom, które mogłyby zagrozić przemieszczeniu okienka obrazowego.
  2. Podawać dożylnie 1% roztwór FS przez żyłę ogonową w dawce 0,1 ml na 100 g masy ciała.
    1. Wykonać wstrzyknięcie do żyły ogonowej za pomocą strzykawki o pojemności 1 ml wyposażonej w igłę o sile 27 G. Delikatnie przetrzyj ogon ciepłą wodą, aby pobudzić rozszerzenie naczyń krwionośnych, a następnie zdezynfekuj 70% etanolem.
    2. Wprowadzić igłę pod kątem do góry pod płytkim kątem (≤15°) wzdłuż osi podłużnej żyły. Wstrzykiwać roztwór powoli z szybkością 0,1-0,2 ml/min.
    3. Zapewnij przepływ bez oporu technicznego, brak obrzęku okołonaczyniowego i potwierdź udane wstrzyknięcie przez żółte przebarwienia źrenic, małżowin usznych i łap.
      UWAGA: Należy bezwzględnie unikać przypadkowego wstrzyknięcia dotętniczego.

3. Konfiguracja konfokalnej endomikroskopii laserowej in vivo (pCLE)

  1. Aktywuj system pCLE i sprawdź czystość zarówno złącza sondy skanującej, jak i dystalnej końcówki.
  2. Wyczyść dystalną końcówkę sondy (nazywaną również końcówką skanującą) za pomocą bawełnianego wacika zwilżonego solą fizjologiczną, a następnie delikatnie osusz chusteczką do soczewek.
  3. Umieść sondę laserową w docelowym miejscu obserwacji (np. w przyśrodkowej okolicy uda). Zabezpiecz sondę do obrazowania konfokalnego za pomocą regulowanego zacisku, zapewniającego stabilny kontakt z powierzchnią tkanki bez artefaktów kompresji, i zamocuj ją, dokręcając pokrętło regulacyjne.
  4. Podłącz sondę do systemu pCLE i skonfiguruj parametry akwizycji (np. pole widzenia [FOV], katalog pamięci). Konkretne parametry użyte w tym eksperymencie są następujące:Głębokość: 18 μm; Laser: 219 mW; Jasność: 76%; Prędkość: 1920 × 540; Zysk: 2400; Zoom: 1× (464 μm); Filtr: LP 515; Tabela przeglądowa: Skan szary.
    UWAGA: Parametry obrazowania (głębokość skanowania/moc lasera) były iteracyjnie optymalizowane, aż do uzyskania wyraźnej wizualizacji architektury tkanki. Stała intensywność ma kluczowe znaczenie dla porównywalności obrazów podłużnych. Dodanie kropelek soli fizjologicznej o temperaturze 37 °C na granicy faz sonda-tkanka wyeliminowało utratę sygnału obserwowaną w początkowych iteracjach. Moc lasera użyta w tym badaniu jest poniżej powszechnie akceptowanego progu fototoksyczności w obrazowaniu konfokalnym in vivo .

4. Obrazowanie struktury organizacyjnej z pCLE i akwizycją

  1. Umieść sondę na powierzchni skóry i rozpocznij akwizycję danych w celu wizualizacji architektury tkanki.
    1. Trzymaj sondę w sposób jak ołówek; Manewruj nim w obszarach docelowych (np. obszarach z naczyniami krwionośnymi lub włóknistą tkanką łączną w polu widzenia), umieść dystalną końcówkę bezpośrednio w strefie obrazowania, a następnie ustabilizuj za pomocą ramienia sondy.
  2. Najpierw uzyskaj wyjściową architekturę tkanki przez 1 minutę w warunkach fizjologicznych, a następnie 5 minut rejestracji podczas interwencji akupunktury. Zakończ akwizycję po interwencji. Pliki danych są automatycznie zapisywane w katalogu określonym w kroku 3.3-3.4.
    UWAGA: Pliki są zapisywane jako stosy warstw (.tiff) i pojedyncze klatki (.tiff).

5. Interwencja akupunkturowa

UWAGA: Akwizycja na etapie obrazowania odbywa się podczas interwencji.

  1. Włóż jednorazową igłę ze stali nierdzewnej o wartości 1 cun (chińska jednostka długości wynosi około 13 mm) do punktu akupunkturowego przylegającego do tkanki obserwowanej przez sondę. Podłącz jeden przewód do igły ze stali nierdzewnej, a drugą elektrodę odniesienia przymocuj do ogona szczura.
  2. Zastosuj stymulację elektroakupunkturą (EA) przy użyciu następujących parametrów: natężenie 1 mA, gęsta fala rozproszona (2/15 Hz), przez 5 minut.
    UWAGA: Zachowaj wystarczającą odległość (>3 mm) między miejscem wkłucia igły a sondą, aby zapobiec drżeniu skóry wywołanemu przez EA, które zagraża stabilności obrazu.

6. Analiza obrazu

  1. Otwórz uzyskane stosy obrazów w ImageJ. Konwertuj kalibrację przestrzenną na mikrometry i przekształć format obrazu na 8-bitowy, aby zapewnić kompatybilność z wtyczkami (typ obrazu > > 8-bitowy).
    UWAGA: Domyślne wymiary obrazu są podane w calach (ustawienie specyficzne dla systemu).
  2. Zdefiniuj obszar zainteresowania (ROI) dla: mikrokrążenia: pojedynczy segment kapilarny, struktura matrycy: obszar włókien kolagenowych. Utrzymuj identyczne zwroty z inwestycji na sekwencyjnych obrazach, aby uzyskać spójność podłużną.
  3. Analiza mikrokrążenia
    1. Wybierz obszar zawierający czerwone krwinki, który należy obserwować, i przytnij obraz, aby usunąć inne obszary zakłócające (Prostokąt > Obraz > Przytnij). Użyj narzędzia progowego , aby podzielić na segmenty wyłącznie czerwone krwinki (RBC) (Obraz > narzędzie Dostosuj > próg).
    2. Załaduj wtyczkę MTrack2 . Ustaw odpowiednie parametry śledzenia w oparciu o rozmiar RBC (w tym eksperymencie 10-42 piksele), aby wykluczyć zakłócenia i zapewnić dokładne śledzenie RBC (Plugin > Tracking > MTrack2).
  4. Macierzowa analiza statyczno-wytrzymałościowa
    1. Załaduj wtyczkę Kierunkowość , wybierz tryb składników Fouriera i przeprowadź analizę statystyczną proporcji rozkładu włókien kolagenowych w orientacjach od 0° do 180° (Analizuj kierunkowość >).

7. Finalizacja danych

  1. Wyeksportuj analizowane dane w formatach TIFF/XSL przy użyciu konwencji nazewnictwa: [Grupa]_[Data].extension. Utwórz kopię zapasową wszystkich nieprzetworzonych i przetworzonych plików na wyznaczonym bezpiecznym serwerze. Rejestruj wyniki ilościowe w arkuszu kalkulacyjnym podsumowania na potrzeby analizy statystycznej.

8. Bezpieczeństwo i gospodarka odpadami

  1. Środki ochrony indywidualnej (PPE): Podczas pracy z uretanem, izofluranem lub fluoresceiną sodową należy nosić rękawice nitrylowe, fartuch laboratoryjny i okulary ochronne.
  2. Postępowanie ze środkiem znieczulającym: Wykonuj zabiegi z użyciem uretanu lub izofluranu w okapie wyciągowym, aby zminimalizować narażenie na inhalacje.
  3. Środki ostrożności dotyczące ostrych narzędzi: Wszystkie igły i ostre przedmioty należy natychmiast wyrzucić do wyznaczonych pojemników na ostre przedmioty odpornych na przebicie.
  4. Bezpieczeństwo elektroakupunktury (EA): Sprawdź izolację galwaniczną sprzętu EA i zabezpiecz połączenia przewodów, aby zapobiec prądom upływowym lub zwarciom.
  5. Utylizacja odpadów: Wyrzuć butelki z izofluranem jako odpady medyczne zgodnie z wytycznymi instytucjonalnymi. Odpady materiałów zanieczyszczonych barwnikiem (np. waciki, chusteczki higieniczne) należy utylizować w szczelnych pojemnikach na odpady niebezpieczne. Ostre przedmioty należy zbierać w certyfikowanych pojemnikach na ostre odpady.
    UWAGA: Wszystkie procedury muszą być zgodne z instytucjonalnymi przepisami dotyczącymi bezpieczeństwa i zdrowia środowiskowego.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Protokół ten demonstruje użyteczność pCLE do dynamicznej oceny wpływu akupunktury na mikrokrążenie i architekturę macierzy zewnątrzkomórkowej w czasie rzeczywistym. Po dożylnym podaniu fluoresceiny sodu przez żyłę ogonową oceniano zmiany, obserwując zmiany prędkości erytrocytów w lokalnych naczyniach włosowatych i reorganizację ułożenia włókien kolagenowych.

Reprezentatywne wyniki po 5 minutach od akupunktury ujawniły przyspiesz...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Jak wykazano w wynikach, protokół obrazowania konfokalnego in vivo opracowany w tym badaniu umożliwia jednoczesną analizę ilościową dynamiki mikrokrążenia i macierzy zewnątrzkomórkowej podczas interwencji akupunkturowej przy użyciu standardowego dostępnego na rynku sprzętu i rutynowego znakowania fluorescencyjnego. Sukces tego protokołu opiera się na dwóch krytycznych etapach: precyzyjnym czasie wstrzyknięcia fluoresceiny sodu, zapewniającym trwały kontrast mikronaczyniowy14, oraz rygorys...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Badania te zostały sfinansowane przez Narodowy Kluczowy Program Badawczo-Rozwojowy Chin (2024YFA1209900, 2024YFA1209903, 2024YFA1209904); Fundusze Specjalne Chińskiej Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych (82050006); Projekt badawczy TCM Administracji Medycznej TCM prowincji Hubei (ZY2025Z015); Fundusz Badawczy Uniwersytetu Jianghan (2024JCYJ13).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
1 igła do akupunktury cunHwato, Suzhou, Chińska Republika LudowaN/A13 mm/0,25 mm
10% fluoresceiny sodowejGuangxi Wuzhou Pharmaceutical Co Ltd, ChinyH45021477
Maszyna do znieczulenia zwierzątRWD, Shenzhen, Chińska Republika LudowaR620IE
Monitor temperatury ciałaRWD, Shenzhen, Chińska Republika Ludowa69026
Elektryczny aparat do akupunkturyHwato, Suzhou, Chińska Republika LudowaSDZ-III
Krem do depilacjiVeet, Francja
ObrazJNarodowe Instytuty Zdrowia, Stany Zjednoczonehttps://imagej.nih.gov/ij/
Endomikroskopia laserowa konfokalna z sondą in vivoOptiscan, AustraliaViewnVivoB30 powiedział:Średnica: 4 mm ręczna sztywna sonda, odporna na zginanie i zachowująca integralność strukturalną w czasie. Długość: ≥ 46 mm. Tryb skanowania: Możliwość skanowania z zoomem.
IzofluranRWD, Shenzhen, Chińska Republika Ludowa
R510-22-16
UretanoweSigma-Aldrich, Stany Zjednoczone94300

Bibliografia

  1. Mo, Y., et al. Acupuncture as adjunctive treatment for linezolid-induced peripheral neuropathy: a case series report. Front Neurol. 21 (15), 1388544(2024).
  2. Roynard, P., Frank, L., Xie, H., Fowler, M. Acupuncture for small animal neurologic disorders. Vet Clin North Am Small Anim Pract. 48 (1), 201-219 (2018).
  3. Zhou, L., Li, X., Ao, J., Duan, N. Acupuncture and cellular mechanisms: the role of foxo transcription factors in autophagy and senescence. J Pak Med Assoc. 74 (12), 2150-2154 (2024).
  4. Chen, Y., Zhang, F., Zheng, P., Cui, D., Fan, X. Postpartum stress urinary incontinence: current advances in non-pharmacological therapies. Arch Esp Urol. 78 (1), 1-9 (2025).
  5. Dietel, M. 20 years of pathology: from conventional histology to next-generation pathology. Pathologie. 45 (3), 167-172 (2025).
  6. Cao, L., Kobayakawa, S., Yoshiki, A., Abe, K. High resolution intravital imaging of subcellular structures of mouse abdominal organs using a microstage device. PLoS One. 7 (3), e33876(2012).
  7. Vaghela, R., Arkudas, A., Horch, R. E., Hessenauer, M. Actually seeing what is going on-intravital microscopy in tissue engineering. Front Bioeng Biotechnol. 9 (17), 627462(2021).
  8. Zhang, H., He, Z., Jin, Z., Yan, Q., Wang, P., Ye, X. The development and clinical application of microscopic endoscopy for in vivo optical biopsies:endocytoscopy and confocal laser endomicroscopy. Photodiagnosis Photodyn Ther. 38, 102826(2022).
  9. Streba, C. T., et al. Utility of confocal laser endomicroscopy in pulmonology and lung cancer. Rom J Morphol Embryol. 57 (4), 1221-1227 (2016).
  10. Chaw, S. Y., Wong, T. T. L., Venkatraman, S., Chacko, A. M. Spatio-temporal in vivo imaging of ocular drug delivery systems using fiberoptic confocal laser microendoscopy. J Vis Exp. (175), e62685(2012).
  11. Tian, S., et al. The role of confocal laser endomicroscopy in pulmonary medicine. Eur Respir Rev. 32 (167), 220185(2023).
  12. Villard, A., et al. Confocal laser endomicroscopy and confocal microscopy for head and neck cancer imaging: recent updates and future perspectives. Oral Oncol. 127, 105826(2022).
  13. Sievert, M., et al. Systematic interpretation of confocal laser endomicroscopy:larynx and pharynx confocal imaging score. Acta Otorhinolaryngol Ital. 42 (1), 26-33 (2022).
  14. Ren, W., et al. Expanding super-resolution imaging versatility in organisms with multi-confocal image scanning microscopy. Natl Sci Rev. 11 (9), nwae303(2024).
  15. Xia, Q., Li, D., Yu, T., Zhu, J., Zhu, D. In vivo skin optical clearing for improving imaging and light-induced therapy: a review. J Biomed Opt. 28 (6), 060901(2023).
  16. Zhang, C., Feng, W. Assessment of tissue-specific changes in structure and function induced by in vivo skin/skull optical clearing techniques. Lasers Surg Med. 54 (3), 447-458 (2022).
  17. Leal-Campanario, R., Martinez-Conde, S., Macknik, S. L. In vivo fiber-coupled pre-clinical confocal laser-scanning endomicroscopy (pCLE) of hippocampal capillaries in awake mice. J Vis Exp. (194), e57220(2023).
  18. Huo, Z. J., et al. The ameliorating effects of long-term electroacupuncture on cardiovascular remodeling in spontaneously hypertensive rats. BMC Complement Altern Med. 14, 118(2014).
  19. Yunshan, L., Chengli, X., Peiming, Z., Haocheng, Q., Xudong, L., Liming, L. Integrative research on the mechanisms of acupuncture mechanics and interdisciplinary innovation. Biomed Eng Online. 24 (1), 30(2025).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Dynamika akupunkturyobrazowanie in vivozmiany mikrokrążeniaukład włókien kolagenowychmacierz pozakomórkowaodpowiedź naczyniorozszerzającamorfologia ilościowa
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.