Artykuł metodologiczny

Zintegrowana strategia UHPLC-MS/MS i HRMS do przesiewania potencjalnie hepatotoksycznych związków zawierających furan w Dioscorea bulbifera L.

DOI:

10.3791/70865

⸱

19 maja 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The First Affiliated Hospital of Guizhou University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Pharmacy, Guizhou University of Traditional Chinese Medicine, 3School of Medicine and Health Management, Guizhou Medical University, 4Guizhou Provincial Engineering Research Center for the Development and Application of Ethnic Medicine and TCM, Guizhou Medical University

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W niniejszym badaniu opracowano zintegrowaną strategię łączącą UHPLC–MS/MS i HRMS, aby wykryć potencjalnie hepatotoksyczne związki zawierające furan w Dioscorea bulbifera L.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dioscorea bulbifera L. (DBL), tradycyjny ziołolek stosowany w leczeniu chorób tarczycy i guzów, wzbudził poważne obawy dotyczące bezpieczeństwa ze względu na potencjalne działanie hepatotoksyjne. Wcześniejsze badania sugerują, że to uszkodzenie wątroby może być związane z metabolicznym aktywowaniem związków zawierających furan (FCC) obecnych w DBL. Systematycznie scharakteryzowaliśmy FCC i ich reaktywne metabolity w ekstrakcie DBL za pomocą zintegrowanego podejścia analitycznego łączącego ultrawydajną chromatografię cieczową w połączeniu z tandemografią mas (UHPLC-MS/MS) oraz ultrawysokowydajną chromatografią cieczową połączoną z tandemową spektrometrią mas wysokiej rozdzielczości (UHPLC-HRMS). Stosując zarówno ukierunkowaną, jak i nieukierunkowaną spektrometrię mas, zidentyfikowaliśmy łącznie 849 składników w wodnistym ekstrakcie DBL, w tym 10 furanoditerpenoidów oraz 17 dodatkowych FCC. Aby wyjaśnić szlaki aktywacji metabolicznej, użyliśmy glutationu (GSH) i 4-bromobenzylaminy (BBA) jako podwójnych środków pułapkowych w systemie inkubacji wątroby myszy (MLM). Dzięki metabolizmowi podleganemu P450 udało się skutecznie uwięzić i scharakteryzować siedem odpowiadających adduktów pochodzących z diosbulbiny B (DSB), C (DSC), D (DSD), E (DSE), L (DSL), N (DSN) oraz 2-pentylfuranu. Niniejsze badanie ustanawia wrażliwe i konkretne podejście do kompleksowego profilowania potencjalnie hepatotoksycznych związków furanu w DBL oraz dostarcza cennych informacji na temat powstawania reaktywnych metabolitów i mechanizmów toksyczności związanych z ziołowym lekiem zawierającym furan.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Obawy dotyczące bezpieczeństwa związane z tradycyjną medycyną chińską (TCM), zwłaszcza uszkodzenia wątroby wywołane lekami (DILI), utrudniają ich szeroką użyteczność kliniczną i modernizację 1,2,3. Rosnące dowody sugerują, że większość składników TCM nie jest z natury toksyczna; Zamiast tego ich hepatotoksyczność wynika z aktywacji metabolicznej in vivo 1,4,5. Związki zawierające furan (FCC) są dobrze znane jako znaczące prekursory hepatotoksyczne, podlegające metabolicznej aktywacji podlegającej P450, co prowadzi do produkcji wysoce reaktywnych elektrofilowych pośredników, w szczególności cis-enedialnych, które są kluczowe w inicjowaniu toksyczności wątroby. Te elektrofilowe metabolity tworzą kowalencyjne adukty z cysteinowymi tiolami oraz aminogrupami niezbędnych białek, co ułatwia postęp toksycznych efektów 6,7,8.

W TCM Dioscorea bulbifera L. (DBL) była szeroko stosowana w leczeniu chorób tarczycy, guzów i chorób skóry 9,10. Łącznie wyizolowano i scharakteryzowano 152 składniki chemiczne z DBL, w tym 41 furanoditerpenoidów11. Wśród nich wykazano, że diosbulbina B (DSB), główny bioaktywny składnik, wywołuje uszkodzenia wątroby w modelach myszych, efekt ściśle powiązany z powstaniem DSB-pochodnej cis-enedial (DDE)12,13. Dzięki postępom w instrumentacji analitycznej, spektrometria mas stała się ważnym narzędziem do analizy złożonych składników chemicznych i metabolitów TCM14,15. Tradycyjnie cis-enediale produkowane przez metabolizm DSB wykrywa się poprzez uwięzienie elektrofilowych substancji z N-acetylo-L-lizyną w połączeniu z glutationem lub N-acetylo-L-cysteiną, a następnie analizą LC-MS/MS uzyskanych chemicznie stabilnych pochodnych pirrolowych16,17. Bazując na tym podejściu, wcześniej opracowaliśmy ulepszoną strategię wykorzystującą jednoczesne pułapki metabolicznych pośredników pochodzących z furanu z GSH i BBA, połączoną z analizą LC-MS/MS za pomocą neutralnego skanu strat 129 Da oraz skanu jonów prekursorowych m/z 272 dla aduktów GSH, wraz ze skanem jonów prekursorowych 1:1 m/z 169 i 171 pochodzącym z połowy BBA do wykrywania pirrolu (Rysunek 1)18, 19. Choć skuteczne dla znanych furanoidów, to podejście wykazuje wyraźne ograniczenia stosowane w złożonych mieszaninach, szczególnie w przypadku FCC pozbawionych wcześniejszych informacji strukturalnych. Dlatego nadal istnieje pilna potrzeba kompleksowej strategii analitycznej, która umożliwi dokładną charakterystykę chemiczną złożonych macierzy TCM, jednocześnie wspierając efektywne przesiewowe badania prekursorów hepatotoksycznych.

Przedstawiamy tutaj zintegrowaną strategię systematycznej charakterystyki potencjalnie hepatotoksycznych FCC w DBL (Rysunek 2). Strategia obejmuje trzy kluczowe etapy: (i) kompleksowe profilowanie chemiczne wodnego ekstraktu DBL z wykorzystaniem szeroko ukierunkowanej metabolomiki (WTM) na podstawie UHPLC–MS/MS; (ii) łapanie reaktywnych pośredników generowanych przez FCC z GSH i BBA; oraz (iii) wykrywanie i wyjaśnianie strukturalne adduktów GSH/BBA powstałych w wyniku metabolicznej aktywacji potencjalnie toksycznych składników przy użyciu HPLC–MS/MS oraz UHPLC–MS/MS. To zintegrowane podejście umożliwia jednoznaczną identyfikację kluczowych toksycznych prekursorów odpowiedzialnych za hepatotoksyczność indukowaną przez DBL z złożonych macierzy TCM i zapewnia wysoce wrażliwe i szczegółowe ramy oceny bezpieczeństwa TCM.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

UWAGA: Odczynniki i sprzęt użyty w tym badaniu są wymienione w Tabeli Materiałów.

1. Przygotowanie rozwiązania testowego DBL

  1. Zbierz i uwierzytelnij trzy partie bulw Dioscorea bulbifera L. Zgodnie z Krajowymi Przepisami dotyczącymi przetwarzania TCM usuń włókniste korzenie z bulw, umyj je, aby usunąć brud, pokroj na okrągłe plastry o grubości 1 cm, gdy są świeże, susz w piekarniku z wymuszonym powietrzem w temperaturze 60 °C, następnie usuń i schłodzi do temperatury pokojowej20°C.
  2. Z każdej partii zważ 200 g DBL i zmiel je na gruby proszek (cząsteczki o wielkości 250-850 μm) za pomocą szybkoprędkościowej kruszarki.
  3. Namocz 20 g surowego proszku w 200 mL wody dejonizowanej (1:10, w/v) przez 30 minut. Równocześnie przetworz mieszaninę trzech partii grubego proszku przygotowanego w kroku 1,2 (mieszanym w proporcji 1:1:1, w/sz).
  4. Wyciągnij namoczony materiał, podgrzewając go pod refluksem przez 60 minut. Przefiltruj ekstrakt przez gazę lub sito, aby usunąć nierozpuszczalne pozostałości. Dodaj 200 ml wody dejonizowanej do pozostałej resztki i powtórz ekstrakcję refluksową 2 razy, za każdym razem przez 60 minut. Połącz wszystkie trzy filtraty i skoncentruj zebrany ekstrakt przez gotowanie do ostatecznej objętości 100 mL.
  5. Przelej skoncentrowany ekstrakt do liofilizacji próżniowej i liofilizuj, aby uzyskać proszek.
  6. Dokładnie zważ 18 mg każdej partii proszku ekstraktu. Rozpuszczaj każdy w 1,5 mL 50% acetonitrylu i wiruj mieszankę przez 30 sekund, aby zapewnić jednorodność.
  7. Wiruj roztwór w 13 800 x g przez 10 minut w 4°C i zbieraj supernatant jako roztwór inkubacyjny MLM.
  8. Pipetować 20 μL roztworu zapasowego, rozcieńczyć do 1:50 z 50% acetonitrylem i zastosować wir przez 30 sekund. Następnie przefiltruj roztwór przez mikroporowatą membranę o średnicy 0,22 μm, aby uzyskać roztwór próbki gotowy do analizy spektrometrii mas.

2. Charakterystyka chemiczna DBL

  1. Warunki chromatograficzne
    1. Użyj kolumny C18 (2,1 mm x 100 mm, 1,8 μm) i ustaw temperaturę piekarnika kolumnowego na 40 °C. Przygotuj fazę mobilną A jako kwas mrówkowy 0,1% (v/v) w wodzie oraz fazę mobilną B jako acetonitryl.
    2. Zaprogramuj elucię gradientu w następujący sposób: 0–10 min, 2%–50% B; 10–11 min, 50%–95% B; oraz 11–13 min, 95% B. Ustaw przepływ na 0,4 mL/min i wstrzykni 2 μL próbki.
  2. Wykonaj analizę spektrometryczną mas przy użyciu następujących parametrów: Źródło jonów: jonizacja elektrosprayowa IonDrive Turbo V (ESI); Tryb pozyskiwania: Monitorowanie wielokrotnej reakcji (MRM) z jednoczesnym pozyskiwaniem w trybach dodatnim i ujemnym jonów; Napięcie natrysku jonowego: +5,5 kV (dodatnie) / −4,5 kV (ujemne); Gaz kurtynowy (curtain gas): 35 psi; Temperatura źródłowa: 400 °C; Gaz źródłowy jonowy 1: 60 psi; Gaz źródłowy jonowy 2: 60 psi; Potencjał deklasteryzacji (DP): ±100 V.
  3. Przetwarzanie danych
    1. Pozyskiwanie i przetwarzanie danych MRM za pomocą oprogramowania analitycznego SCIEX (v1.6.3). Przekonwertowanie surowych plików danych (.wiff) do formatu TXT za pomocą MSConvert. Notuj wykryte związki, zapytując autorską bibliotekę BiotreeDB (V2.1) MS. Adnotacja opierała się na dopasowaniu czasów retencji (RT), stosunku masy do ładunku (m/z) oraz wzorców fragmentacji z autentycznymi standardami.

3. Charakterystyka sprzężeń GSH/BBA generowanych w inkubacjach MLM

  1. Inkubacja MLM
    1. Powoli rozmrażaj mikrosomalną zawiesinę wątroby myszy na lodzie. Na lodzie przygotuj mieszaninę inkubacyjną w rurce mikrowirówki o pojemności 2 mL, dodając kolejno wymienione poniżej składniki. Dodaj system regenerujący NADPH na końcu. Dla grupy kontrolnej zastąpić system regenerujący NADPH równą objętością lodowatego PBS. Krótko zmieszać wir.
      1. Przygotuj mieszankę inkubacyjną składającą się z następujących składników: Mikrosomalna zawiesina wątroby myszy (MLM, białko 4 mg/mL): 125 μL; Roztwór chlorku magnezu (MgCl₂) (32 mM): 10 μL; DBE (12 mg/mL) lub roztwór standardowy DSB (35 mM): 10 μL; Roztwór glutationu (GSH) (50 mM): 100 μL; Roztwór BBA (250 mM): 10 μL; Bufor PBS (pH 7,4, zawierający 1,0 mol/L EDTA i 0,1 mol/L K2HPO4): 145 μL; Roztwór systemu regenerującego NADPH (5,0 mM): 100 μL.
    2. Natychmiast po zakończeniu inkubacji należy usunąć wszystkie probówki z inkubatora. Zakończ reakcję enzymatyczną, dodając 1 ml lodowatego acetonitrylu (-20 °C) do każdej probówki.
    3. Vortex przez 3 minuty, aby wytrącić białka. Wirować w 13 800 x g przez 10 minut w 4 °C.
    4. Zbieraj supernatant, filtruj przez membranę o średnicy 0,22 μm i przelej filtrat do fiolki autopróbkowej.
  2. Wstępne badanie inkubacji MLM ekstraktów DBL przez HPLC-MS/MS
    1. Warunki chromatograficzne
      1. Użyj kolumny C18 (150 mm x 4,6 mm, 3 μm) i ustaw temperaturę kolumny na 25 °C. Przygotuj fazę mobilną A jako kwas mrówkowy 0,1% (v/v) w wodzie oraz fazę mobilną B jako acetonitryl.
      2. Przebiegnij następujący nachylenie: 0–2 min, 10% B; 2–15 min, liniowe zwiększenie od 10% do 90% B. Ustaw przepływ na 0,8 mL/min i wstrzykni 5 μL przygotowanej próbki.
    2. Warunki spektrometryczne mas. Ustaw zakres pełnego skanowania na m/z 500–1000. Skanowanie jonów prekursorowych (PI) w m/z 169 i 171, skan strat neutralnych (NL) 129 Da w trybie dodatnim jonów oraz skan PI przy m/z 272 w trybie ujemnym jonów. Ustaw kluczowe parametry następująco: napięcie natrysku jonowego (IS), +5 500 V (dodatnie) / −4 500 V (ujemne); potencjał deklasteryzacji (DP), ±70 V; potencjał wejściowy (EP), ±10 V; energia kolizji (CE), +35 V (dodatnia) / −40 V (ujemna); potencjał wyjścia komórki kolizyjnej (CXP), ±10 V; gaz źródłowy jonowy 1 i 2 (GS1/GS2), każdy o napięciu 50 psi; gaz kurtynowy (CUR), 40 psi; oraz temperaturę źródłową (TEM), 650 °C.
    3. Zbieranie i przetwarzanie wszystkich danych ze spektrometrii mas za pomocą oprogramowania analitycznego SCIEX (v1.6.3).
  3. Identyfikacja pochodnych pirrolowych i FCC przez UHPLC-HRMS
    1. Warunki chromatograficzne
      1. Użyj kolumny C18 (2,1 mm x 100 mm, 1,9 μm) i ustaw piec kolumnowy na 30 °C. Przygotuj fazę mobilną A jako kwas mrówkowy 0,1% (v/v) w wodzie oraz fazę mobilną B jako acetonitryl.
      2. Zaprogramuj gradient w następujący sposób: 0-20 min, 5%-95% B; 20-21 min, 95% B. Ustaw przepływ na 0,3 mL/min i wstrzykni 2 μL próbki.
    2. Przeprowadz analizę spektrometryczną mas według następujących parametrów: Źródło jonów: ESI; napięcie natrysku jonowego: +3,5 KV (jony dodatnie)/-2,5 KV (jony ujemne); temperatura kapilar: 320 °C; temperatura podgrzewacza sondy: 350 °C; gaz pochwowy: 10 arb; maksymalny prąd natrysku: 100 μA; Poziom RF obiektywu S: 50%; energia zderzenia: 35 V (jony dodatnie) i 40 V (jony ujemne); Zakres skanowania: 100-1000 m/z.
    3. Wstępne przetwarzanie danych
      1. Na podstawie zidentyfikowanych FCC z DBL oraz mechanizmu pułapkowania (Rysunek 1), narysuj przewidywane koniugaty GSH/BBA za pomocą ChemBioDraw Ultra 14.0 (Rysunek uzupełniający 1).
      2. Zaimportuj pozyskane surowe pliki HRMS (.raw) do modułu Qual Browser w Xcalibur (V4.1). Stwórz w oprogramowaniu workflow identyfikacji, aby przesiewać GSH/BBA sprzężone.
      3. Porównaj eksperymentalne widma MS1 iMS 2 z przewidywanymi strukturami sprzężonych GSH/BBA pochodzących z FCC (przewidywanych za pomocą ChemBioDraw Ultra 14.0) na podstawie znanych mechanizmów addukcji (Rysunek 1 i Ilustracja uzupełniająca 1). Stosuj minimalny próg maksymalnej intensywności 1 x 105 oraz tolerancję dokładności masy ± 10 ppm dla wszystkich monitorowanych jonów. Potwierdź sprzężenia na podstawie charakterystycznego wzorca izotopów bromu (około 1:1) obserwowanych zarówno w widmach MS1, jak iMS 2, w tym jony diagnostyczne m/z 169 i 171.
      4. Określ masy cząsteczkowe macierzystych FCC, odejmując masę tagu GSH/BBA od obserwowanych jonów molekularnych. Do odejmowania użyj 472/474 Da (C17H21O5N4BrS).
      5. Scharakteryzuj nadrzędne FCC w DBL jako UHPLC–HRMS na podstawie powyższych wyników.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zidentyfikowane FCC w DBL
Do scharakteryzowania profilu chemicznego DBL zastosowano kombinację potrójnych kwadrupolów WTM i profilowania HRMS. To podwójne podejście umożliwiło kompleksową analizę wyekstrahowanych par jonów, generując bardzo pouczające chromatogramy jonów ekstrahowanych (EIC, rysunek 3A) oraz całkowite chromatogramy jonowe (TICs, rysunek 3B). W zoptymalizowanych warunkach chromatograficznych i detekcyjnych zidentyfikowano łą...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wcześniejsze badania nad jatrzotoksycznością DBL koncentrowały się głównie na metabolicznych pośrednikach poszczególnych FCC z wykorzystaniem strategii ukierunkowanego wychwytywania 9,22. Chociaż te podejścia dostarczają cennych mechanistycznych informacji, ich skuteczność w złożonych macierzach ziołowych często jest ograniczona przez słabą wykrywalność niskolicznych bioaktywowanych pośredników. W niniejszym badaniu opracowaliśmy ulepszony workflow analityczny do...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Prace te były wspierane przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (nr 82360759), Fundację Nauk Przyrodniczych prowincji Guizhou (nr ZK [2024]406, ZK [2024] 397, Postdoctoral Station [2021]007, BSH [2024]005) oraz Guizhou University of Traditional Chinese Medicine TD Hopes [2023]005.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
4-bromobenzylaminaJiuding Chemical (Szanghaj) Technology Co., LtdX114214A
AcetonitrylSigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co., Ltd1000294000
WirówkaWuxi BaiTaKe Biotechnology Co., LtdCR3180
Chromatografia  sample  ButelkiZhejiang ALWSCI Technology Co., LtdC0000008
diosbulbin BChengdu PufeiDe Biotech Co., Ltd18022603
Dioscorea bulbifera L.-DBL-1; DBL-2; DBL-3Materiały roślinne zostały potwierdzone przez prof. Weike Jianga (Uniwersytet Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Guizhou, Guiyang, Chiny), a próbki na podstawie certyfikatów zostały zdeponowane w Kluczowym Laboratorium Farmakologii Podstawowej prowincji Guizhou.
Elektroniczna wagaFabryka Elektronicznych Instrumentów Anting w SzanghajuFA1004B
Kwas mrówkowyThermo Fisher Scientific Co., Ltd195715
GlutationSigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co., LtdSLBX5462
Wysoka prędkość  CrusherYongkang Biao Hardware Products Co., LtdXC-2000Y
Myszy Kunming Mikrosomy wątroby (męskie)Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd.MB12496-1
Chlorek magnezuPekin Solarbio Science & Technology Co., LtdM8161
MetanolSigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co., Ltd646377
Filtr miliporowyTianjin Jinteng Experimental Equipment Co., LtdNylon66
NADPH Na4Pekin Solarbio Science & Technology Co., Ltd102X022
PiekarnikInstrument Laboratorium Tianjin & Equipment Co., LtdGFL125
Sól fizjologiczna z buforem fosforanowymBeyotime Biotechnology  Co., LtdC0221B
Termostatic  water  bath  OscylatorShanghai Zijia Instrument Co., LtdTHZ-82A
Ultra-zamrażarkaThermo Fisher Scientific Co., LtdTDE60086FV-ULTI
Czyścicielka ultradźwiękowaShanghai Zijia Instrument Co., LtdL10-250A
Vortex MixerFabryka Narzędzi Medycznych Jiangsu HaimenVM-D

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ma, Z., Shi, Z., Xiao, X., Wang, J. New insights into herb-induced liver injury. Antioxid Redox Signal. 38 (16-18), 1138-1149 (2023).
  2. Yang, Y., et al. A review of herb-induced liver injury in mainland China. Front Pharmacol. 13, 813073(2022).
  3. Shen, T., et al. Incidence and etiology of drug-induced liver injury in mainland China. Gastroenterology. 156 (8), 2230-2241 (2019).
  4. Zhou, Y., et al. Mechanism of drug-induced liver injury and hepatoprotective effects of natural drugs. Chin Med. 16 (1), 135(2021).
  5. Wang, Y., et al. Metabolic activation of toxic natural products from herbal and dietary supplements leading to toxicities. Front Pharmacol. 12, 758468(2021).
  6. Pan, J., et al. Difference in hepatotoxicity of furan-containing components in Cortex Dictamni correlates with the efficiency of their metabolic activation. Phytomedicine. 114, 154778(2023).
  7. Liao, Y., et al. DNA damage and up-regulation of PARP-1 induced by columbin in vitro and in vivo. Toxicol Lett. 379, 20-34 (2023).
  8. Tian, M., Peng, Y., Zheng, J. Metabolic activation and hepatotoxicity of furan-containing compounds. Drug Metab Dispos. 50, 2458-2471 (2022).
  9. Hu, Z., et al. Development of a mechanism-based biomarker for Dioscorea bulbifera L. exposure and hepatotoxicity in rats. Phytomedicine. 102, 154172(2022).
  10. Narzary, C., Sarkar, D., Das, P., Papi, D. Ethnobotany phytochemistry, and pharmacological activity of Dioscorea bulbifera: A comprehensive review. Chem Biodivers. 22 (1), e202401408(2025).
  11. Guan, X., et al. Bioactivity,toxicity and detoxification assessment of Dioscorea bulbifera L.: A comprehensive review. Phytochem Rev. 16 (3), 573-601 (2017).
  12. Jiang, Y., et al. Disruption of acetyl-CoA acyltransferase 2 resulting from exposure to diosbulbin B. Chem Res Toxicol. 38 (7), 1203-1214 (2025).
  13. Yang, Y., et al. Histones H2B/H3 selectively modified by acis-enedial metabolite resulting from metabolic action of diosbulbin B: Potential target proteins for antitumor agent design. J Med Chem. 68 (13), 13408-13420 (2025).
  14. Shao, L., et al. Pharmacokinetics and UPLC–MS/MS analysis of delsoline in mouse whole blood. J Anal Methods Chem. 2018, 9412708(2018).
  15. Shi, H., et al. RefMetaPlant: A reference metabolome database for plants across five major phyla. Nucleic Acids Res. 52 (D1), D1614-D1628 (2024).
  16. Tan, R., et al. Diosbulbin B: An important component responsible for hepatotoxicity and protein covalent binding induced by Dioscorea bulbifera L. Phytomedicine. 102, 154174(2022).
  17. Li, W., et al. Metabolic activation of furan moiety makes diosbulbin B hepatotoxic. Arch Toxicol. 90 (4), 863-872 (2016).
  18. Wang, K., Li, W., Chen, J., Peng, Y., Zheng, J. Detection of cysteine- and lysine-based protein adductions by reactive metabolites of 2,5-dimethylfuran. Anal Chim Acta. 896, 93-101 (2015).
  19. Zhang, Z., et al. Sensitive bromine-based screening of potential toxic furanoids in Dioscorea bulbifera L. J Chromatogr B. 1057, 1-14 (2017).
  20. National Pharmacopoeia Committee. National standard for processing of traditional Chinese medicines. , People’s Medical Publishing House. , Beijing. (1988).
  21. Wang, K., et al. Chemical identity of interaction of protein with reactive metabolite of diosbulbin B. in vitro and in vivo. Toxins. 9 (8), 249(2017).
  22. Wang, K., et al. Selective and sensitive platform for function-based screening of potentially harmful furans. Anal Chem. 86 (21), 10755-10762 (2014).
  23. Sawada, Y., et al. Widely targeted metabolomics based on large-scale MS/MS data for elucidating metabolite accumulation patterns in plants. Plant Cell Physiol. 50 (1), 37-47 (2009).
  24. Zhang, Q., et al. Formation of furan from linoleic acid thermal oxidation: (E,E)-2,4-decadienal as a critical intermediate product. J Agric Food Chem. 72 (8), 4384-4392 (2024).
  25. Fan, X. Furan formation from fatty acids as a result of storage, gamma irradiation, UV-C and heat treatments. Food Chem. 175, 439-444 (2015).
  26. Zhang, S., et al. 8-Epidiosbulbin E acetate triggers apoptosis via metabolic activation-mediated crosstalk between mitochondria and endoplasmic reticulum. Ecotoxicol Environ Saf. 302, 118614(2025).
  27. Li, W., et al. A metabolic activation-based chemoproteomic platform to profile adducted proteins derived from furan-containing compounds. ACS Chem Biol. 17 (4), 873-882 (2022).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Przesiewowa ocena hepatotoksyczno ciUHPLC HRMSreaktywne metabolitymikrosomy w trobowemetabolizm P450pu apkowanie glutationemfuranoditerpenoidy
Film wkrótce dostępny

Powiązane artykuły