Przedstawiamy tutaj protokół do ustanowienia modelu mysiego zaburzeń rytmu dobowego oraz diety wysokotłuszczowej i wysokocukrowej (HFHS), która naśladuje niezdrowy tryb życia i wywołuje zaburzenia metaboliczne oraz fenotypy starzenia.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
* These authors contributed equally
Przedstawiamy tutaj protokół do ustanowienia modelu mysiego zaburzeń rytmu dobowego oraz diety wysokotłuszczowej i wysokocukrowej (HFHS), która naśladuje niezdrowy tryb życia i wywołuje zaburzenia metaboliczne oraz fenotypy starzenia.
Celem tego protokołu jest ustanowienie standaryzowanego modelu mysiego, który na nowo odtwarza wieloczynnikowe uszkodzenia wywołane przez współczesne, niezdrowe styl życia. W tym celu opracowałeśmy nowy model C57BL/6J łączący randomizowane zakłócenia rytmu dobowego z dietą wysokotłuszczową i wysokocukrowa (HFHS), z pojedynczymi grupami HFHS i zakłóceń rytmu dobowego jako kontrolami. W porównaniu z kontrolami, złożony model wykazał poważniejsze zaburzenia metaboliczne, w tym wzrost masy ciała, podwyższone poziomy glukozy na czczo i lipidów oraz wyraźną steatozę wątroby, a także oczywiste upośledzenia poznawcze i motoryczne. Złożony model wykazywał również bardziej znaczące przyspieszone starzenie się, co potwierdził wskaźnik niedoborów i barwienie hematoksyliną i eozyną (HE). Ten zintegrowany model niezawodnie naśladuje związane ze stylem życia zaburzenia metaboliczno-poznawcze i przedwczesne starzenie się. Ten krokowy, powtarzalny protokół wspiera badania mechanizmu starzenia się związanego z stylem życia i ocenę ukierunkowanych strategii terapeutycznych.
Przyspieszone współczesne tryby życia coraz częściej narażają populacje na zachowania zakłócające rytm i diety prowadzące do otyłości, przy czym przekonujące dowody łączą te czynniki z ogólnoustrojowym spadkiem funkcji i patogenezą przewlekłych chorób1. Dane epidemiologiczne ujawniają uderzające współistnienia chorób: pracownicy zmiany wykazują wysoką częstość występowania markerów zespołu metabolicznego, podczas gdy długotrwała dieta bogata w tłuszcze i cukry jest mocno związana ze zwiększonym ryzykiem demencją2,3. Te obrażenia łączą się, aby prowadzić do wieloorganowej patologii – zab....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wszystkie procedury eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Komitet Etyczny ds. Badań na Zwierzętach Instytutu Badań Farmaceutycznych Hebei Yiling (Numer zgody: N2024043). Trzydzieści dwa 8-miesięczne samce myszy C57BL/6J (patrz Tabela materiałów) były trzymane w specjalnym, wolnym od patogenów (SPF) centrum badań zwierzęcych, związanym z Centrum Oceny Nowych Leków, Instytutem Badań Farmaceutycznych Hebei Yiling. Środowisko wychowu było utrzymywane w znormalizowanych warunkach: temperatura otoczenia waha się od 20–26 °C, wilgotność względna była kontrolowana na poziomie 40%–70%, a wdrożony był 12-godzinny cykl światło/ciemność. Myszy miały swobodny....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Synergistyczne zaostrzenie patologii metabolicznej w kohortach poddanych podwójnej ekspozycji
Podłużne monitorowanie masy ciała ujawniło odmienne trajektorie wzrostu pomiędzy kohortami. Grupa modelowa oraz grupa HFHS wykazały przyspieszoną przyrost mas ciała w porównaniu zarówno z grupą kontrolną (Control), jak i grupą CR. Co istotne, grupa CR wykazała niewielkie przyspieszenie w stosunku do grupy Control (Rysunek 3A). Dalsze dowody na dysfunkcję metaboliczną dostarczył .......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Współczesne badania jednoznacznie potwierdziły, że zaburzenie rytmu dobowego i dieta wysokokaloryczna, bogata w tłuszcze i cukry, są dwoma niezależnymi czynnikami powodującymi ogólnoustrojowe obniżenie funkcji organizmu. Nasze dane pokazują, że patologiczne uszkodzenia wywołane łącznym działaniem tych dwóch czynników są znacznie poważniejsze niż prosty dodatkowy efekt każdego z nich osobno. W porównaniu z grupami interwencji jednoczynnikowych, grupa modelu złożonego nie wykazała istotnych różnic w dotyczących otyłości wz.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Praca ta była wspierana przez Program Nauki i Technologii Hebei (246W2501D, 252W7716D), Program S&T Hebei (24462501D) oraz Yanzhao Golden Platform (A20240022).
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| ANY-maze | Science | SA225 | |
| Accu-Chek Active Blood Glucose Monitor | Switzerland, Roche Diagnostics | accu check active | |
| C75BL/6J mice | BEIJING HFK BIOSCIENCE CO.,LTD | No.110324241101250228 | |
| Grip strength meter | USA, Columbus Instruments | 1027CSM-E54 | |
| High-fat and high-sucrose diet | China, Xietong Biotechnology Co., Ltd. | XT303 | |
| HistoCore MULTICUT - Semi-Automated Rotary Microtome | Germany, Leica | RM2245 | |
| Oil Red O solution | China, Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd. | G1260 | |
| Optimal cutting temperature compound | Japan, Sakura | 4583 | |
| Programmable Timer Socket | China, GONEO | GND-1 | |
| Tissue Tech Prisma Plus | Japan, Sakura | 20B2X00014000034 | |
| Tissue-Tek TEC 6 Embedding Module | Japan, Sakura | M01-021E-02 | |
| Total Cholesterol (TC) Assay Kit | China, Suzhou Grace Biotechnology Co., Ltd. | G0909W |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.