W tym filmie prezentujemy metodę elektroforetycznego rozdzielania białek z wykorzystaniem elektroforezy w żelu poliakrylamidowym (PAGE).
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Elektroforetyczne rozdział białek
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Elektroforeza jest wykorzystywana do rozdzielania złożonych mieszanin białek (np. z komórek, frakcji subkomórkowych, frakcji kolumnowych lub immunoprecypitatów), badania składu podjednostek oraz weryfikacji homogeniczności próbek białek. Może służyć również do oczyszczania białek do dalszych zastosowań. W elektroforezie w żelu poliakrylamidowym białka migrują pod wpływem pola elektrycznego przez pory w matrycy żelu poliakrylamidowego; wielkość porów zmniejsza się wraz ze wzrostem stężenia akryloamidu. Szybkość migracji białka jest określana przez kombinację wielkości porów oraz ładunku, rozmiaru i kształtu białka. W niniejszej jednostce opisano standardową metodę Laemmliego dla nieciągłej elektroforezy żelowej w warunkach denaturujących, tj. w obecności dodecylosiarczanu sodu (SDS).
Protokół
Pełny protokół tekstowy dla tej metody eksperymentalnej jest dostępny w Current Protocols in Molecular Biology.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie zgłaszają żadnych konfliktów interesów.
Przedruki i uprawnienia
