Collection-image

TOPICAL COLLECTIONS

Techniki i metody badań nad organoidami prostaty: hodowla trójwymiarowa (3D), wirowanie, metoda z wykorzystaniem perforowanego Parafilmu i metoda fuzji
Submit Abstract

Guest Editors

Sanghee Lee

Sanghee Lee

University of California San Diego

Dr Sanghee Lee uzyskała stopień doktora w Katedrze Urologii oraz w programie biologii komórkowej i molekularnej na University of Wisconsin-Madison w 2015 roku. Jej mentorem podczas pisania rozprawy był dr Wade Bushman; w swojej pracy opisała ona sieci powiązań neuronalnych między pęcherzem a prostatą, a także zmiany funkcjonalne w pęcherzu moczowym dorosłych myszy wywołane zapaleniem prostaty. Jako stażystka podoktorska dr Lee badała neurogenną dysfunkcję pęcherza w mysim modelu stwardnienia rozsianego w laboratorium dr Anny Malykhinyy na University of Colorado Anschutz Medical Campus. W 2017 roku dr Lee dołączyła do University of California San Diego (UCSD) jako pierwsza stażystka w dziedzinie neuro-urologii z jednoczesnym mianowaniem w Departamencie Urologii UCSD oraz w Rady Children’s Hospital San Diego. W skład jej komitetu doradczego ds. badań wchodzą dr Christina Jamieson (PI), dr George Chiang, dr Yahir Santiago-Lastra, dr Todd Coleman oraz dr Tony Yaksh. Jej obecne zainteresowania badawcze obejmują mechanizmy przerzutowania i bólu w raku prostaty z przerzutami do kości.  

Christina Jamieson

Christina Jamieson

University of California San Diego

Dr Jamieson jest naukowcem zajmującym się badaniami translacyjnymi w zakresie onkologii urologicznej w Departamencie Urologii na Uniwersytecie Kalifornijskim w San Diego (UCSD). Bada przyczyny przerzutów do kości i opracowała nowe modele pochodne od próbek pacjentów, aby testować nowe terapie i dawać nadzieję pacjentom z zaawansowanym, kastracyjno-opornym rakiem prostaty. Stopień doktora w zakresie immunologii molekularnej uzyskała na Uniwersytecie Brandeis pod kierunkiem dr. Ranjana Sena, wykazując, że sama stymulacja receptora limfocytów T (TCR) indukuje aktywację NF-kB oraz NF-AT. Dr Jamieson przeniosła się na Uniwersytet Kalifornijski w San Francisco (UCSF), aby odbyć staż podoktorski, najpierw u dr. Dana R. Littmana, a następnie u dr. Keitha R. Yamamoto. Odkryła mechanizmy krzyżowej komunikacji sygnałowej między TCR a glukokortykoidami, które regulują przeżywalność prekursorów limfocytów T, kształtując tym samym repertuar immunologiczny. Szlaki te mogą być również rozregulowane w nowotworach napędzanych przez hormony steroidowe.  Dr Jamieson rozpoczęła pracę jako profesor pomocniczy w Departamentach Urologii i Genetyki Ludzkiej na UCLA, badając mechanizmy oporności na terapię opartą na hormonach steroidowych w nowotworach, a następnie przeniosła się do UCSD, aby skupić się na tym, jak przełamać oporność na terapię w raku prostaty z przerzutami do kości, wykorzystując modele oparte na próbkach pacjentów i nowe metody leczenia.

Collection Overview

Organoidy są trójwymiarowymi (3D) strukturami komórkowymi ex vivo, o których przypuszcza się, że odtwarzają i utrzymują warunki in vivo w zakresie żywotności komórek oraz ich reakcji na leki terapeutyczne. Matrigel lub kolagen są wykorzystywane jako macierz zewnątrzkomórkowa, umożliwiająca komórkom pochodzącym od pacjentów tworzenie organoidów 3D, w tym struktur cystycznych oraz sferoidów. Organoidy hodowane w 3D są uważane za doskonałe modele do zrozumienia mechanizmów tumorigenzy oraz określania działania środków przeciwnowotworowych. W związku z tym opracowano metody dla szeregu nowotworów, m.in. mózgu, piersi, płuc i prostaty. Prostata jest jednak w pewnym stopniu wyjątkowa, ponieważ obecne metody hodowli organoidów wykazują niższy wskaźnik sukcesu niż w przypadku innych nowotworów. Trudności w ustanawianiu kultur organoidów prostaty mogą wynikać częściowo z heterogeniczności tumorigennej. Większość organoidów prostaty pochodzi z ksenoprzeszczepów od pacjentów (PDX) i jest reprezentatywna genomicznie dla raka prostaty u danego pacjenta. Dlatego modele organoidów PDX są nieocenione w badaniu kaskad sygnalizacyjnych cząsteczek docelowych oraz efektów leczenia środkami przeciwnowotworowymi. Kilka grup badawczych opracowało zmodyfikowane protokoły zoptymalizowane pod kątem ich celów eksperymentalnych. Celem niniejszego zbioru jest (1) przedstawienie kilku przykładów zoptymalizowanych warunków hodowli trójwymiarowych organoidów raka prostaty pochodzących od pacjentów, (2) wprowadzenie metod uzupełniających dla analizy pojedynczych komórek, takich jak RNA-FISH i cytometria przepływowa, (3) udostępnienie szczegółowych informacji na temat techniki immunohistochemii (IHC)/immunofluorescencji (IF) specyficznej dla organoidów oraz (4) przedstawienie kryteriów różnicujących w celu określenia wpływu leczenia lekiem na organoidy. 

Articles

Hodowle organoidów prostaty jako narzędzia do translacji genotypów i profili mutacji na odpowiedzi farmakologiczne
8:36

Hodowle organoidów prostaty jako narzędzia do translacji genotypów i profili mutacji na odpowiedzi farmakologiczne

0 Views

•

Cited by 21

•

2019

•