Oznaczanie liczby glonów za pomocą metodologii hodowlanej

1. Odważ 10 g próbki gleby, która została zebrana na mokro z pola lub dodano do niej wodę, tak aby pozostała wilgotna przez 2-3 dni. Należy pamiętać, że gleba powinna być wilgotna, ale nie nasycona.
2. Przygotuj 10-krotną serię rozcieńczeń, dodając 10 g gleby do 95 ml zmodyfikowanego roztworu Bristolu (Rysunek 1). Aby utworzyć zmodyfikowany roztwór Bristolu, rozpuść następujące składniki w 1,000 ml wody: 0,25 g NaNO₃, 0,025 g CaCl₂, 0,075 g MgSO^-₄ · 7H₂O, 0,075 g K₂HPO₄, 0,018 g KH₂PO₄, 0,025 g NaCl i 0,5 mg FeCl_3.
3. Kontynuować serię rozcieńczeń, dodając 1 ml zawiesiny A do 9 ml roztworu Bristolu i dodatkowe sekwencyjne rozcieńczenia.
4. Zaszczepić 5 probówek z replikami, z których każda zawiera 9 ml zmodyfikowanego roztworu Bristolu, po 1 ml każdego z rozcieńczeń 10^-2 do 10^-6 (Tabela 1).
5. Inkubuj zaślepione probówki przez okres do 4 tygodni w miejscu wystawionym na działanie promieni słonecznych.
6. Obserwuj probówki pod kątem wzrostu glonów raz na 7 dni. Rurki z naroślami glonów wydają się zielone.

Rysunek 1. Jak wykonać 10-krotną serię rozcieńczeń.

Rura	Rozcieńczenie
B	10-2
C	10-3
D	10-4
E	10-5
F	10-6

Tabela 1. Rurki i rozcieńczenia.