Podawanie związków III

1. Administracja śródskórna

1. Większość wstrzyknięć śródskórnych to związki na bazie wody. Roztwory muszą być fizjologicznie buforowane tak, aby miały neutralne pH, aby uniknąć martwicy tkanek w miejscu wstrzyknięcia.
2. Zakres rozmiarów igieł to 25-30 gauge, najmniejszy z możliwych.
3. Zakres dawek na miejsce wstrzyknięcia wynosi 50-100 μl. Wstrzykiwanie nadmiernych objętości może spowodować martwicę w miejscu wstrzyknięcia lub wyciek związku z miejsca wstrzyknięcia z powodu ciśnienia.
4. Aby dokładnie umieścić igłę w przestrzeni śródskórnej, konieczne jest znieczulenie zarówno myszy, jak i szczurów. Znieczulenie wziewne pozwala na szybką indukcję i powrót do zdrowia; Jednak znieczulenie iniekcyjne ma tę zaletę, że zapewnia wystarczająco dużo czasu na przygotowanie obszaru i wykonanie wstrzyknięcia. ¹
5. Usuń włosy w miejscu wstrzyknięcia za pomocą kremu do depilacji lub goląc obszar.
6. Dokładnie usuń wszelkie resztki kremu do depilacji lub resztki włosów.
7. Zastosuj miejscowy środek antyseptyczny, taki jak roztwór jodu, roztwór chlorheksydyny lub alkohol.
8. Procedury administracyjne
   1. Rozciągnij napiętą skórę między kciukiem a palcem wskazującym. Zapewnia to stabilność skóry podczas ustawiania igły.
   2. Umieść igłę pod skosem do góry na skórze.
   3. Delikatnie wbić igłę w skórę między naskórkiem a skórą właściwą. Przesuń igłę tuż poza skos.
   4. Substancję należy wstrzykiwać powoli. Wstrzyknięcie związku spowoduje powstanie pęcherzyka lub małego pęcherza na skórze.
   5. Po wstrzyknięciu należy zrobić przerwę, aby skóra mogła się rozciągnąć i dostosować przed wyjęciem igły.
9. Środki ostrożności
   1. Odciąganie tłoka nie jest konieczne.
   2. Jeśli igła zostanie wprowadzona do przestrzeni podskórnej, nie tworzy się pęcherzyk. Zbyt głębokie wstrzyknięcie powoduje wstrzyknięcie podskórne.
   3. Należy unikać osuszania lub wycierania tego obszaru, ponieważ może to spowodować wyciek związku z miejsca wstrzyknięcia.
   4. Podczas wykonywania wielokrotnych wstrzyknięć należy je rozmieścić tak, aby pęcherzyki nie zachodziły na siebie.

Rysunek 1. Wstrzyknięcie śródskórne u myszy.

2. Podanie donosowe

1. Sprzęt
   1. Używaj pipety do mikropipetowania, którą można skalibrować, aby uzyskać dokładną objętość.
   2. Aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego, należy używać jednorazowych końcówek do pipet. Do dawkowania można również używać strzykawek gruźlicy, tępych igieł i elastycznych rurek.
   3. Całkowita objętość wstrzyknięć dla szczurów nie powinna przekraczać 40-100 μl i powinna być podawana w kroplach po 6-10 μl. W przypadku myszy maksymalna całkowita objętość wynosi 24 μL, podawana w kroplach 3-4 μL.
2. Podawanie u zwierząt przytomnych
   1. Ręczne unieruchomienie u przytomnych zwierząt wymaga, aby głowa była względnie nieruchoma, tak aby końcówka pipety lub tępa igła mogły być umieszczone wystarczająco blisko nozdrzy, aby dostarczyć związek, ale nie tak blisko, aby szturchnąć lub zranić tkankę nosa.
   2. Unieruchomić zwierzę i trzymać je w pozycji pionowej.
   3. Umieść małą kroplę płynnego związku w otworze nosowym. Zwierzę powinno wdychać kropelkę.
   4. Podawać dodatkową objętość, naprzemiennie naprzemiennie, aż zostanie podana cała objętość.
   5. Podczas podawania większych objętości ważne jest, aby nie uciskać klatki piersiowej podczas krępowania. Ucisk klatki piersiowej utrudnia zwierzęciu wykonywanie wystarczająco głębokich oddechów, aby wciągnąć płyn do oskrzeli i płuc.

Rysunek 2. Podanie donosowe u przytomnych myszy.

3. Podawanie zwierzętom nieprzytomnym
   1. Stosowanie wziewnych środków znieczulających pozwala na unieruchomienie zwierzęcia podczas zbliżania się i podawania związku. Eliminuje to możliwość ugryzienia przez zwierzę sprzętu dozującego, utraty związku z powodu szarpania głowy oraz uszkodzenia tkanki nosowej, oczu lub skóry twarzy zwierzęcia. Zwierzę jest również mniej skłonne do wciągania i rozpylania związku z nozdrzy po podaniu.
   2. Ułóż zwierzę w pozycji leżącej. Pozycja głowy wpływa na umieszczenie roztworu w nozdrzach. Wykazano, że idealną pozycją do porodu w OUN jest zwierzę leżące na wznak; Pozwala to na lepsze wchłanianie. ²
   3. Podawać połowę związku bezpośrednio po jednej stronie otworu nosowego, zsynchronizując to z inhalacją. Następnie odwróć zwierzę na drugą stronę.
   4. Jak wyżej, drugą połowę objętości podać do drugiego otworu nosowego.

Rysunek 3. Podanie donosowe u nieprzytomnych myszy.

3. Podawanie wewnątrzczaszkowe u nowonarodzonych myszy i szczurów

1. Myszy lub szczury muszą być znieczulone do wstrzyknięć wewnątrzczaszkowych.

Mysz		Szczur
Wiek (dni)	Rozstaw igieł (g)	Wiek (dni)	Rozstaw igieł (g)
0-7	29-30	0-5	27-29
7-14	27	5-10	25-27
14-28	25	10-14	25
Wiek (dni)	Długość igły (mm)	Wiek (dni)	Długość igły (mm)
0-7	2	0-4	2-3
7-14	3	4-7	3
14-21	4	7-10	4
21-28	5	10-14	5
Wiek (dni)	Objętość (μL)	Wiek (dni)	Objętość (μL)
0-5	<20	1-3	<20
6-20	<60	4-10	<60
20-28	<100	11-14	<100

Tabela 1. Rozstaw igieł, długość igły i maksymalna objętość podawania wewnątrzczaszkowego w zależności od wieku myszy i szczurów. ⁴

2. Sprzęt
   1. Określić prawidłową grubość igły i maksymalną objętość podawania zgodnie z Tabela 1.
   2. Przygotuj osłonę igły przed znieczuleniem zwierzęcia.
      UWAGA: Głębokość wstrzykiwania igły jest kontrolowana za pomocą osłony, która jest tworzona wraz z nasadką igły.
      1. Aby utworzyć osłonę, igła jest mierzona względem nasadki igły, a na nasadce umieszcza się znak wskazujący, gdzie należy ciąć. Nacięcie należy wykonać w taki sposób, aby 2 do 5 mm igły było odsłonięte podczas zakładania nasadki na igłę.
      2. Długość odsłoniętej igły musi być wystarczająco długa, aby przeniknąć przez skórę i czaszkę oraz osiągnąć pożądaną głębokość w mózgu.
      3. Długości igieł potrzebne dla myszy i szczurów są wymienione w Tabela 1.
   3. Wymagane jest źródło ciepła, aby zapobiec hipotermii u szczeniąt. Istnieje kilka rodzajów: elektryczna poduszka grzewcza ustawiona na niskim poziomie, krążący koc wodny lub woreczek wielokrotnego użytku na ciepło do reakcji chemicznej.
3. Powściągliwość
   1. Szczenięta myszy i szczurów w wieku 10 dni lub młodsze nie wymagają znieczulenia do tej procedury. Unieruchamiaj je ręcznie, trzymając je tuż za głową i doogonowo ciągnąc skórę, aby lekko wywrzeć nacisk na ramiona.
   2. Znieczulenie szczeniąt powyżej 10 dnia życia za pomocą inhalacji izofluranu. Przymocuj komorę indukcyjną do waporyzatora precyzyjnego lub słoika z wacikiem nasączonym izofluranem. Gdy szczenię jest unieruchomione, znieczulenie jest skuteczne przez około 40 sekund, co zapewnia wystarczająco dużo czasu na wstrzyknięcie.
4. Technika iniekcji
   1. Pobrać substancję do strzykawki i nałożyć nasadkę/prowadnik igły na igłę.
   2. Objętość wstrzyknięcia zalecana jako maksymalna objętość na nowonarodzoną mysz lub szczura wynosi 100 μl, a dla myszy odsadzonych od piersi lub starszych wynosi do 300 μl.
   3. Aby wstrzyknąć do kory mózgowej noworodków, należy wprowadzić igłę 5 mm za okiem, około 3 mm od linii środkowej czaszki.
   4. Miejsce wstrzyknięcia u myszy odsadzonej od piersi znajduje się mniej więcej w połowie drogi między okiem a uchem i tuż przy linii środkowej.

Rysunek 4. Podanie wewnątrzczaszkowe u szczeniaka myszy.