RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
pl_PL
Menu
Menu
Menu
Menu
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Źródło: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Uniwersytet Notre Dame, IN
Przewodnik dotyczący opieki nad zwierzętami laboratoryjnymi i ich wykorzystywania ("Przewodnik") stwierdza, że ocena i łagodzenie bólu są integralnymi elementami opieki weterynaryjnej nad zwierzętami laboratoryjnymi. 1 Definicja znieczulenia to utrata czucia lub czucia. Jest to dynamiczne zdarzenie polegające na zmianach głębokości znieczulenia w odniesieniu do metabolizmu zwierzęcia, stymulacji chirurgicznej lub zmian w środowisku zewnętrznym.
Właściwy dobór środków znieczulających do zabiegów chirurgicznych i innych potencjalnie bolesnych zabiegów musi zostać ustalony przez lekarza weterynarii. Opiera się to na wielu aspektach, w tym na zakresie i czasie trwania zabiegu, gatunku i odmianie, wieku i stanie fizjologicznym zwierzęcia.
Środki znieczulające są dostępne w postaci środków wziewnych lub do wstrzykiwań. Znieczulenie chirurgiczne można wykonać za pomocą kombinacji środków znieczulających do wstrzykiwań i wziewnych. 2
1. Indukcja znieczulenia wziewnego
Znieczulenie wziewne obejmuje izofluran, sewofluran i desfluran, przy czym najczęściej stosuje się izofluran. Te środki znieczulające są stosowane częściej, ponieważ dzięki nim łatwiej jest kontrolować głębokość znieczulenia. Indukcja znieczulenia za pomocą znieczulenia wziewnego może być zrealizowana za pomocą słoika dzwonowego lub komory indukcyjnej, która jest zamontowana w waporyzatorze precyzyjnym.
2. Indukcja znieczulenia za pomocą środków znieczulających do wstrzykiwań
Środki znieczulające do wstrzykiwań to przede wszystkim mieszanina ketaminy i środków uspokajających lub zwiotczających mięśnie.
Typowe kombinacje to: 1) Koktajl dla gryzoni, który składa się z ketaminy (100 mg / ml), ksylazyny (20 mg / ml), acepromazyny (10 mg / ml) i sterylnej soli fizjologicznej (0,9% NaCl); 2) ketamina/ksylazyna w stosunku 2:1, która składa się z ketaminy (100 mg/ml), ksylazyny (20 mg/ml) i jałowej soli fizjologicznej (0,9% NaCl); oraz 3) ketamina/ksylazyna Mouse Mix, która składa się z ketaminy (100 mg / ml), ksylazyny (20 mg / ml) i sterylnej soli fizjologicznej (0,9% NaCl). Podczas stosowania kombinacji ketaminy / ksylazyny, zwiększanie powinno odbywać się tylko za pomocą ketaminy, a nie ksylazyny, ze względu na okres półtrwania tych leków.
Połączenie ketaminy ze środkami uspokajającymi i/lub zwiotczającymi mięśnie musi być przygotowane jako roztwór podstawowy, z którego można pobrać indywidualne dawki. Środki muszą być dokładnie odmierzone i rozcieńczone sterylnym roztworem soli fizjologicznej, aby zapewnić podanie zwierzętom odpowiednich dawek. Ponieważ ketamina jest substancją kontrolowaną, ilość użyta z butelek musi być odnotowana w "Dzienniku Kontrolowanych Leków", a mieszaniny muszą mieć indywidualne "Dzienniki Substancji Kontrolowanych". Przygotowując mieszaniny, dodawaj ketaminę powoli do butelki, ponieważ ma ona tendencję do pienienia się pod wpływem wstrzyknięcia z siłą. Do mieszaniny używa się sterylnej butelki o pojemności 20 ml z korkiem. Butelki muszą być odpowiednio oznakowane nazwą związków, datą zmieszania, datą ważności, numerem partii ketaminy (ponieważ jest to substancja kontrolowana) oraz sugerowaną dawką. Data ważności może być określona na podstawie daty wygaśnięcia składnika najwcześniej (w zależności od zasad/wytycznych zakładu/stanu). W celu dokładnego prowadzenia ewidencji ketaminy należy zważyć zarówno pustą, jak i napełnioną butelkę. Następnie masy muszą być zapisane na etykiecie mieszaniny oraz na indywidualnym arkuszu dziennika substancji kontrolowanej, który jest przygotowywany dla każdej butelki. Przechowuj mieszanki ketaminy w ciemnym miejscu o kontrolowanej temperaturze, aby utrzymać moc.
3. Ocena znieczulenia
Głębokość znieczulenia można ocenić, badając reakcję na różne bodźce. Dobrowolny ruch będzie wynikał z fizycznych bodźców ciała. Tabela 1 zawiera listę metod fizycznych stosowanych do oceny głębokości znieczulenia.
| Metoda | Procedura | Odpowiedź |
| Szczypta palca | Wyprostuj nogę i odizoluj taśmę między palcami. Obszar ten jest mocno ściśnięty za pomocą paznokci lub atraumatycznych kleszczy. | Pozytywny odruch jest wskazywany przez cofnięcie nogi lub wycofanie stopy. Zwierzę nie znajduje się na chirurgicznej płaszczyźnie znieczulenia, jeśli występuje ruch nóg lub ciała, wokalizacja lub wyraźne przyspieszenie oddychania. |
| Szczypta ogona | Końcówka ogona jest ściskana palcami lub atraumatycznymi kleszczami. | Pozytywna reakcja jest sygnalizowana drganiami lub ruchem ogona. Zwierzę nie znajduje się na chirurgicznej płaszczyźnie znieczulenia, jeśli występuje ruch ogona, wokalizacja lub wyraźne zwiększenie oddechów. |
| Szczypta w ucho | Za pomocą palców lub atraumatycznych kleszczy uszczypnij czubek małżowiny usznej. | Pozytywną reakcją jest potrząsanie głową lub ruch wąsów do przodu. Jeśli występuje ruch głowy, wąsy, wokalizacja lub wyraźne zwiększenie oddechów, zwierzę nie znajduje się na chirurgicznej płaszczyźnie znieczulenia. |
| Odruch powiekowy | Opuszkiem palca dotknij przyśrodkowej kanty (wewnętrznego kącika) oka. | Pozytywny odruch jest sygnalizowany mrugnięciem w odpowiedzi na dotknięcie powiek. Jeśli występuje ruch powiek, wąsów lub wyraźne przyspieszenie oddychania, zwierzę nie znajduje się na chirurgicznej płaszczyźnie znieczulenia. |
| Odruch rogówkowy | Za pomocą aplikatora z bawełnianą końcówką delikatnie dotknij rogówki (gałki ocznej). | Pozytywna odpowiedź jest sygnalizowana mrugnięciem. Jeśli występuje ruch powiek, wąsów lub wyraźne zwiększenie oddechów, zwierzę nie znajduje się na wystarczająco głębokiej płaszczyźnie znieczulenia chirurgicznego. |
Tabela 1. Metody bodźców fizycznych do oceny głębokości znieczulenia. 2
Należy również stosować wskaźniki fizjologiczne, takie jak tętno, częstość oddechów, ciśnienie krwi, kolor błony śluzowej i czas napełniania naczyń włosowatych. Podczas gdy ogólne obserwacje mogą być przydatne do wykrywania zmian w częstości oddechów zwierząt, wykorzystania tętna lub ciśnienia krwi do oceny głębokości, wymagany jest specjalistyczny sprzęt. Jeśli dostępny jest elektrokardiograf, można zmierzyć częstość i siłę bicia serca. Do pomiaru ciśnienia krwi istnieje wiele urządzeń, które są montowane na ogonie lub nawet na całym ciele. Bodźce fizyczne opisane w tabeli 1 spowodują wzrost wszystkich trzech tych parametrów.
Obserwuje się zmiany w kolorze błon śluzowych, oczu, uszu, ust, nosa, odbytu i - w mniejszym stopniu - łap i ogona. Obszary powinny być różowe, co wskazuje na prawidłowe oddychanie i czynność serca. Kiedy zwierzę przechodzi do znieczulenia w stadium IV, oddychanie ustaje, co powoduje sinicę - oznaczoną niebieskim lub szarym kolorem - na błony śluzowe i otaczającą skórę.
Czas napełniania kapilar definiuje się jako czas potrzebny do powrotu koloru do zewnętrznego złoża kapilarnego po jego zblanszowaniu przez przyłożenie nacisku na obszar. Aplikator w sztyfcie lub palec jest dociskany do dziąseł, małżowiny usznej lub łożyska paznokci znieczulonych zwierząt. Liczba sekund potrzebna do powrotu blanszowanego obszaru do różowego koloru nie powinna przekraczać 1-2 sekund. Wydłużony czas napełniania sugeruje zmniejszenie częstości akcji serca lub siły skurczów serca, co wskazuje, że zwierzę może być zbyt głęboko znieczulone i bliskie śmierci.
Ważne jest, aby wykorzystać kilka różnych parametrów do oceny głębokości znieczulenia. Używanie tego samego palca u nogi lub ucha do wielokrotnego szczypania spowoduje znieczulenie obszaru, a reakcja zostanie stłumiona i nie da dokładnej oceny głębokości znieczulenia. Użyj alternatywnych miejsc do oceny szczypania palców u nóg i uszu. Głębokość znieczulenia powinna być ponownie oceniana co 10-30 minut przez cały czas trwania zabiegu. 2
Badania wykazały, że u znieczulonego zwierzęcia występują zmiany krążeniowo-oddechowe. Podczas znieczulania lekami do wstrzykiwań zwierzęta doświadczają stabilnej częstości oddechów; Wykazują jednak zmienność pojemności minutowej serca. Doniesiono, że reakcja na środki znieczulające do wstrzykiwań różni się znacznie między różnymi szczepami, dlatego trudno jest ustandaryzować dawkę. 7 Środki wziewne mają tendencję do zmniejszania częstości oddechów, ale mają mniejszy wpływ na układ sercowo-naczyniowy. Ponieważ dawkę znieczulenia wziewnego można łatwo dostosować przez cały czas trwania zabiegu, często jest to preferowana metoda.
Indukcja i podtrzymanie znieczulenia stanowi integralny element opieki weterynaryjnej nad zwierzętami laboratoryjnymi poddawanymi wszelkim zabiegom chirurgicznym. Celem znieczulenia jest odpowiednie unieruchomienie zwierzęcia i złagodzenie wszelkich odczuć bólowych. Oprócz indukcji wymagane jest precyzyjne i stałe monitorowanie, aby bezpiecznie utrzymać prawidłową głębokość znieczulenia przez cały czas trwania zabiegu.
W tym filmie najpierw pokrótce omówimy poziomy znieczulenia gryzoni i do jakiego etapu należy dążyć. Następnie przyjrzymy się różnym metodom indukcji i utrzymania, różnym sposobom zapewnienia, że zwierzę jest zawsze w pożądanym stadium znieczulenia, a na koniec zajmiemy się kilkoma eksperymentami w świecie rzeczywistym, obejmującymi stosowanie różnych środków znieczulających do różnych celów.
Zacznijmy od omówienia poziomów. Istnieją cztery etapy znieczulenia i cztery płaszczyzny w ramach etapu trzeciego lub etapu chirurgicznego.
Podczas pierwszego etapu zwierzę staje się zdezorientowane. Etap drugi charakteryzuje się nieregularnym częstością oddechów i utratą odruchu prostowania. Na płaszczyźnie pierwszej etapu trzeciego odruchy powiekowe i połykania są nieobecne. Podczas drugiego lotu zatracają się odruchy krtaniowe i rogówkowe. Do tego momentu znieczulenie nie wywołało amnezji ani analgezji.
To właśnie na trzecim planie amnezja i analgezja postępują od częściowej do całkowitej, a zwierzę jest w pełni znieczulone do zabiegu chirurgicznego. Płaszczyzna trzecia jest również oznaczana przez paraliż mięśni międzyżebrowych, co skutkuje oddychaniem przeponowym, czyli płytkim oddechem. Na płaszczyźnie czwartej zwierzę zostało przedawkowane i może szybko przejść do etapu czwartego, w którym dochodzi do całkowitego paraliżu zarówno mięśni międzyżebrowych, jak i przepony, co może spowodować zatrzymanie oddechu i ostatecznie doprowadzić do śmierci.
Środki znieczulające są dostępne w postaci inhalacji lub do wstrzykiwań, a weterynarz musi zdecydować, czego użyć do wykonania zabiegu. Wybór ten opiera się na wielu aspektach, w tym: zakresie i czasie trwania zabiegu, gatunku i odmianie, wieku i stanie fizjologicznym zwierzęcia.
Klasa powszechnie stosowanych wziewnych środków znieczulających obejmuje związki takie jak izofluran, sewofluran i desfluran. Związki te pozwalają na łatwą kontrolę głębokości znieczulenia. Istnieje kilka opcji w sprzęcie, z których można wybierać do podawania wziewnych środków znieczulających.
Jednym z wyborów jest słoik dzwonowy, który powinien być używany pod maską - a nie na stole - aby uniknąć narażenia personelu na gazy znieczulające. Zmontuj słoik za pomocą ceramicznej lub plastikowej perforowanej platformy, tworząc przestrzeń między dnem słoika a platformą. Następnie, nosząc nieprzepuszczalne rękawiczki, nasącz wacik środkiem znieczulającym i umieść go pod platformą tak, aby spoczywał na dnie słoika. Następnie natychmiast zabezpiecz pokrywę, aby zapobiec wydostawaniu się oparów znieczulających. Aby umieścić zwierzę, przesuń pokrywę na bok, wprowadź zwierzę i natychmiast je zabezpiecz. Następnie obserwuj aktywność i oddechy, aby określić głębokość znieczulenia, a następnie wystaw zwierzę na działanie środka wziewnego , aby uzyskać efekt. Należy pamiętać, że platforma służy jako bariera i zapobiega bezpośredniemu kontaktowi zwierzęcia z płynnym środkiem znieczulającym.
Alternatywą dla dzbanka jest komora indukcyjna używana w połączeniu z precyzyjnym waporyzatorem podłączonym do butli z tlenem. Pierwszym krokiem jest upewnienie się, że waporyzator jest napełniony odpowiednią ilością płynnego środka znieczulającego. Następnie sprawdź system oczyszczania gazów odlotowych. Jeśli jest to powszechnie stosowany system pasywny, zważyć kanister, aby określić, czy jest on nadal skuteczny. Ogólnie rzecz biorąc, wzrost o pięćdziesiąt gramów powyżej masy początkowej jest punktem, w którym kanister jest zużywany. Kolejnym krokiem jest montaż komory indukcyjnej. Upewnij się, że wejście pochodzi z parownika, a wyjście jest do systemu oczyszczania gazów odlotowych.
Aby rozpocząć, umieść zwierzę w komorze indukcyjnej i zabezpiecz pokrywę. Gdy zwierzę znajdzie się w komorze, najpierw uruchom przepływ tlenu z szybkością 1 litra na minutę, a następnie dostosuj ustawienie parownika precyzyjnego do poziomu indukcji 3-4 % dla izofluranu. Podobnie jak w przypadku słoika, wystaw zwierzę na działanie środka znieczulającego do efektu. Gdy zwierzę jest w pełni znieczulone, przepłucz komorę tlenem, wyłączając izofluran przed delikatnym usunięciem zwierzęcia. Ma to na celu zapobieżenie narażeniu personelu na gazy anestezjologiczne.
Inną metodą indukcji znieczulenia jest stożek na nos lub maskę na twarz, również podłączona do waporyzatora precyzyjnego. Ponieważ jednak gazy anestezjologiczne mają nieprzyjemny zapach, zwierzęta mogą sprzeciwiać się maskowaniu w celu indukcji. Ponadto istnieje również ryzyko spowodowania uduszenia z powodu zbyt mocnego chwytania. Dlatego preferowaną metodą jest użycie pudełka indukcyjnego lub słoika dzwonowego w celu wywołania znieczulenia, a następnie konserwacji za pomocą stożka nosowego. Najczęściej montaż jest taki, że stożek i komora indukcyjna są połączone z tym samym waporyzatorem z przełącznikiem pomiędzy nimi, aby przełączyć dostarczanie pary znieczulającej z komory indukcyjnej na stożek nosowy i odwrotnie. Po znieczuleniu zwierzęcia w komorze zabezpiecz jego twarz w stożku i przełącz przełącznik na rurce, aby przekierować przepływ gazu do stożka nosowego. Monitorować oddech i po upewnieniu się, że zwierzę jest zrelaksowane, zmniejszyć środek znieczulający do poziomu utrzymania 0,5 - 1,5%. Nałóż również maść okulistyczną na oczy, aby zapobiec wysuszeniu rogówki.
W przypadku środków znieczulających do wstrzykiwań, mieszanina ketaminy i innych środków uspokajających lub zwiotczających mięśnie, w tym ksylazyny i/lub acepromazyny. Z użyciem tych związków można przygotować różne kombinacje. Zobacz poniższy tekst, aby zapoznać się z najczęściej używanymi współczynnikami. Należy pamiętać, że ketamina jest substancją kontrolowaną i dlatego użyta ilość musi być odnotowana w rejestrze kontrolowanych leków, a mieszaniny muszą mieć swoje indywidualne dzienniki substancji kontrolowanych. W zależności od gatunku, wieku i stanu zdrowia zwierzęcia dobiera się mieszaninę i dawkę środka znieczulającego, a roztwór można wstrzykiwać dootrzewnowo lub domięśniowo. Zwykle znieczulenie iniekcyjne i wziewne stosuje się w połączeniu w celu uzyskania znieczulenia chirurgicznego.
Teraz, gdy wiesz, jak wywołać znieczulenie, dowiedzmy się o ocenie głębokości znieczulenia, którą należy monitorować co 10-30 minut, aby upewnić się, że zwierzę nie zostanie uszkodzone podczas zabiegu. Istnieje kilka metod, aby to zrobić u gryzoni.
Powszechnie stosowaną metodą jest uszczypnięcie palca u nogi. Wyprostuj nogę zwierzęcia i odizoluj taśmę między palcami. Następnie mocno ściśnij obszar za pomocą paznokci lub atraumatycznych kleszczy. Pozytywny odruch jest wskazywany przez cofnięcie nogi lub wycofanie stopy. Inną metodą jest szczypanie ogona wykonywane na końcu ogona. Pozytywną reakcję demonstruje drganie lub ruch ogona. Możesz także uszczypnąć czubek małżowiny usznej, a jeśli występuje drżenie głowy lub ruch wąsów do przodu, zwierzę nie znajduje się w chirurgicznej płaszczyźnie znieczulenia.
Aby sprawdzić głębokość znieczulenia, można również dotknąć kantu przyśrodkowego lub wewnętrznego kącika oka, aby wywołać odruch powiekowy - sygnalizowany mrugnięciem w odpowiedzi na dotknięcie powiek. Nawet jeśli występuje ruch powiek, wąsów lub wyraźne zwiększenie oddechu, zwierzę nie znajduje się w chirurgicznej płaszczyźnie znieczulenia.
Na koniec można sprawdzić odruch rogówkowy, dotykając rogówki palcem w rękawiczce lub aplikatorem z bawełnianą końcówką. Pozytywna odpowiedź jest sygnalizowana mrugnięciem.
Ważne jest, aby zmieniać się między miejscami, aby ocenić głębokość znieczulenia. Używanie tego samego palca u nogi lub ucha do wielokrotnego szczypania spowoduje znieczulenie obszaru, a reakcja zostanie stłumiona i nie da dokładnej oceny głębokości znieczulenia.
Oprócz tych metod oceny bodźców fizycznych należy również monitorować wskaźniki fizjologiczne, w tym tętno, częstość oddechów, ciśnienie krwi, kolor błony śluzowej i czas napełniania naczyń włosowatych. Podczas gdy ogólne obserwacje mogą być przydatne do wykrywania zmian w częstości oddechów, aby wykorzystać tętno do oceny głębokości, można użyć specjalistycznego sprzętu, takiego jak elektrokardiograf. Do pomiaru ciśnienia krwi istnieje wiele urządzeń, które można zamontować na ogonie, a nawet na całym ciele. Kolor błon śluzowych, oczu, uszu, ust, nosa, odbytu, łap i ogona może również wskazywać na głębokość znieczulenia. Obszary te powinny być różowe, co sugeruje odpowiednie oddychanie i tętno.
Aby sprawdzić czas napełniania kapilary, naciśnij małżowinę uszną znieczulonych zwierząt i policz liczbę sekund potrzebnych, aby zblanszowany obszar powrócił do różowego koloru. Nie powinno to trwać dłużej niż 1 do 2 sekund. Wydłużony czas napełniania sugeruje zmniejszenie częstości akcji serca lub siły skurczu serca, co wskazuje, że zwierzę może być zbyt głęboko znieczulone i bliskie śmierci. Po wyjęciu zwierzęcia ze znieczulenia nie powinno ono być zwracane do obiektu trzymania do czasu wyzdrowienia ze znieczulenia, chyba że jest stale monitorowane w obszarze pomieszczenia.
Teraz, gdy poznaliśmy zasady i procedury indukcji i konserwacji znieczulenia gryzoni, przyjrzyjmy się niektórym z częstych zastosowań środków znieczulających w dzisiejszych badaniach biomedycznych.
Prawdopodobnie najczęstszym zastosowaniem znieczulenia gryzoni jest przed i w trakcie operacji. Na przykład w tym przypadku naukowcy chcieli opracować model udaru mózgu spowodowanego tworzeniem się skrzepów. Aby to osiągnąć, wywołali znieczulenie u myszy, a następnie przewiercili czaszkę, aby stworzyć cienkie okienko. I kiedy zwierzę było jeszcze pod wpływem środków uspokajających, naukowcy wstrzyknęli światłoczuły barwnik do krążenia. Następnie wywołali fotoaktywację za pomocą lasera przez przewierconą czaszkę, aby spowodować powstanie skrzepu w unaczynieniu czaszki.
Innym przypadkiem, w którym wymagane jest znieczulenie gryzoni, jest przeprowadzenie analizy fizjologicznej. Na przykład naukowcy często używają elektrod EKG u znieczulonych zwierząt do monitorowania aktywności serca. Lub używają sond ultradźwiękowych do określenia szybkości ruchu przepony, aby dokładniej określić ilościowo częstość oddechów.
Wreszcie, użycie znieczulenia jest obowiązkowe podczas przeprowadzania eksperymentów z przeżyciem in utero . Na przykład elektroporacja w macicy -- metoda, w której ciężarna kobieta jest znieczulana, wykonuje się nacięcie w celu odsłonięcia rozwijających się zarodków, a elektrody są używane do wywołania embrionalnego wychwytu komórkowego wstrzykniętego materiału genetycznego.
Właśnie obejrzałeś film JoVE na temat podawania i podtrzymywania znieczulenia. Ponieważ znieczulenie gryzoni ułatwia wykonywanie tak szerokiego zakresu eksperymentów biologicznych, konieczne jest, aby każdy naukowiec posiadał umiejętność wywoływania i utrzymywania prawidłowej głębokości znieczulenia przez cały czas trwania eksperymentu. Jak zawsze, dziękujemy za oglądanie!
Indukcja i podtrzymanie znieczulenia stanowi integralny element opieki weterynaryjnej nad zwierzętami laboratoryjnymi poddawanymi wszelkim zabiegom chirurgicznym. Celem znieczulenia jest odpowiednie unieruchomienie zwierzęcia i złagodzenie wszelkich odczuć bólowych. Oprócz indukcji wymagane jest precyzyjne i stałe monitorowanie, aby bezpiecznie utrzymać prawidłową głębokość znieczulenia przez cały czas trwania zabiegu.
W tym filmie najpierw pokrótce omówimy poziomy znieczulenia gryzoni i do jakiego etapu należy dążyć. Następnie przyjrzymy się różnym metodom indukcji i utrzymania, różnym sposobom zapewnienia, że zwierzę jest zawsze w pożądanym stadium znieczulenia, a na koniec zajmiemy się kilkoma eksperymentami w świecie rzeczywistym, obejmującymi stosowanie różnych środków znieczulających do różnych celów.
Zacznijmy od omówienia poziomów. Istnieją cztery etapy znieczulenia i cztery płaszczyzny w ramach etapu trzeciego lub etapu chirurgicznego.
Podczas pierwszego etapu zwierzę staje się zdezorientowane. Etap drugi charakteryzuje się nieregularnym częstością oddechów i utratą odruchu prostowania. Na płaszczyźnie pierwszej etapu trzeciego odruchy powiekowe i połykania są nieobecne. Podczas drugiego lotu zatracają się odruchy krtaniowe i rogówkowe. Do tego momentu znieczulenie nie wywołało amnezji ani analgezji.
To właśnie na trzecim planie amnezja i analgezja postępują od częściowej do całkowitej, a zwierzę jest w pełni znieczulone do zabiegu chirurgicznego. Płaszczyzna trzecia jest również oznaczana przez paraliż mięśni międzyżebrowych, co skutkuje oddychaniem przeponowym, czyli płytkim oddechem. Na płaszczyźnie czwartej zwierzę zostało przedawkowane i może szybko przejść do etapu czwartego, w którym dochodzi do całkowitego paraliżu zarówno mięśni międzyżebrowych, jak i przepony, co może spowodować zatrzymanie oddechu i ostatecznie doprowadzić do śmierci.
Środki znieczulające są dostępne w postaci inhalacji lub do wstrzykiwań, a weterynarz musi zdecydować, czego użyć do wykonania zabiegu. Wybór ten opiera się na wielu aspektach, w tym: zakresie i czasie trwania zabiegu, gatunku i odmianie, wieku i stanie fizjologicznym zwierzęcia.
Klasa powszechnie stosowanych wziewnych środków znieczulających obejmuje związki takie jak izofluran, sewofluran i desfluran. Związki te pozwalają na łatwą kontrolę głębokości znieczulenia. Istnieje kilka opcji w sprzęcie, z których można wybierać do podawania wziewnych środków znieczulających.
Jednym z wyborów jest słoik dzwonowy, który powinien być używany pod maską - a nie na stole - aby uniknąć narażenia personelu na gazy znieczulające. Zmontuj słoik za pomocą ceramicznej lub plastikowej perforowanej platformy, tworząc przestrzeń między dnem słoika a platformą. Następnie, nosząc nieprzepuszczalne rękawiczki, nasącz wacik środkiem znieczulającym i umieść go pod platformą tak, aby spoczywał na dnie słoika. Następnie natychmiast zabezpiecz pokrywę, aby zapobiec wydostawaniu się oparów znieczulających. Aby umieścić zwierzę, przesuń pokrywę na bok, wprowadź zwierzę i natychmiast je zabezpiecz. Następnie obserwuj aktywność i oddechy, aby określić głębokość znieczulenia i wystawić zwierzę na działanie środka wziewnego. Należy pamiętać, że platforma służy jako bariera i zapobiega bezpośredniemu kontaktowi zwierzęcia z płynnym środkiem znieczulającym.
Alternatywą dla dzbanka jest komora indukcyjna używana w połączeniu z precyzyjnym waporyzatorem podłączonym do butli z tlenem. Pierwszym krokiem jest upewnienie się, że waporyzator jest napełniony odpowiednią ilością płynnego środka znieczulającego. Następnie sprawdź system oczyszczania gazów odlotowych. Jeśli jest to powszechnie stosowany system pasywny, zważyć kanister, aby określić, czy jest on nadal skuteczny. Ogólnie rzecz biorąc, wzrost o pięćdziesiąt gramów powyżej masy początkowej jest punktem, w którym kanister jest zużywany. Kolejnym krokiem jest montaż komory indukcyjnej. Upewnij się, że wejście pochodzi z parownika, a wyjście jest do systemu oczyszczania gazów odlotowych.
Aby rozpocząć, umieść zwierzę w komorze indukcyjnej i zabezpiecz pokrywę. Gdy zwierzę znajdzie się w komorze, najpierw uruchom przepływ tlenu z szybkością 1 litra na minutę, a następnie dostosuj ustawienie parownika precyzyjnego do poziomu indukcji 3-4 % dla izofluranu. Podobnie jak słoik dzwonowy, wystaw zwierzę na działanie środka znieczulającego, aby uzyskać efekt. Gdy zwierzę jest w pełni znieczulone, przepłucz komorę tlenem, wyłączając izofluran przed delikatnym usunięciem zwierzęcia. Ma to na celu zapobieżenie narażeniu personelu na gazy anestezjologiczne.
Inną metodą indukcji znieczulenia jest stożek na nos lub maskę na twarz, również podłączona do waporyzatora precyzyjnego. Ponieważ jednak gazy anestezjologiczne mają nieprzyjemny zapach, zwierzęta mogą sprzeciwiać się maskowaniu w celu indukcji. Ponadto istnieje również ryzyko spowodowania uduszenia z powodu zbyt mocnego chwytania. Dlatego preferowaną metodą jest użycie pudełka indukcyjnego lub słoika dzwonowego w celu wywołania znieczulenia, a następnie konserwacji za pomocą stożka nosowego. Najczęściej montaż jest taki, że stożek i komora indukcyjna są połączone z tym samym waporyzatorem z przełącznikiem pomiędzy nimi, aby przełączyć dostarczanie pary znieczulającej z komory indukcyjnej na stożek nosowy i odwrotnie. Po znieczuleniu zwierzęcia w komorze zabezpiecz jego twarz w stożku i przełącz przełącznik na rurce, aby przekierować przepływ gazu do stożka nosowego. Monitorować oddech i po upewnieniu się, że zwierzę jest zrelaksowane, zmniejszyć środek znieczulający do poziomu utrzymania 0,5 - 1,5%. Nałóż również maść okulistyczną na oczy, aby zapobiec wysuszeniu rogówki.
W przypadku środków znieczulających do wstrzykiwań, mieszanina ketaminy i innych środków uspokajających lub zwiotczających mięśnie, w tym ksylazyny i/lub acepromazyny. Z użyciem tych związków można przygotować różne kombinacje. Zobacz poniższy tekst, aby zapoznać się z najczęściej używanymi współczynnikami. Należy pamiętać, że ketamina jest substancją kontrolowaną i dlatego użyta ilość musi być odnotowana w rejestrze kontrolowanych leków, a mieszaniny muszą mieć swoje indywidualne dzienniki substancji kontrolowanych. W zależności od gatunku, wieku i stanu zdrowia zwierzęcia dobiera się mieszaninę i dawkę środka znieczulającego, a roztwór można wstrzykiwać dootrzewnowo lub domięśniowo. Zwykle znieczulenie iniekcyjne i wziewne stosuje się w połączeniu w celu uzyskania znieczulenia chirurgicznego.
Teraz, gdy wiesz, jak wywołać znieczulenie, dowiedzmy się o ocenie głębokości znieczulenia, którą należy monitorować co 10-30 minut, aby upewnić się, że zwierzę nie zostanie uszkodzone podczas zabiegu. Istnieje kilka metod, aby to zrobić u gryzoni.
Powszechnie stosowaną metodą jest uszczypnięcie palca u nogi. Wyprostuj nogę zwierzęcia i odizoluj taśmę między palcami. Następnie mocno ściśnij obszar za pomocą paznokci lub atraumatycznych kleszczy. Pozytywny odruch jest wskazywany przez cofnięcie nogi lub wycofanie stopy. Inną metodą jest szczypanie ogona wykonywane na końcu ogona. Pozytywną reakcję demonstruje drganie lub ruch ogona. Możesz także uszczypnąć czubek małżowiny usznej, a jeśli występuje drżenie głowy lub ruch wąsów do przodu, zwierzę nie znajduje się w chirurgicznej płaszczyźnie znieczulenia.
Aby sprawdzić głębokość znieczulenia, można również dotknąć kantu przyśrodkowego lub wewnętrznego kącika oka, aby wywołać odruch powiekowy - sygnalizowany mrugnięciem w odpowiedzi na dotknięcie powiek. Nawet jeśli występuje ruch powiek, wąsów lub wyraźne zwiększenie oddechu, zwierzę nie znajduje się w chirurgicznej płaszczyźnie znieczulenia.
Na koniec można sprawdzić odruch rogówkowy, dotykając rogówki palcem w rękawiczce lub aplikatorem z bawełnianą końcówką. Pozytywna odpowiedź jest sygnalizowana mrugnięciem.
Ważne jest, aby zmieniać się między miejscami, aby ocenić głębokość znieczulenia. Używanie tego samego palca u nogi lub ucha do wielokrotnego szczypania spowoduje znieczulenie obszaru, a reakcja zostanie stłumiona i nie da dokładnej oceny głębokości znieczulenia.
Oprócz tych metod oceny bodźców fizycznych należy również monitorować wskaźniki fizjologiczne, w tym tętno, częstość oddechów, ciśnienie krwi, kolor błony śluzowej i czas napełniania naczyń włosowatych. Podczas gdy ogólne obserwacje mogą być przydatne do wykrywania zmian w częstości oddechów, aby wykorzystać tętno do oceny głębokości, można użyć specjalistycznego sprzętu, takiego jak elektrokardiograf. Do pomiaru ciśnienia krwi istnieje wiele urządzeń, które można zamontować na ogonie, a nawet na całym ciele. Kolor błon śluzowych, oczu, uszu, ust, nosa, odbytu, łap i ogona może również wskazywać na głębokość znieczulenia. Obszary te powinny być różowe, co sugeruje odpowiednie oddychanie i tętno.
Aby sprawdzić czas napełniania kapilary, naciśnij małżowinę uszną znieczulonych zwierząt i policz liczbę sekund potrzebnych, aby zblanszowany obszar powrócił do różowego koloru. Nie powinno to trwać dłużej niż 1 do 2 sekund. Wydłużony czas napełniania sugeruje zmniejszenie częstości akcji serca lub siły skurczu serca, co wskazuje, że zwierzę może być zbyt głęboko znieczulone i bliskie śmierci. Po wyjęciu zwierzęcia ze znieczulenia nie powinno ono być zwracane do obiektu trzymania do czasu wyzdrowienia ze znieczulenia, chyba że jest stale monitorowane w obszarze pomieszczenia.
Teraz, gdy poznaliśmy zasady i procedury indukcji i konserwacji znieczulenia gryzoni, przyjrzyjmy się niektórym z częstych zastosowań środków znieczulających w dzisiejszych badaniach biomedycznych.
Prawdopodobnie najczęstszym zastosowaniem znieczulenia gryzoni jest przed i w trakcie operacji. Na przykład w tym przypadku naukowcy chcieli opracować model udaru mózgu spowodowanego tworzeniem się skrzepów. Aby to osiągnąć, wywołali znieczulenie u myszy, a następnie przewiercili czaszkę, aby stworzyć cienkie okienko. I kiedy zwierzę było jeszcze pod wpływem środków uspokajających, naukowcy wstrzyknęli światłoczuły barwnik do krążenia. Następnie wywołali fotoaktywację za pomocą lasera przez przewierconą czaszkę, aby spowodować powstanie skrzepu w unaczynieniu czaszki.
Innym przypadkiem, w którym wymagane jest znieczulenie gryzoni, jest przeprowadzenie analizy fizjologicznej. Na przykład naukowcy często używają elektrod EKG u znieczulonych zwierząt do monitorowania aktywności serca. Lub używają sond ultradźwiękowych do określenia szybkości ruchu przepony, aby dokładniej określić ilościowo częstość oddechów.
Wreszcie, stosowanie znieczulenia jest obowiązkowe podczas przeprowadzania eksperymentów z przeżywalnością w macicy. Na przykład elektroporacja in utero - metoda, w której ciężarna kobieta jest znieczulana, wykonuje się nacięcie w celu odsłonięcia rozwijających się zarodków, a elektrody są używane do indukowania embrionalnego wychwytu komórkowego wstrzykniętego materiału genetycznego.
Właśnie obejrzałeś film JoVE na temat podawania i podtrzymywania znieczulenia. Ponieważ znieczulenie gryzoni ułatwia wykonywanie tak szerokiego zakresu eksperymentów biologicznych, konieczne jest, aby każdy naukowiec posiadał umiejętność wywoływania i utrzymywania prawidłowej głębokości znieczulenia przez cały czas trwania eksperymentu. Jak zawsze, dziękujemy za oglądanie!
Related Videos
Lab Animal Research
195.6K Wyświetlenia
Lab Animal Research
31.2K Wyświetlenia
Lab Animal Research
38.8K Wyświetlenia
Lab Animal Research
60.8K Wyświetlenia
Lab Animal Research
28.5K Wyświetlenia
Lab Animal Research
111.7K Wyświetlenia
Lab Animal Research
41.5K Wyświetlenia
Lab Animal Research
35.2K Wyświetlenia
Lab Animal Research
58.4K Wyświetlenia
Lab Animal Research
190.8K Wyświetlenia
Lab Animal Research
83.1K Wyświetlenia
Lab Animal Research
24.5K Wyświetlenia
Lab Animal Research
63.9K Wyświetlenia
Lab Animal Research
37.0K Wyświetlenia