Name: Tracheotomia: metoda przeszczepiania komórek macierzystych do płuc (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 45 s
Description: Poznaj metodę przeszczepiania komórek macierzystych do płuc przez tchawicę. Technika tracheotomii umożliwia bezpieczne i skuteczne dostarczanie terapii komórkowej do lewego płuca myszy.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<p class="jove_step">Przedoperacyjnie</p>
<ol>
<li>Mysz biorca i komórki dawcy</li>
<li>Platforma operacyjna z taśmą i nicią chirurgiczną</li>
<li>Strzykawka 1cc</li>
<li>Igła 23G</li>
<li>Środek znieczulający: avertin 25 mg/ml (alternatywnie ketamina 9 mg/ml i ksylazyna 1 mg/ml)</li>
<li>Trymer do włosów z ostrzem nr 40</li>
<li>Rękawiczki sterylne</li>
<li>Waciki alkoholowe</li>
<li>Jod</li>
<li>Sterylne narzędzia chirurgiczne</li>
<li>Nić chirurgiczna</li>
<li>Kaniula 22G</li>
<li>Pipeta 200 ul (sterylna)</li>
<li>Sterylne końcówki do pipet</li>
<li>Antybiotykowa maść z klejem</li>
<li>Pojemnik na odpady ostre</li>
</ol>
<p class="jove_step">Procedura operacyjna</p>
<p class="jove_content"><span class="jove_content">W całej procedurze stosowane są techniki aseptyczne.</span></p>
<ol>
<li>Zważyć mysz.</li>
<li>Wykonać domięśniowy zastrzyk środka znieczulającego (250 mg/kg avertinu lub alternatywnie ketaminy 90 mg/kg i ksylazyny 10 mg/kg) w dawkach wystarczających do utrzymania oddechu spontanicznego, zapewniając jednocześnie znieczulenie o stężeniu chirurgicznym. Przed rozpoczęciem zabiegu zastosowano ucisk palca u nogi jako wskaźnik głębokiego bólu; brak reakcji u znieczulonego zwierzęcia był sygnałem do rozpoczęcia operacji.</li>
<li>Ułożyć mysz z siekaczami unieruchomionymi nicią chirurgiczną i przykleić ogon w celu stabilizacji.</li>
<li>Wystrzyżone sierść za pomocą ostrza do maszynki nr 40.</li>
<li>Zmienić rękawiczki (dalsze kroki wykonywać w rękawiczkach sterylnych).</li>
<li>Przed nacięciem skóry zdezynfekować obszar dwukrotnie alkoholem.</li>
<li>Zasterylizować obszar jodoforem.</li>
<li>Za pomocą sterylnych instrumentów wykonać niewielkie nacięcie (&lt;1 cm) równolegle do tchawicy.</li>
<li>Ostrożnie oddzielić tkankę od chrząstki.</li>
<li>Pod tchawicę wprowadzić wiązanie.</li>
<li>Delikatnie unieść wiązanie do góry i wprowadzić igłę do odsłoniętej tchawicy.</li>
<li>Wyjąć igłę i gładko, lecz szybko wprowadzić rurkę, aż do poczucia lekkiego oporu.</li>
<li>Pipetować komórki (objętość do 50 µL) bezpośrednio do cewnika.</li>
<li>Natychmiast usunąć rurkę oraz wiązanie, uwalniając mysz z aparatury operacyjnej.</li>
<li>W razie potrzeby delikatnie trzymać mysz w pozycji pionowej, chwytając ją za przednie łapy, i powoli poruszać.</li>
<li>Zamknąć ranę jednym szwem lub klejem antybiotycznym.</li>
</ol>
<p class="jove_step">Okres pooperacyjny</p>
<ol>
<li>Należy utrzymać mysz w cieple.</li>
<li>Buprenorfinę (0,05 mg/kg) należy podawać jako przeciwbólową terapię pooperacyjną co 12 godzin przez pierwsze 24 godziny po wykonaniu tego zabiegu.</li>
</ol>
<p class="jove_content"><img src="/files/ftp_upload/old/163_2008_7_15_4/163_figure-1.png" alt="Schemat zestawu eksperymentalnego: uniesienie tchawicy znieczulonej myszy za pomocą uchwytu i nici chirurgicznych na platformie." width="587" height="531" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="Rycina 1"></p>

<table><tbody><tr><td>igła 23 G</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>strzykawka 1 cc</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>cewnik 22 G</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>nić chirurgiczna</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>antybiotykowa maść klejąca</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Środek znieczulający</td><td></td><td></td><td>Avertin 25 mg/mL. Alternatywnie ketamina 9 mg/mL i ksylazyna 1 mg/ml.</td></tr></tbody></table>

tracheotomia: metoda transplantacji komórek macierzystych do płuc

Tracheotomy: A Method for Transplantation of Stem Cells to the Lung

Choroby płuc stanowią jedną z głównych przyczyn zgonów i mogą przerodzić się w epidemię w związku ze wzrostem zanieczyszczenia środowiska oraz palenia tytoniu na całym świecie. Postępy w terapii komórkami macierzystymi mogą łagodzić wiele objawów związanych z chorobami płuc i indukować naprawę pęcherzyków płucnych u osób dorosłych. Równolegle do trwających poszukiwań komórek macierzystych nadających się do leczenia ludzi, w celu zapewnienia skuteczności terapii należy zagwarantować precyzyjne dostarczanie i homing (kierowanie do miejsca choroby). W niniejszej pracy wykazuję, że komórki macierzyste można bezpiecznie wprowadzać przez tchawicę, co otwiera bezpośrednią drogę do płuc. Metoda ta obejmuje nacięcie skóry, wprowadzenie kaniuli w kierunku ogonowym do światła tchawicy i wzdłuż niego oraz wstrzyknięcie mieszaniny nośnika z komórkami macierzystymi do dróg oddechowych płuc. Poprzez tracheotomię można wprowadzić szeroki zakres roztworów pożywek i stabilizatorów, co umożliwia dostarczenie szerszej gamy typów komórek. Ponieważ nabłonek pęcherzykowy ogranicza te komórki do światła dróg oddechowych, ekspansja płuc i podciśnienie podczas wdechu mogą również wspomagać integrację komórek macierzystych. Dostarczanie komórek macierzystych przez tchawicę, charakteryzujące się szybkim pobraniem oraz możliwością zastosowania szerokiego spektrum preparatów, może przyspieszyć rozwój terapii opartych na komórkach, otwierając nowe możliwości leczenia chorób płuc.

<p class="jove_content">Stale dokonuje się znaczących przełomów w identyfikacji komórek macierzystych. Aby jednak przełożyć te odkrycia na praktykę, konieczne jest opracowanie nowych metod dostarczania komórek. W niniejszej pracy wykazuję, że drogi oddechowe stanowią bezpieczną drogę transplantacji komórek macierzystych do płuc.</p>

Tracheotomia: Metoda transplantacji komórek macierzystych do płuc

Choroby płuc są jedną z głównych przyczyn zgonów i istnieje prawdopodobieństwo, że przyjądą one formę epidemii ze względu na wzrost poziomu zanieczyszczeń oraz powszechność palenia tytoniu na całym świecie. Postępy w badaniach nad komórkami macierzystymi...

<p>Techniki aseptyczne są stosowane w celu</p>

tracheotomy-a-method-for-transplantation-of-stem-cells-to-the-lung

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Tracheotomy: Metoda przeszczepu komórek macierzystych do płuc

W niniejszym filmie przedstawiono i porównano dwa modele eksperymentalne służące do badania rozwoju obliteracyjnej choroby dróg oddechowych (OAD) u myszy: model heterotopowej oraz ortotopowej transplantacji tchawicy.

Heterotopowe i ortotopowe przeszczepy tchawicy u myszy wykorzystywane jako modele do badania rozwoju obliteracyjnej choroby dróg oddechowych

W niniejszym materiale prezentujemy protokół izolacji komórek podstawnych oraz komórek przewodów gruczołów podśluzowych z tchawki myszy. Przedstawiamy również metodę wstrzykiwania komórek macierzystych do grzbietowej poduszki tłuszczowej myszy w celu stworzenia modelu in vivo regeneracji gruczołów podśluzowych.

Izolacja komórek podstawnych i komórek przewodów gruczołów podśluzowych z tchawki myszy

Zatarczeniowe zapalenie oskrzelików jest kluczową przeszkodą w długoterminowym przeżyciu biorców przeszczepów płuc, a brak wiarygodnego modelu przedklinicznego uniemożliwia badanie immunopatogenezy tego schorzenia. W przeciwieństwie do innych przeszczepów narządów miąższowych, transplantacja unaczynionego płuca mysiego została opracowana dopiero niedawno. W niniejszej pracy przedstawiamy opracowany przez nas model zatarczeniowego zapalenia oskrzelików po ortotopowym przeszczepieniu pojedynczego...

Rozwój zapalenia obliteracyjnego oskrzelików w mysim modelu ortotopowego przeszczepienia płuc

Opisujemy nową technikę heterotopowego przeszczepu płuco-serce w jamie brzusznej (HAHLT) u szczurów. Konfiguracja przeszczepu powoduje częściowo załadowane krążenie przeszczepu, co pozwala na bezpośrednią ocenę funkcjonalną. Model ten może być stosowany do ostrych lub przewlekłych badań funkcji i statusu immunologicznego przeszczepionego przeszczepu.

Szczur Heterotopowe serce brzuszne/przeszczep pojedynczego płuca w konfiguracji z obciążeniem objętościowym

Tutaj opisujemy minimalnie inwazyjny model syngenicznego przeszczepu ortotopowego komórek gruczolakoraka płuc myszy jako model redukujący czas i koszty do badania niedrobnokomórkowego raka płuc.

Ortotopowe przeszczepienie komórek syngenicznego gruczolakoraka płuc w celu zbadania ekspresji PD-L1

Zwężenie przeszczepu stanowi krytyczną przeszkodę w wymianie dróg oddechowych za pomocą inżynierii tkankowej. Aby zbadać mechanizmy komórkowe leżące u podstaw zwężenia, wykorzystujemy mysi model wymiany tchawicy za pomocą inżynierii tkankowej z wysiewanymi komórkami jednojądrzastymi szpiku kostnego (BM-MNC). Tutaj szczegółowo opisujemy nasz protokół, w tym produkcję rusztowań, izolację BM-MNC, siew przeszczepu i implantację.

Wysiew i implantacja biosyntetycznego przeszczepu tchawicy zmodyfikowanego tkankowo w modelu mysim

Opisany jest protokół do wykonywania dotchawniczego przeszczepu mezenchymalnych komórek zrębu (MSC) poprzez wstrzyknięcie dotchawicze u noworodków szczurów donoszonych. Technika ta jest klinicznie realną opcją dostarczania komórek macierzystych i leków do płuc noworodków szczurów w celu oceny ich skuteczności.

Wkraplanie dotchawicze komórek macierzystych u nowonarodzonych szczurów donoszonych

Ta technika bezpośredniego wstrzykiwania leków do tchawicy noworodków gryzoni jest ważna w badaniu wpływu lokalnie podawanych leków lub leków biologicznych na choroby płuc u noworodków. Dodatkowo metoda ta może być również stosowana do wywoływania uszkodzenia płuc w modelach zwierzęcych.

Minimalnie inwazyjna metoda dotchawniczego wkraplania leków u nowonarodzonych gryzoni w leczeniu chorób płuc

Model mysiego przeszczepu wewnątrzpłucnego tchawicy (IPTT) jest cenny do badania choroby zarostowej dróg oddechowych (OAD) po przeszczepie płuc. Oferuje wgląd w specyficzne dla płuc zachowania immunologiczne i angiogenne w znoszeniu dróg oddechowych po allotransplantacji z wysoką odtwarzalnością. W tym miejscu opisujemy procedurę IPTT i jej oczekiwane efekty.

Mysi przeszczep wewnątrzpłucnej tchawicy: model do badania choroby zarostowej dróg oddechowych po przeszczepie płuc

Protokół ten opisuje ulepszoną technikę ortotopowego przeszczepu lewego płuca u szczurów, koncentrując się na zmniejszeniu trudności operacyjnych i poprawie wskaźników przeżycia.

Ortotopowy przeszczep lewego płuca u szczurów

Poznaj metodę przeszczepiania komórek macierzystych do płuc przez tchawicę. Technika tracheotomii umożliwia bezpieczne i skuteczne dostarczanie terapii komórkowej do lewego płuca myszy.

Tracheotomia: Metoda transplantacji komórek macierzystych do płuc

Przeglądaj więcej filmów