JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 2:20 min. • April 30th, 2023
- Na początek przenieś 10 zarodków danio pręgowanego za pomocą pipety transferowej do zlewki wypełnionej 20 mililitrami wody. Teraz hoduj zarodki w temperaturze 28 stopni Celsjusza, w odpowiednim cyklu jasnym i ciemnym wymaganym do eksperymentu. Następnie przenieś larwy do studzienek. Upewnij się, że w każdej studzience znajduje się jedna larwa, aby zapewnić wystarczająco dużo miejsca do pływania.
Teraz całkowicie napełnij każdą studzienkę wodą. Umieść płytkę studzienkową w komorze rejestracji behawioralnej i śledź ruch larw za pomocą oprogramowania do śledzenia wideo. Larwy wykazują zwiększony ruch w ciemności i zmniejszony ruch w świetle, gdy są wystawione na nieprawidłowy cykl światła i ciemności z powodu zwiększonego poziomu stresu. Obliczenie różnicy między średnią odległością przebytą w ostatniej minucie początkowego okresu a pierwszą minutą następnego okresu mówi nam o reakcji fotomotorycznej ryby.
W tym protokole zbadamy reakcję fotomotoryczną u larw danio pręgowanego i strzebli grubogłowych narażonych na działanie kofeiny. Najpierw umieść płytkę studzienkową zawierającą ryby doświadczalne w komorze zapisu behawioralnego. Następnie otwórz wcześniej opracowany protokół śledzenia. W przeglądarce śledzenia wideo upewnij się, że wszystkie larwy są widoczne, że w każdej studzience znajduje się tylko jedna larwa i że dołki są wyrównane ze zdefiniowanymi obszarami obserwacji.
Następnie kliknij Eksperymentuj i Wykonaj. Określ nazwę i lokalizację zapisu danych, a następnie kliknij ikonę Kilka obrazów na żywo, aby podświetlić wszystkie predefiniowane obszary wyświetlania. Na koniec zamknij panel komory nagrywania i kliknij Tło, a następnie Start na monitorze komputera.