Pożywka kondycjonowana narządowo: Generowanie pożywki z pobranych komórek narządów do badań nad rakiem z przerzutami

Niektóre narządy wytwarzają czynniki rozpuszczalne i stają się preferencyjnymi miejscami dla przerzutów raka piersi. Kondycjonowane podłoże przygotowane z tych pobranych komórek narządów może pomóc w identyfikacji i badaniu takich czynników.

Zacznij od umieszczenia pobranego narządu, takiego jak wątroba, w probówce zawierającej zimny PBS i obracania rurki w górę iw dół, aby usunąć resztki krwi z narządu. Umieść narząd na szalce Petriego. I za pomocą skalpela pokrój narząd w kostkę na małe kawałki.

Ponownie zawiesić te kawałki w probówce zawierającej podłoże podstawowe uzupełnione antybiotykiem w celu wsparcia wzrostu komórek i zapobieżenia zanieczyszczeniu. Teraz wlej zawiesinę komórkową do płytki hodowlanej i inkubuj w temperaturze 37 stopni Celsjusza z ciągłym dopływem dwutlenku węgla przez wymagany czas.

Podczas inkubacji komórki te uwalniają metabolity, czynniki wzrostu, białka macierzy zewnątrzkomórkowej do pożywki. Następnie przenieś zawiesinę komórkową do probówki wirówkowej i dodaj świeżą pożywkę, aby ją rozcieńczyć. Odwirować probówkę i przefiltrować supernatant, który jest kondycjonowanym podłożem, do świeżej probówki.

W poniższym protokole przygotujemy kondycjonowane poż