JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:34 min. • April 30th, 2023
Ciśnienie płynu śródmiąższowego lub IFP to siła wywierana przez płyn w przestrzeniach między komórkami w tkance. Najpierw znieczulij mysz z nowotworem za pomocą 2% izofluoranu zmieszanego z tlenem i unieruchomij ją na platformie tomografii komputerowej lub robota CT-IFP. Teraz wstrzyknij boczną żyłę ogonową myszy za pomocą liposomów otoczonych środkiem kontrastowym, aby uwidocznić guz. Wróć zwierzę do klatki i pozwól mu dojść do siebie.
Między 48 a 72 godzinami po wstrzyknięciu zabezpiecz znieczuloną mysz na platformie CT-IFP i wybierz kilka równomiernie rozmieszczonych pozycji na guzie do pomiaru IFP. Następnie, przed włożeniem, przepłukać igłę systemu IFP roztworem soli fizjologicznej heparyny. Ustawić igłę w wybranej pozycji i wprowadzić ją do tkanki nowotworowej.
Teraz uzyskaj obrazy we wszystkich pozycjach i zmierz IFP za pomocą oprogramowania. IFP w guzie jest zwykle wysoki ze względu na jego gęsty charakter, nieprawidłowe naczynia krwionośne i wadliwy układ limfatyczny. Może to prowadzić do akumulacji liposomów na obrzeżach guza. W poniższym protokole zademonstrujemy technikę pomiaru IFP w guzie litym.
Aby zmierzyć IFP, przyklej zwierzę do platformy robota CT-IFP, tak aby guz był unieruchomiony i dostępny dla systemu robota CT-IFP. Uzyskaj anatomiczny skan mikrotomografii komputerowej, jak właśnie pokazano, a następnie załaduj dane dotyczące wprowadzania igły przed igłą do oprogramowania do wyrównania robota CT-IFP i dostosuj okno i poziom, aby uwidocznić guz. Kliknij krawędź guza na dowolnym obrazie, a następnie wybierz lokalizację drugiego brzegu po sąsiedniej stronie guza.
Oprogramowanie obliczy serię pozycji wzdłuż linii liniowej między dwoma punktami. Następnie wybierz z listy współrzędne x, y i z, aby uzyskać serię od pięciu do ośmiu równomiernie rozmieszczonych pozycji. Następnie przepłukać igłę systemu IFP roztworem heparyny soli fizjologicznej i wprowadzić pierwsze z góry określone pozycje igły do okien współrzędnych XYZ oprogramowania sterującego robotem CT-IFP.
Naciśnij przycisk Go, aby przesunąć robota w żądane miejsce. Następnie dla każdej pozycji igły po kolei kliknij przycisk Włóż igłę, aby wprowadzić igłę do tkanki. Ściśnij i zwolnij rurkę PE-20, aby potwierdzić dobrą komunikację płynu między igłą IFP a tkanką i obserwuj, że pomiar IFP wzrasta i powraca do wartości sprzed ściskania w oprogramowaniu do akwizycji IFP. Na koniec wykonaj anatomiczną tomografię komputerową z włożoną igłą, klikając przycisk Cofnij igłę na końcu skanowania, aby usunąć igłę z tkanki.