Decellularyzacja poduszek tłuszczowych sutka: wyprowadzanie hydrożeli macierzy zewnątrzkomórkowej z poduszek tłuszczowych sutka
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 6:41 min. • April 30th, 2023
Najpierw umieść poduszeczki tłuszczowe lub MFP w naczyniu z roztworem trypsyny-EDTA i inkubuj przez pożądany czas, aby przełamać zrosty macierzy komórkowej. Umyj urządzenia wielofunkcyjne wodą dejonizowaną i przecedź przez sitko. Umieść chusteczki w zlewce z mieszadłem i dodaj Triton X-100. Mieszaj, aby lizować komórki bez wpływu na czynniki wzrostu w macierzy zewnątrzkomórkowej tkanki.
Odcedź urządzenia wielofunkcyjne i spłucz wodą dejonizowaną. Przenieś tkanki z powrotem do zlewki i dodaj kwas dezoksycholowy, aby zlizować pozostałe komórki. Następnie odcedź urządzenia wielofunkcyjne i umieść je w zlewce zawierającej dejonizowaną wodę z penicyliną-streptomycyną, aby zapobiec zanieczyszczeniu. Inkubować zlewkę w temperaturze 4 stopni Celsjusza przez noc.
Odcedź urządzenia wielofunkcyjne i umieść je w zlewce zawierającej etanol i kwas nadoctowy. Kwas nadoctowy zwiększa sztywność macierzy zewnątrzkomórkowej tkanki. Mieszaj przez jakiś czas i powtórz krok odcedzania. Umyj urządzenia wielofunkcyjne PBS, a następnie wodą dejonizowaną. Przenieś odcedzone urządzenia wielofunkcyjne do zlewki zawierającej propan-1-ol.
Mieszaj przez jakiś czas, odcedź zawartość i umyj urządzenia wielofunkcyj
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych