JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:45 min. • April 30th, 2023
- Najpierw rozmrozić fiolki z matrycą błony podstawnej w temperaturze 4 stopni Celsjusza przez noc. Macierz błony podstawnej składa się z białek obecnych w mikrośrodowisku guza, które pomagają zachować cechy komórek rakowych in vitro. Następnego dnia umieścić fiolkę z matrycą błony podstawnej na lodzie, aby utrzymać matrycę w stanie ciekłym. Umieść komórki raka płuc we wstępnie schłodzonej probówce wirówkowej i odwiruj w temperaturze 4 stopni Celsjusza. Zassać supernatant i delikatnie postukać, aby usunąć osad i umieścić go na lodzie. Następnie dodaj odpowiednią objętość mieszanki błony podstawnej do tej probówki i wymieszaj, aby uzyskać jednolitą zawiesinę komórkową. Wykonaj wszystkie czynności w niskiej temperaturze, aby zapobiec żelowaniu błony podstawnej.
Przenieść odpowiednią objętość zawiesiny matrycy komórkowej do środka każdej studzienki we wstępnie schłodzonej płycie studzienki, pokrywającej całą studzienkę. Inkubować płytkę dołka, aby matryca zastygła. Zbadaj pod mikroskopem, aby zapewnić równomierne rozmieszczenie komórek w macierzy. Dodaj kompletną pożywkę do kultur 3D do każdej studzienki i inkubuj w temperaturze 37 stopni Celsjusza. To podłoże ułatwia interakcje z mac
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych