JoVE Encyclopedia of Experiments
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 5:27 min • April 30th, 2023
- Komórki nowotworowe wykazują wysoką aktywność glikolową. Znaczniki radiowe, takie jak fluorodeoksyglukoza F18 - FDG - są analogami glukozy używanymi do obserwacji tkanek nowotworowych. Najpierw zmierz rozpad radioaktywności roztworu FDG w kalibratorze dawki. Narysuj roztwór FDG w strzykawce insulinowej i umieść w ołowianym uchwycie strzykawki. Umieść mysz w ciepłej temperaturze, aby zapobiec aktywacji brązowej tkanki tłuszczowej. Aktywowana brunatna tkanka tłuszczowa prowadzi do większego wychwytu FDG. Znieczulaj mysz przez dwie minuty i przenieś ją do respektu. Nakłuj ogon i zmierz poziom glukozy we krwi. Hiperglikemia może prowadzić do zmniejszonego wychwytu FDG przez płuca.
W ciepłych warunkach zdezynfekuj i rozszerz żyłę ogonową myszy. Wstrzyknąć roztwór FDG. Przenieś mysz do komory anestezjologicznej w celu ogólnoustrojowej dystrybucji FDG. Wewnątrz komórki rakowej heksokinaza przekształca FDG w fosforan FDG 6, który nie może dalej metabolizować, a zatem gromadzi się wewnątrz komórki. Zabezpiecz mysz w pozycji leżącej na plecach pod narkozą w komorze obrazowania. Wykonaj obrazowanie PET/CT. Po obrazowaniu pozwól myszy dojść do siebie w klatce. Emisja pozytonów z F18 jest rejestrowana podczas skanowania PET, podczas gdy tomografia komputerowa pokazuje obrazy rentgenowskie tkanek. Poniższy protokół przedstawia obrazowanie FDG PET/CT metabolicznie aktywnych modeli raka płuca.
--ostrożność. Stosować sprzęt ochronny i przestrzegać wszystkich obowiązujących procedur regulacyjnych podczas obchodzenia się z radioaktywnością. Zacznij od ogrzania klatki myszy, które mają być obrazowane w temperaturze 37 stopni Celsjusza, na godzinę przed wstrzyknięciem fluorodeoksyglukozy znakowanej fluorem18. Zmniejsza to zużycie brązowego tłuszczu przez znacznik. Zważ pierwszą mysz i zapisz jej wagę. Po znieczuleniu myszy przy użyciu metody zatwierdzonej przez instytucję, przetestuj głębokość znieczulenia, ściskając palec u nogi. Jeśli nie widać odpowiedzi, kontynuuj procedurę, nakładając maść okulistyczną na oczy, aby zapobiec wysuszeniu podczas znieczulenia. Ostrożnie rozcieńczyć fluorodeoksyglukozę znakowaną fluorem18, która ma 109-minutowy radioaktywny okres półtrwania, w sterylnym roztworze soli fizjologicznej o skorygowanym stężeniu wtrysku skorygowanym o rozpad wynoszącym od 70 do 75 mikrokiurów na 100 mikrolitrów.
Następnie pobrać 100 mikrolitrów do strzykawki insulinowej z igłą o rozmiarze 28 i zmierzyć dawkę radioaktywności za pomocą kalibratora dawki. Zapisz pomiar i czas pomiaru, aby określić korekcję zaniku. Umieścić strzykawkę w ołowianym uchwycie na strzykawkę. Aby wstrzyknąć, najpierw ogrzej ogon przez 1 do 2 minut gazą nasączoną ciepłą wodą. A następnie przetrzyj 70% izopropanolem, aby rozszerzyć żyłę ogonową, tuż przed wstrzyknięciem. Podać całą objętość do strzykawki z wstrzyknięciem w bolusie przez boczną żyłę ogonową i zapisać czas wstrzyknięcia. Następnie odmierzyć pozostałą dawkę w strzykawce za pomocą kalibratora dawki i zapisać pomiar oraz czas.
Na koniec umieść mysz, której wstrzyknięto zastrzyk, w komorze anestezjologicznej z 1,5 do 2% izofluranem w temperaturze 37 stopni Celsjusza, aby umożliwić rozprowadzenie sondy przez krążenie ogólnoustrojowe myszy przez godzinę przed skanowaniem PET. Po godzinie umieść pierwszą mysz w komorze obrazowania ustawionej na 37 stopni Celsjusza, pod stożkiem izofluranu pod nosem i zabezpiecz jej kończyny taśmą medyczną w pozycji leżącej. Umieść komorę obrazowania w skanerze PET/CT i uzyskaj skany PET i CT zgodnie z opisem w instrukcji skanera PET/CT. Po zakończeniu badania PET/CT wyjmij mysz z komory obrazowania i pozwól jej dojść do siebie w klatce.