JoVE Encyclopedia of Experiments
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 5:27 min • April 30th, 2023
- Komórki nowotworowe wykazują wysoką aktywność glikolową. Znaczniki radiowe, takie jak fluorodeoksyglukoza F18 - FDG - są analogami glukozy używanymi do obserwacji tkanek nowotworowych. Najpierw zmierz rozpad radioaktywności roztworu FDG w kalibratorze dawki. Narysuj roztwór FDG w strzykawce insulinowej i umieść w ołowianym uchwycie strzykawki. Umieść mysz w ciepłej temperaturze, aby zapobiec aktywacji brązowej tkanki tłuszczowej. Aktywowana brunatna tkanka tłuszczowa prowadzi do większego wychwytu FDG. Znieczulaj mysz przez dwie minuty i przenieś ją do respektu. Nakłuj ogon i zmierz poziom glukozy we krwi. Hiperglikemia może prowadzić do zmniejszonego wychwytu FDG przez płuca.
W ciepłych warunkach zdezynfekuj i rozszerz żyłę ogonową myszy. Wstrzyknąć roztwór FDG. Przenieś mysz do komory anestezjologicznej w celu ogólnoustrojowej dystrybucji FDG. Wewnątrz komórki rakowej heksokinaza przekształca FDG w fosforan FDG 6, który nie może dalej metabolizować, a zatem gromadzi się wewnątrz komórki. Zabezpiecz mysz w pozycji leżącej na plecach pod narkozą w komorze obrazowania. Wykonaj obrazowanie PET/CT. Po obrazowaniu pozwól myszy dojść do siebie w klatce. Emisja pozytonów z F18 jest rejestrowana podczas skanowania PET, podczas gdy tomografia komputerowa pokazuje obrazy rentgenowskie tkanek. Poniższy protokół przedstawia obrazowanie FDG PET/CT metabolicznie aktywnych modeli raka płuca.
--ostrożność. Stosować sprzęt ochronny i przestrzegać wszystkich obowiązujących procedur regulacyjnych podczas obchodzenia się z radioaktywnością. Zacznij od ogrzania klatki myszy, które mają być obrazowane w temperaturze 37 stopni Celsjusza, na godzinę przed wstrzyknięciem fluorodeoksyglukozy znakowanej fluorem18. Zmniejsza to zużycie brązowego tłuszczu przez znacznik. Zważ pierwszą mysz i zapisz jej wagę. Po znieczuleniu myszy przy użyciu metody zatwierdzonej przez instytucję, przetestuj głębokość znieczulenia, ściskając palec u nogi. Jeśli nie widać odpowiedzi, kontynuuj procedurę, nakładając maść okulistyczną na oczy, aby zapobiec wysuszeniu podczas znieczulenia. Ostrożnie rozcieńczyć fluorodeoksyglukozę znakowaną fluorem18, która ma 109-minutowy radioaktywny okres półtrwania, w sterylnym roztworze soli fizjologicznej o skorygowanym stężeniu wtrysku skorygowanym o rozpad wynoszącym od 70 do 75 mikrokiurów na 100 mikrolitrów.
Następnie pobrać 100 mikrolitrów do strzykawki insulinowej z igłą o rozmiarze 28 i zmierzyć dawkę radioaktywności za pomocą kalibratora dawki. Zapisz pomiar i czas pomiaru, aby określić korekcję zaniku. Umieścić strzykawkę w ołowianym uchwycie na strzykawkę. Aby wstrzyknąć, najpierw ogrzej ogon przez 1 do 2 minut gazą nasączoną ciepłą wodą. A następnie przetrzyj 70% izopropanolem, aby rozszerzyć żyłę ogonową, tuż przed wstrzyknięciem. Podać całą objętość do strzykawki z wstrzyknięciem w bolusie przez boczną żyłę ogonową i zapisać czas wstrzyknięcia. Następnie odmierzyć pozostałą dawkę w strzykawce za pomocą kalibratora dawki i zapisać pomiar oraz czas.
Na koniec umieść mysz, której wstrzyknięto zastrzyk, w komorze anestezjologicznej z 1,5 do 2% izofluranem w temperaturze 37 stopni Celsjusza, aby umożliwić rozprowadzenie sondy przez krążenie ogólnoustrojowe myszy przez godzinę przed skanowaniem PET. Po godzinie umieść pierwszą mysz w komorze obrazowania ustawionej na 37 stopni Celsjusza, pod stożkiem izofluranu pod nosem i zabezpiecz jej kończyny taśmą medyczną w pozycji leżącej. Umieść komorę obrazowania w skanerze PET/CT i uzyskaj skany PET i CT zgodnie z opisem w instrukcji skanera PET/CT. Po zakończeniu badania PET/CT wyjmij mysz z komory obrazowania i pozwól jej dojść do siebie w klatce.
Niniejszy artykuł przedstawia protokół wykorzystania F18 fluorodeoksyglukozy (FDG) w obrazowaniu PET/CT w celu obserwacji aktywności metabolicznej w modelach raka płuca. Procedura obejmuje etapy przygotowania, wstrzyknięcia oraz obrazowania, aby zapewnić dokładność otrzymanych wyników.
Nieinwazyjne obrazowanie FDG PET/CT umożliwia ilościową ocenę aktywności metabolicznej guza, wspierając walidację celów onkologicznych we wczesnych fazach oraz ograniczanie ryzyka mechanistycznego. Podejście to zapewnia ciągłość translacyjną od modeli przedklinicznych do obrazowania klinicznego, zwiększając pewność prognostyczną w celowaniu w szlaki metaboliczne. Integracja standaryzowanych protokołów obrazowania wzmacnia proces podejmowania decyzji w zakresie portfolio poprzez umożliwienie powtarzalnych, ilościowych odczytów w fazach odkrywczej i przedklinicznej.
Obrazowanie FDG PET/CT łączy wczesne etapy odkrywania, identyfikację wiodących związków oraz walidację przedkliniczną, dostarczając standaryzowanych, ilościowych odczytów metabolicznych in vivo.
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ostatnia aktualizacja: 29 sierpnia 2026