Test strumienia zewnątrzkomórkowego w sferoidach 3D: metoda pomiaru aktywności metabolicznej sferoid guza trzustki

- Komórki raka trzustki oddziałują z fibroblastami związanymi z rakiem w mikrośrodowisku guza lub TME. Interakcje te modulują aktywność metaboliczną komórek nowotworowych i wpływają na progresję raka.

Sferoidy to agregaty komórkowe, które rekapitulują TME in vitro. Dlatego możemy użyć tych sferoid do przetestowania zmian w funkcjach metabolicznych guza za pomocą testu strumienia zewnątrzkomórkowego. Ten test mierzy zewnątrzkomórkowe stężenie tlenu i protonów w celu określenia odpowiednio metabolizmu tlenowego i glikolitycznego.

Zacznij od pobrania odpowiednio dobranych sferoid 3D wykonanych przez jednoczesną hodowlę komórek raka trzustki z fibroblastami trzustki. Teraz przenieś sferoidy na płytkę do analizy strumienia i przykryj ją wkładem czujnika zawierającym badane leki. Uruchom test w analizatorze strumienia zewnątrzkomórkowego

.

Analizator strumienia pneumatycznie wstrzykuje badane leki z wkładu czujnika na płytkę analityczną w określonych punktach czasowych. W odpowiedzi na testowane leki, komórki uwalniają protony i tlen do mikrokomory płytki, a fluorofory obecne w sondzie czujnika mierzą te poziomy. Na koniec, za pomocą odpowiedniego oprogramowania, przeanalizuj funkcjonalno