Fluorescencyjny ortotopowy model myszy: wszczepianie GFP z ekspresją komórek rakowych do myszy w celu oceny progresji guza in vivo
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 5:08 min. • April 30th, 2023
- Komórki nowotworowe wykazujące ekspresję białka zielonej fluorescencji lub GFP umożliwiają monitorowanie wzrostu guza i przerzutów za pomocą nieinwazyjnego obrazowania optycznego. Zazwyczaj wszczepiamy te komórki do modelu ortotopowego, który pozwala na odtworzenie mikrośrodowiska guza i naśladuje interakcję komórek nowotworowych z ich otoczeniem.
Zacznij od umieszczenia znieczulonej myszy na ciepłej poduszce grzewczej. Teraz włóż nos do maski na nos, aby dostarczyć tlen i izofluran, środek znieczulający. Za pomocą nożyczek wykonaj małe nacięcie i przetnij tkankę. Delikatnie wyciągnij śledzionę wraz z trzustką i zlokalizuj ogon trzustki.
Załadować strzykawkę z zawiesiną fluorescencyjnych komórek rakowych i delikatnie wstrzyknąć ją do ogona trzustki. W miejscu wstrzyknięcia pojawia się powierzchowny pęcherzyk, potwierdzający udaną implantację. Umieść narządy z powrotem w jamie ciała i użyj sterylnego szwu, aby zamknąć nacięcie. Teraz umieść mysz z powrotem w klatce i monitoruj ją aż do wyzdrowienia.
Po upływie żądanego czasu umieść mysz w komorze obrazowania i zrób zdjęcia. Wiązka światła uderza w komórki rakowe i wzbudza GFP, który z kolei wytwarza zieloną fluorescencję. W poniżs
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych