JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:14 min. • April 30th, 2023
- Komórki macierzyste raka trzustki lub CSC są podzbiorem samoodnawialnych komórek nowotworowych i mogą dać początek całemu guzowi. CSC znajdują się w dobrze chronionej niszy składającej się z innych komórek, takich jak fibroblasty, komórki odpornościowe, komórki śródbłonka i składniki macierzy zewnątrzkomórkowej, takie jak cytokiny i czynniki wzrostu. Interakcje zachodzące między komórkami w takim środowisku pomagają CSC rozprzestrzeniać się i zwiększać wzrost guza.
Aby zbadać właściwości CSC, izolujemy je od guzów trzustki. Zacznij od pobrania zawiesiny komórkowej z ludzkiej tkanki guza trzustki w pożywce wzrostowej CSC. Następnie wysiewaj zawiesinę, składającą się głównie z fibroblastów i CSC, na płytce pokrytej żelatyną i inkubuj ją przez żądany czas. Fibroblasty przylegają do powierzchni żelatyny, pozostawiając swobodnie unoszące się CSC w zawiesinie komórki.
Weź niewielką ilość zawiesiny komórkowej i dodaj błękit trypanowy. Odpipetować tę mieszaninę do hemocytometru i policzyć liczbę żywotnych komórek. Błękit trypanowy dostaje się do martwych komórek i barwi je na niebiesko, pozostawiając żywe komórki bezbarwne. Na koniec przechowuj CSC do dalszej analizy.
W poniższym protoko
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych