JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 6:26 min. • April 30th, 2023
- W inwazji guza obwodowe komórki nowotworowe przechodzą przejście nabłonkowe do mezenchymalnego lub EMT, co powoduje miejscową degradację macierzy zewnątrzkomórkowej lub ECM. Możemy badać interakcję komórek nowotworowych z ECM in vitro.
W celu zbadania tych interakcji należy przenieść wstępnie uformowaną sferoidę pochodzącą z komórek nowotworowych trzustki na płytkę zawierającą rusztowanie kolagenowe wraz z osadzonymi fluorescencyjnymi sondami znacznikowymi i pożywką hodowlaną. Sferoida guza uwalnia proteazy, które degradują kolagen i zmniejszają sztywność ECM, co powoduje swobodny ruch sond znacznikowych w ECM.
Inkubować płytkę przez żądany czas. Obserwuj próbkę pod mikroskopem świetlnym, aby spojrzeć na siatkę punktów próbek w rusztowaniu kolagenowym i nagrać z nich dane wideo. Obszar macierzy w pobliżu sferoidy wykazuje maksymalną degradację kolagenu. W związku z tym zwiększył ruch sondy. Natomiast obszar oddalony od sferoidy wykazuje mniejszą degradację kolagenu, co skutkuje ograniczonym ruchem cząsteczek sondy.
Ta technika badania właściwości reologicznych ECM poprzez pomiar trajektorii cząstek znacznikowych jest znana jako mikroreologia śledzenia cząstek lub PTM. W poniższym
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych