JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:23 min. • April 30th, 2023
- Komórki macierzyste melanocytów w stanie spoczynku, w odpowiedzi na promieniowanie UV lub depilację włosów, ulegają aktywacji. Aktywowane komórki macierzyste czerniaka mogą prowadzić do czerniaka skóry - formy raka skóry. W celu zbadania czerniaka przygotowujemy zamrożone bloki tkanki skórnej, które zachowują natywne struktury DNA i białek podczas procedury utrwalania.
Zacznij od umieszczenia uśpionej myszy z czerniakiem na łóżku chirurgicznym i usuń włosy z grzbietowej części skóry powyżej ogona. Wyciąć skórę i przykryć ją bibułą filtracyjną. Następnie zanurz bibułę filtracyjną zawierającą tkankę skórną w neutralnej buforowanej formalinie na żądany czas. Formalina wnika w tkankę skórną i wiąże się z aminokwasami, co powoduje sieciowanie białek, prowadząc w ten sposób do utrwalenia tkanek.
Usuń tkankę skórną z papieru i odetnij tkankę, aby uzyskać kawałki o pożądanej wielkości. Teraz osadź kawałki tkanki pionowo w kriofordzie wypełnionym pożywką OCT i umieść krioformy na suchym lodzie. OCT to matryca próbki, która krzepnie po zamrożeniu i tworzy galaretowatą warstwę wokół próbki tkanki, utrzymując ją na miejscu. Zamrożone bloki należy wykorzystać do dalszych badań histologicznych
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych