Generowanie organotypowych rekonstrukcji całej skóry: procedura tworzenia modelu 3D skóry na podstawie próbek ludzkiej skóry

Skóra składa się przede wszystkim z górnej warstwy naskórka i dolnej warstwy skóry właściwej. Komórki naskórka są rozwarstwione na wiele warstw, od najmniej zróżnicowanych komórek obecnych u podstawy do wysoce zróżnicowanych komórek na obrzeżach. Aby wyhodować tkankę skórną naśladującą morfologiczne i biochemiczne aspekty normalnej skóry, możemy ustalić organtypowy model skóry.

Na początek weź płytkę wielodołkową z membraniastą wkładką. Dodaj fibroblasty skóry zmieszane z kolagenem do wkładki. Inkubuj, aby ułatwić krzepnięcie macierzy kolagenowej w celu osadzenia fibroblastów i naśladowania przedziału skórnego skóry.

Następnie dodaj zawiesinę komórek keratynocytów na warstwę skóry właściwej. Inkubować płytkę, aby keratynocyty przylegały do komory skórnej. Uzupełnij kulturę pożywką do naskórka, aby zainicjować proliferację keratynocytów i tworzenie warstwy naskórka.

Na koniec przenieś wkładki na świeżą płytkę wielodołkową. Dodaj pożywkę warstwową tak, aby pokrywała tylko podstawę konstrukcji, tworząc w ten sposób granicę faz powietrze-ciecz. Podczas inkubacji granica powietrze-ciecz ułatwia różnicowanie keratynocytów w warstwowy wielowarstwowy naskórek.

W poniższym protokole wygener