JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 6:44 min. • April 30th, 2023
- Test tworzenia kolonii określa zdolność poszczególnych komórek do namnażania się i tworzenia kolonii. Zacznij od wyciętej skóry mysiej i grzbietowej na płytce hodowlanej. Zeskrob tkankę podskórną i tłuszcz z brzusznej strony skóry. Potraktuj tkankę roztworem trawiącym. Enzymy proteolityczne w roztworze degradują macierz zewnątrzkomórkową, indukując dysocjację komórek naskórka.
Delikatnie zeskrob warstwę naskórka, aby uwolnić dysocjujące komórki i włosy do podłoża do zbioru. Przefiltrować zawiesinę przez odpowiednie sitko, aby zatrzymać włosy lub wszelkie zanieczyszczenia i uzyskać jednokomórkową zawiesinę komórek naskórka. Przenieś żądaną objętość tej zawiesiny komórkowej na płytkę pokrytą kolagenem zawierającą przylegającą warstwę komórek zasilających z zatrzymanym wzrostem. Uzupełnij odpowiednią pożywką, która sprzyja przeżyciu keratynocytów.
Podczas hodowli keratynocyty przyczepiają się do warstwy zasilającej. Dodatkowo te komórki karmicielskie wydzielają czynniki wzrostu i syntetyzują białka macierzy zewnątrzkomórkowej, które wspomagają wzrost keratynocytów. W zależności od zdolności proliferacyjnych poszczególnych keratynocytów zaczynają tworzyć kolonie. Usuń pożywkę i napra
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych