Test przeszczepu podskórnego: metoda przeszczepiania komórek czerniaka od dawcy do biorcy modelu danio pręgowanego

- Podczas testu przeszczepu czerniaka komórki rakowe danio pręgowanego z nowotworem są przeszczepiane do modelu biorcy z obniżoną odpornością w celu zbadania rozwoju guza. Zacznij od pobrania eutanazji dawcy danio pręgowanego i chirurgicznego wycięcia guza z jego ciała. Przenieś guz na szalkę Petriego zawierającą odpowiedni bufor i zmiel go na małe kawałki.

Następnie rozcieraj fragmenty guza za pomocą pipety. To dysocjuje kawałki guza na pojedyncze komórki. Teraz załaduj zawiesinę komórek nowotworowych do strzykawki. Następnie przygotuj danio pręgowanego Casper z obniżoną odpornością na bibule filtracyjnej. Ten zmutowany wariant danio pręgowanego z niedoborem pigmentacji nie ma melanocytów i irydoforów, co czyni go przezroczystym i wszechstronnym do obrazowania i eksperymentów transplantacyjnych.

Następnie wstrzyknąć wstępnie załadowaną zawiesinę komórek czerniaka podskórnie w obszar powyżej jamy otrzewnej, w połowie drogi między tyłomózgowiem a płetwą grzbietową danio pręgowanego Caspera. Teraz przenieś rybę biorcę do wody i monitoruj ją, aby obserwować rozwój guza. Przezroczyste ciało danio pręgowanego pomaga w łatwej wizualizacji rozwiniętych guzów.

W poniższym protokole pokażem