JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 5:05 min. • April 30th, 2023
- Aby rozpocząć test, najpierw należy odpipetować zawiesinę komórek fibroblastów uzupełnioną kwasem askorbinowym do płytki dołka i inkubować. Kwas askorbinowy zwiększa proliferację fibroblastów. Stymuluje również wydzielanie natywnych składników ECM, osadzając w ten sposób proliferujące komórki w grubej macierzy zewnątrzkomórkowej.
Delikatnie odczep matrycę od powierzchni płytki i pozwól jej unosić się w podłożu. Macierz kurczy się i staje się grubsza wraz z większym osadzaniem się i przebudową macierzy, co powoduje powstanie tkanki przypominającej natywną skórę właściwą. Rozprowadź matrycę na porowatej siatce. Następnie zasiej komórki raka nabłonka na macierzy i inkubuj, aby komórki się uspokoiły i przyczepiły.
Przenieś zespół na siatkową platformę wstępnie zmontowaną w naczyniu. Dodaj pożywkę, aby uzupełnić tylko dolną warstwę matrycy, aby wygenerować interfejs powietrze-ciecz dla komórek powyżej. Podczas hodowli interfejs sprzyja proliferacji i różnicowaniu komórek nowotworowych. Komórki wydzielają również proteazy, które degradują ECM, ułatwiając ich migrację i inwazję do macierzy.
W poniższym protokole zademonstrujemy test inwazji przy użyciu komórek raka płaskonabłonkowego sk
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych