JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:21 min. • March 4th, 2025
Weź wycinek tkanki mózgowej od myszy poddanej łagodnej przewlekłej hipoperfuzji mózgowej (MCCH) i wstrzykniętej peptydom beta-amyloidu.
MCCH charakteryzuje się zmniejszonym przepływem krwi do mózgu. Ogranicza to dopływ tlenu i składników odżywczych do warstwy komórek śródbłonka naczyń krwionośnych mózgu, uszkadzając komórki.
Uszkodzenie zwiększa przepuszczalność ściany naczyniowej, umożliwiając wstrzykiwanym peptydom amyloid-beta gromadzenie się w ścianie i tworzenie blaszek miażdżycowych.
Umyj sekcję buforem, aby usunąć pozostałości chemikaliów.
Inkubuj z tioflawiną S, barwnikiem fluorescencyjnym, który wiąże się z blaszkami amyloidowymi.
Umyj poplamioną część zmniejszającym się stężeniem alkoholu, aby usunąć niezwiązany barwnik i ponownie nawodnić tkankę.
Umieść sekcję w buforze, aby utrzymać nawodnienie.
Zamontuj sekcję za pomocą medium montażowego, które zachowuje intensywność fluorescencji barwnika.
Pod mikroskopem fluorescencyjnym zbadaj obecność znakowanych fluorescencyjnie złogów amyloidu, aby potwierdzić agregację amyloidu beta indukowaną przez MCCH.