Name: Heterotopowy przeszczep serca u myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 23 min 43 s
Description: Naucz się techniki heterotopowego przeszczepu serca u myszy do badań nad odpowiedzią immunologiczną i mechanizmami odrzucania. Ta zmodyfikowana metoda umożliwia niezawodne testowanie nowych leków immunosupresyjnych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Przygotowanie dawcy i pobranie serca:
<ol>
<li style="text-align: left">Myszy podaje się znieczulenie poprzez dood brzuszne wstrzyknięcie pentobarbitalu, a następnie umieszcza się ją w pozycji grzbietowej na polu operacyjnym.</li>
<li style="text-align: left">Wykonuje się długie cięcie w linii środkowej brzucha. Zawartość jamy brzusznej odsuwa się za pomocą pozostawionej gazy, aby odsłonić aortę brzuszną oraz żyłę główną dolną.</li>
<li style="text-align: left">W celu heparynizacji do żyły głównej dolnej wstrzykuje się 1 ml heparyny (10 j./ml).</li>
<li style="text-align: left">Wykonuje się torakotomie: żebra przecina się po obu stronach kręgosłupa, a przednią ścianę klatki piersiowej unosi, aby odsłonić serce.</li>
<li style="text-align: left">Żyłę główną dolną, żyłę główną górną oraz żyłę nieparzystą podwiązuje się jedwabną nicią 6-0 i przecina powyżej podwiązań.</li>
<li style="text-align: left">Aortę wstępującą i tętnicę płucną oddzielono i przecięto tak dystalnie, jak to możliwe.</li>
<li style="text-align: left">Żyły płucne zostają podwiązane i przecięte dystalnie od wiązań.</li>
<li style="text-align: left">Serce poddaje się perfuzji w temperaturze 4°Co roztwór soli fizjologicznej</li>
<li style="text-align: left">Serce przechowuje się w lodowatym roztworze soli fizjologicznej.</li>
</ol>
Przygotowanie biorcy i transplantacja
<ol>
<li style="text-align: left">Myszy podaje się znieczulenie poprzez dostawodnieuwkowy wtrysk pentobarbitalu, a następnie kładzie ją na plecach w polu operacyjnym.</li>
<li style="text-align: left">Wykonuje się długie cięcie w linii środkowej brzucha. Treść jamy brzusznej odsuwa się za pomocą gazy poza obszar brzucha, aby odsłonić aortę brzuszną oraz żyłę główną dolną.</li>
<li style="text-align: left">Odnogi aorty brzusznej i żyły głównej dolnej zostają odsłonięte i podwiązane szwami 10-0.</li>
<li style="text-align: left">Podwiązania proksymalne i dystalne umieszcza się odpowiednio wokół aorty i żyły głównej dolnej.</li>
<li style="text-align: left">Wenotomię żyły głównej dolnej biorcy wykonuje się za pomocą igły 30 G. Otwór zostaje następnie rozszerzony za pomocą mikronożyczek do długości równej tętnicy płucnej dawcy.</li>
<li style="text-align: left">Aortotomię aorty brzusznej biorcy wykonuje się za pomocą igły 30 G.</li>
<li style="text-align: left">Otwartą aortę brzuszną i żyłę główną dolną przemywa się roztworem soli fizjologicznej.</li>
<li style="text-align: left">Serce dawcy umieszcza się po lewej stronie brzucha biorcy i przykrywa gazą.</li>
<li style="text-align: left">Szwy stabilizujące zakłada się w punktach proksymalnym i dystalnym aorty brzusznej biorcy oraz wstępującej aorty dawcy.</li>
<li style="text-align: left">Anastomozę prawej strony aorty brzusznej biorcy i wstępującej aorty dawcy wykonuje się za pomocą szwów ciągłych.</li>
<li style="text-align: left">W pierwszej kolejności wykonuje się dwa szwy stabilizujące w punkcie proksymalnym i dystalnym żyły głównej dolnej biorcy oraz tętnicy płucnej dawcy w celu wykonania anastomosis tętnicy płucnej dawcy i żyły głównej dolnej biorcy.</li>
<li style="text-align: left">Lewą ścianę żyły głównej dolnej i tętnicy płucnej dawcy zamyka się szwami ciągłymi wewnątrz żyły głównej dolnej.</li>
<li style="text-align: left">Po zawiązaniu jednego węzła szwem stabilizującym w punkcie proksymalnym, prawą ścianę żyły głównej dolnej i tętnicę płucną dawcy zamyka się szwami ciągłymi na zewnątrz żyły głównej dolnej.</li>
<li style="text-align: left">Serce dawcy przekłada się na prawą stronę brzucha biorcy. Prawą ścianę anastomosis aorty brzusznej biorcy i wstępującej aorty dawcy zamyka się szwami ciągłymi.</li>
<li style="text-align: left">Po wykonaniu anastomosis usuwa się podwiązanie dystalne, aby sprawdzić, czy nie występuje krwawienie z miejsca zespolenia.</li>
<li style="text-align: left">Jeśli krwawienie z anastomosis jest minimalne lub nie występuje, usuwa się podwiązanie proksymalne. Serce dawcy natychmiast wypełnia się krwią, zmienia kolor na czerwony i zaczyna ponownie bić.</li>
<li style="text-align: left">Jelita wprowadza się z powrotem do jamy brzusznej, którą zamyka się szwami ciągłymi 6-0.</li>
<li style="text-align: left">Myszy biorcy umieszcza się w ciepłym miejscu. Po godzinie biorca budzi się z narkozy.</li>
</ol>
&nbsp;

<ol><li>Corry, R. obert J., Winn, H. enry J., Russell, P. aul S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+heart+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of heart in mice.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li>
</ol>

Wyniki
Z powodzeniem przeprowadziliśmy ponad 1000 przypadków heterotopowego przeszczepu serca u myszy, osiągając ponad 90% skuteczności u różnych szczepów, w tym u myszy typu dzikiego, transgenicznych oraz z nokautem genowym.
Dyskusja
Od czasu, gdy dr Corry i dr Russell wprowadzili heterotopowe przeszczepy serca u myszy w 1973 roku, model ten okazał się szczególnie wartościowy w badaniu odpowiedzi immu...

heterotopowe przeszczepienie serca u myszy

Heterotopic Heart Transplantation in Mice

Heterotopowe przeszczepianie serca u myszy jest szeroko stosowane od czasu wprowadzenia tej metody przez dr. Corry'ego i dr. Russella w 1973 roku. Jest ona szczególnie cenna w badaniu odrzutów i odpowiedzi immunologicznej, zwłaszcza w obliczu dostępności nowszych myszy transgenicznych i z nokautem genów oraz opracowania licznych odczynników immunologicznych. Model przeszczepu serca jest mniej rygorystyczny niż modele przeszczepu skóry, choć pod względem technicznym bardziej wymagający. Opracowaliśmy zmodyfikowaną technikę i przeprowadziliśmy ponad 1000 udanych przypadków heterotopowego przeszczepiania serca u myszy. Podczas wykonywania anastomozy aorty wstępującej i aorty brzusznej, dwa szwy stabilizujące zostają umieszczone w proksymalnym i dystalnym wierzchołku aorty brzusznej biorcy oraz aorty wstępującej dawcy; następnie, przy użyciu nici 11-0, wykonuje się anastomozę po obu stronach aorty za pomocą szwów ciągłych. Szwy stabilizujące ułatwiają wykonanie anastomozy, a rozmiar nici 11-0 jest optymalny, aby zapobiec krwawieniu i zakrzepicy.
Podczas wykonywania anastomozy tętnicy płucnej i żyły głównej dolnej, w proksymalnym i dystalnym wierzchołku żyły głównej dolnej biorcy oraz tętnicy płucnej dawcy zakłada się dwa szwy stabilizujące. Lewą ścianę żyły głównej dolnej i tętnicę płucną dawcy zamyka się szwami ciągłymi wewnątrz żyły głównej dolnej; po zawiązaniu jednego węzła przy proksymalnym szwie stabilizującym, prawą ścianę żyły głównej dolnej i tętnicę płucną dawcy zamyka się szwami ciągłymi na zewnątrz żyły głównej dolnej, używając nici 10-0. Metoda ta jest łatwiejsza w wykonaniu, ponieważ anastomoza jest tworzona po jednej stronie żyły głównej dolnej, a nici 10-0 mają odpowiedni rozmiar, aby uniknąć krwawienia i zakrzepicy. W niniejszym artykule przedstawiamy szczegóły techniki uzupełniające materiał wideo.

Model heterotopowego przeszczepienia serca u myszy został uznany przez wielu badaczy za istotną metodę badania mechanizmów odrzutu i odpowiedzi immunologicznej. Jednak techniki z nią związane wciąż stanowią wyzwanie. Dzięki modyfikacji standardowych metod z sukcesem przeprowadziliśmy ponad 1000 przeszczepów.

Heterotopowe przeszczepienie serca u myszy

Heterotopowe przeszczepy serca u myszy są szeroko stosowane od czasu wprowadzenia tej metody przez drów Corry’ego i Russella w 1973 roku. Są one szczególnie wartościowe...

Nazywam się Hun Li. Pracuję w laboratorium dr Kas w Departamencie Chirurgii Uniwersytetu Kalifornijskiego w San Francisco. Dzisiaj zaprezentuję procedury heterotopowego przeszczepiania serca u myszy. Model ten stanowi niezwykle istotne narzędzie w dziedzinie transplantologii organów od czasu jego wprowadzenia przez lekarzy Carrie i Russella w 1973 roku.Jest to niezwykle cenny model do badania nowych leków immunosupresyjnych oraz mechanizmów odrzucania przeszczepu. Ograniczono trudności techniczne. W celu zastosowania supresji w tym modelu zmodyfikowałem niektóre etapy.Uprość tę procedurę. Jestem pewien, że będą zachwyceni, gdy wykonasz ten model. Dobrze? Przedstawiłem właśnie procedurę heterotopowego przeszczepu serca u myszy.Najważniejszym krokiem w tej procedurze jest uzyskanie odpowiedniej gęstości szwów. Nie powinny być one zbyt rzadkie ani zbyt ciasne, a proces osmozy powinien zakończyć się w ciągu 30 minut. Ten model transplantacji jest niezwykle użyteczny w badaniu odpowiedzi immunologicznych po przeszczepieniu narządów oraz w poszukiwaniu nowych leków immunosupresyjnych.Mam nadzieję, że teraz będą Państwo w stanie przeprowadzić te procedury we własnych laboratoriach. Dziękuję i do widzenia.

heterotopic-heart-transplantation-in-mice

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Przeszczepienie heterotopowe serca u myszy

Model przeszczepu mysiego serca szyjnego doskonale nadaje się do badań immunologicznych i niedokrwiennych uszkodzeń reperfuzyjnych. Zmodyfikowaliśmy procedurę przy użyciu techniki mankietu bez szwów i przeprowadziliśmy ponad 1000 udanych przeszczepów przy użyciu tego podejścia. Niniejszym podajemy dodatkowe szczegóły tej techniki, aby uzupełnić film.

Mysi model przeszczepu szyjki macicy przy użyciu zmodyfikowanej techniki mankietowej

Technika jest demonstrowana dla procedury mikrochirurgicznej do heterotopowego przeszczepu serca u myszy, w tym uproszczone metody pobierania dawców i zespolenia naczyń biorców.

Zmodyfikowana metoda heterotopowego przeszczepu serca myszy

W manuskrypcie opisano kroki wymagane do przeprowadzenia heterotopowego przeszczepu serca u myszy.

Mysia heterotopowa technika przeszczepu serca

Aby zrozumieć komórkowe i molekularne mechanizmy leżące u podstaw powstawania nowotworów i rozwoju zwężeń w zastawkach serca z inżynierii tkankowej, opracowano mysi model heterotopowego przeszczepu zastawki serca. Zastawkę płucną serca przeszczepiono biorcy przy użyciu techniki heterotopowego przeszczepiania serca.

Przeszczepienie zastawki płucnej z wykorzystaniem mysiego modelu heterotopowego przeszczepienia serca

Technika mankietowa skraca i ułatwia model heterotopowego przeszczepu szyjki macicy u myszy, unikając technicznie trudnych zespoleń szwów w małych naczyniach. Szczegóły techniczne przedstawione w tym artykule wideo powinny pozwolić naukowcom na ustalenie tego modelu w swoich laboratoriach.

Heterotopowy przeszczep szyjki macicy u myszy

Tutaj opisujemy przedkliniczny model ortotopowego przeszczepu serca na dużych zwierzętach (świniach), który został mocno ugruntowany i wykorzystany do zbadania nowych strategii kardioprotekcyjnych.

Przedkliniczny model ortotopowego przeszczepiania serca od świń

Pokazano nowatorską technikę rekonstrukcji obwodu krwi w heterotopowym modelu przeszczepu serca myszy w jamie brzusznej.

Rekonstrukcja obwodu krwi w modelu przeszczepu serca myszy w jamie brzusznej

W obecnym protokole, model przeszczepu serca myszy jest używany do badania mechanizmu odrzucania przeszczepu alloprzeszczepu serca. W tym heterotopowym modelu przeszczepu serca poprawia się efektywność operacji, a przeżycie przeszczepów serca jest zapewnione dzięki zespoleniu implantacji serca w szyjce macicy od końca do końca przy użyciu zmodyfikowanej techniki Cuff.

Zmodyfikowana technika mankietowa dla heterotopowego modelu przeszczepu szyjki macicy serca u myszy

Modele transplantacji serca u myszy stanowią cenne narzędzia badawcze do badania immunologii transplantacyjnej. Niniejszy protokół szczegółowo opisuje heterotopowy przeszczep serca szyjki macicy u myszy, który polega na umieszczeniu mankietów na wspólnej tętnicy szyjnej biorcy i pniu tętnicy płucnej dawcy, aby umożliwić laminarny przepływ krwi.

Heterotopowy przeszczep szyjki macicy u myszy z wykorzystaniem mankietów naczyniowych

Ten protokół przedstawia uproszczoną technikę anastomozy szwu końcowo-bocznego do przeszczepu serca szyjnego u myszy, zapewniając solidny i możliwy do powtórzenia model do badania immunologii przeszczepów.

Przeszczepienie heterotopowe serca mysiego w okolicy szyjnej z zastosowaniem techniki anastomozy końca z boku w celu badania immunologii przeszczepów

Naucz się techniki heterotopowego przeszczepu serca u myszy do badań nad odpowiedzią immunologiczną i mechanizmami odrzucania. Ta zmodyfikowana metoda umożliwia niezawodne testowanie nowych leków immunosupresyjnych.

Heterotopowe przeszczepienie serca u myszy

Przeglądaj więcej filmów