Przesiewowe bakterie morskie pod kątem izolacji szczepów degradujących zanieczyszczenia

Pobierz próbkę wody morskiej zawierającej różnorodne mikroorganizmy, w tym bakterie niszczące zanieczyszczenia środowiskowe.

Próbkę rozcieńczaj seryjnie, aby zmniejszyć gęstość mikroorganizmów, i nakładaj ją na nośnik odżywczy.

Po wykubaniu wybierać morfologicznie odrębne kolonie, które mogą nadal posiadać genetycznie i metabolicznie różnorodne typy bakterii.

Każdą wybraną kolonię rozpraszaj w rozproszenie pojedynczych komórek i inkubację.

Każda komórka tworzy kolonię, reprezentując genetycznie czysty izolat bakteryjny o unikalnym profilu metabolicznym.

Każdy izolat zaszczepić w podłożu wzrostu i inkubować, aby zwiększyć biomasę.

Rozwiń hodowlę, wyrzuć supernatant i przemyj buforem, aby usunąć pozostałe podłoże.

Ponownie zawiesi komórki w buforze i zaszczep je w podłożu selekcyjnym zawierającym EE2, zanieczyszczenie środowiska.

Jako jedyne źródło węgla w ośrodku, EE2 wybiera bakterie, które mogą go metabolizować dla energii i wzrostu.

Mętność w ośrodku wskazuje na wzrost bakterii, potwierdzając izolację izolatu bakterii niszczącego zanieczyszczenia.

Aby selekcjonować bakterie, najpierw wykonaj seryjne rozcieńczenia od 10 do minus dziewięć w sterylnym roztworze soli fizjologicznej dla próbek